一种锁掷酵母MI-1及其在风化煤降解中的应用制造技术

本发明专利技术公开一种新菌种锁掷酵母（

【技术实现步骤摘要】
一种锁掷酵母MI-1及其在风化煤降解中的应用
本专利技术涉及微生物菌种及其应用的
，具体的涉及一种新的锁掷酵母MI-1及其在溶煤中应用的

技术介绍
我国常规能源资源总量为6.23万亿吨标准煤，其中原煤5.57万亿吨，占89.3％。从数据可知我国能源结构与其它国家显著不同，我国的煤炭在能源资源中具有绝对优势地位。其中，新疆煤炭的预测储量约2.19万亿吨，占全国总储量的40％以上，居全国首位。而在这些煤炭资源中，低阶煤占了相当高的比例。低阶煤是处于低变质阶段的煤，其定义是Qgr.maf<24MJ/kg的煤。在低阶煤中风化煤储量十分丰富。风化煤是出露于地表或埋藏于浅部的褐煤，烟煤、无烟煤长期经受自然环境以及矿物质侵蚀等综合作用后的产物，风化了的煤的化学和物理性质都发生了极为明显的改变，氧化严重，含有的脂肪烃和含氧官能团较多，其水分增加，颜色变浅，光泽变暗，挥发分增加，机械强度、发热量、粘结性、着火点都降低；其元素组分也发生重大变化：碳和氢的含量减少，羧基、酚羟基、醌基、醇羟基等多种含氧活性官能团增加，再生腐殖酸也明显增加。风化煤直接燃烧时热效率极低，若长期露天堆放，会造成能源的浪费，而且易引起环境污染。虽然风化煤利用率低，但却是腐植酸的重要来源之一，大部分风化煤的总腐植酸含量在40％左右，具有非常广阔的应用前景。目前对风化煤的开发利用很有限，通常采用的是物理、化学方法，需要在外加一定的压力、一定的温度等条件下来进行。从整个过程来看，成本较高、条件苛刻，还会产生一系列的环境问题。采用微生物转化技术来处理煤炭，使之转化成另一种产品，或者从中提取化工品，或作为其它类物质，具有工艺简单、低能耗、无污染等许多常规处理技术难以比拟的优点。因此利用微生物开发、利用低阶煤资源成为国内外研究的热点。目前有许多利用锁掷酵母进行开发利用的报道，公开号为CN102115716A的中国专利(一种锁掷酵母菌株及其应用)，该专利主要是提供一种锁掷酵母菌及其在发酵制备类胡萝卜素中的应用，并提供了制备类胡萝卜素方法；公开号为CN102766580B的中国专利(一株产生物表面活性剂的酵母菌株及其应用)，该专利提供的鲑色锁掷酵母菌株能够以C10-C24烷烃和/或多环芳烃为碳源进行生长，在降解含有疏水性有机污染物废水方面具有工业化的前景，风化煤成分复杂，既不属于C10-C24烷烃，也不属于多环芳烃，该专利也没有披露鲑色锁掷酵母菌株能够用于降解风化煤。现有专利或期刊中都没有披露锁掷酵母可以降解风化煤，也没有提供一种能够有效降解风化煤的锁掷酵母菌株，因此需要进一步探究锁掷酵母的特性，提供能够用于降解风化煤的方法，对于微生物利用开发
具有现实意义。
技术实现思路
针对现有技术中尚未记载有关锁掷酵母在风化煤降解方面应用的技术现状，且现有风化煤开发方法存在成本高、条件苛刻、污染严重等一系列问题，本专利技术旨在为风化煤开发提供具有溶煤效果好且性能稳定的新的菌株，提供一种新菌种锁掷酵母(Sporidiolussp.)MI-1及其在风化煤降解中的应用。本专利技术通过在新疆克拉玛依油田附近被污染的土壤中分离筛选出一株锁掷酵母(Sporidiolussp.)MI-1CGMCCNo.13159，利用分离出的菌种制备溶煤制剂，应用到低阶风化煤中，具有稳定和显著的降解效果，对于微生物菌种应用
具有广泛的应用价值。本专利技术采用的主要技术方案：本专利技术具体提供一种锁掷酵母(Sporidiolussp.)MI-1CGMCCNo.13159。通过从新疆克拉玛依油田附近地下5-10cm被污染的土壤中分离取样，筛选出一株锁掷酵母(Sporidiolussp.)MI-1，该菌对一号风化煤的转化率为24.32％，对三号风化煤的转化率为28.06％，具有显著的降解效果稳定的特性。本专利技术根据新疆地理环境的特殊性和新疆煤炭资源富集的特点，通过从新疆克拉玛依油田附近被污染的土壤中进行微生物菌种的培养、分离，筛选一批优良菌种，并从中分离筛选出一株编号为MI-1的锁掷酵母(Sporidiolussp.)，经微生物学分类与鉴定，属于锁掷酵母属，该菌株最适生长条件为：温度25℃，最高生长温度为30℃，培养基为PDA培养基，pH＝7，培养时间为48-72h。参照《真菌鉴定手册》等对菌株进行形态学、生理生化试验，确定MI-1菌株为锁掷酵母属中成员，但是具有与常见的锁掷酵母属成员菌种不同的特点，具有一些新菌种的特性。通过对上述菌种基因测序，序列参见附后提供的SEQUENCELISTING，经16SRNA同源分析、系统发育分析，通过BLAST同源比对，确定与实验菌株亲缘关系最近的种属。从数据库获得相关种属的序列，并结合真菌生物多样性研究中心数据库，进行聚类分析和系统进化树构建。MI-1菌株归属于锁掷酵母(Sporidiolussp.)菌株MI-1与该属模式菌株序列比对最高同源性为99％(SporidiobolusmetaroseusKX376263.1)，与该属其它菌株同源性均低于99％，初步确定其为锁掷酵母属(Sporidiolussp.)新种，具有新菌种典型性的特点，从分类学角度暂命名为锁掷酵母(Sporidiolussp.)MI-1。已于申请日前保藏于布达佩斯条约微生物国际保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)。地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编：100101。保藏日期2016年10月27日，菌种保藏号为CGMCCNo.13159。经微生物学鉴定暂命名为锁掷酵母(Sporidiolussp.)MI-1。菌株在PDA培养基上，菌落表面光滑、湿润粘稠，边缘齐整，菌体大小不等，符合酵母菌菌落特征。菌株细胞呈球形至椭圆形，有明显的出芽生殖特征。显微镜下观察，该菌株产生了假菌丝。生殖方式主要是不对称掷孢子、芽殖。同时，本专利技术进一步提供一种利用锁掷酵母(Sporidiolussp.)MI-1CGMCCNo.13159制备溶煤制剂的方法，具体步骤如下：液体溶煤制剂：筛选出的菌株MI-1接到装有10mLPDA液体培养基的试管中，在30℃、150r/min的条件下摇床培养24-36h后，试管中加10mL无菌水剧烈振荡后，经适当稀释制备成含有106个孢子悬浮液。吸取上述孢子悬浮液1mL，接种于PDA液体培养基中，25℃、150rpm培养96h，得到种子液。按3％-5％接种量接种于发酵培养基，在pH＝7、25℃-30℃、150rpm条件下培养4d—5d，收获菌体及发酵液。该发酵液密封包装，即可获得溶煤制剂。固体溶煤制剂：筛选出的菌株MI-1接到装有10mLPDA液体培养基的试管中，在30℃、150r/min的条件下摇床培养24-36h后，试管中加10mL无菌水剧烈振荡后，经适当稀释制备成含有106个孢子悬浮液。吸取上述孢子悬浮液1mL，接种于PDA液体培养基中，25℃、150rpm培养96h，得到种子液。按3％-5％接种量接种于固体发酵培养基，25℃-30℃，固体发酵4d—5d，至菌丝长满固体培养基，上层有大量孢子产生，即可获得固体溶煤制，密封保存。本专利技术进一步提供利用锁掷酵母(Sporidiolussp.)MI-1CGMCCNo.1315本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种锁掷酵母（

【技术特征摘要】
1.一种锁掷酵母（Sporidiolussp.）MI-1，其特征在于，所述的锁掷酵母（Sporidiolussp.）MI-1的菌种保藏号为CGMCCNo.13159。2.一种利用锁掷酵母（Sporidiolussp.）MI-1CGMCCNo.13159制备溶煤制剂的方法，具体方法如下：（1）液体溶煤制剂：筛选出的菌株MI-1接到装有10mLPDA液体培养基的试管中，在30℃、150r/min的条件下摇床培养24-36h后，试管中加10mL无菌水剧烈振荡后，经适当稀释制备成含有106个孢子悬浮液，吸取上述孢子悬浮液1mL，接种于PDA液体培养基中，25℃、150rpm培养96h，得到种子液，按3%-5%接种量接种于发酵培养基，在pH=7、25℃-30℃、150rpm条件下培养4d—5d，收获菌体及发酵液，该发酵液密封包装，即可获得溶煤制剂；（2）固体溶煤制剂：筛选出的菌株MI-1接到装有10mPDA液体培养基的试管中，在30℃、150r/min的条件下摇床培养24-36h后，试管中加10mL无菌水剧烈振荡后，经适当稀释制备成含有...

【专利技术属性】
技术研发人员：高雁，韩娇娇，霍向东，史应武，楚敏，杨红梅，林青，
申请(专利权)人：新疆农业科学院微生物应用研究所中国新疆亚美尼亚生物工程研究开发中心，
类型：发明
国别省市：新疆,65