一种混合益生菌干燥物及制备方法技术

本发明专利技术公开一种混合益生菌干燥物及其制备方法，所述混合益生菌含量为3.1×10

【技术实现步骤摘要】
一种混合益生菌干燥物及制备方法
本专利技术属于混合益生菌的制备范畴，特别设计一种能有效保持益生菌有效含量稳定的益生菌组合物。
技术介绍
常规混合益生菌干燥物的制备方法：将益生菌投入到各自的液体发酵罐中，恒温定时培养，搅拌发酵罐中成分，使其成为均一的菌悬液，然后用喷雾干燥机进行喷雾干燥。喷雾干燥法是以单一工序将溶液、乳液、悬浮液或浆状物加工成粉状干燥制品的一种干燥法。将被干燥的成分经雾化器作用，喷成非常细微的雾滴，并依靠干燥介质(热空气、冷空气、烟道气或惰性气体)与雾滴均匀混合，进行热交换和质交换，使得溶剂气化或使得熔融物固化。干燥的过程分为恒速率干燥和降速率干燥2个过程。首先经过恒速率干燥，此期间干燥时间极短，物料表面温度约45℃。然后进入降速率干燥期，由于固形物的热阻力较大和水分转移阻力增大，所以干燥时间较长，一般需20～30s，此时粉末最高温度和干燥塔温度相同，一般约80～100℃。喷雾干燥结束后将各自的益生菌沉淀物按照比例混合均匀，即可得到混合益生菌干燥物。常规制备混合益生菌干燥物的缺点：喷雾干燥过程中温度很高，益生菌由于缺少保护成分，严重影响益生菌的活菌数量，活菌数量至少下降10％以上。喷雾干燥技术对益生菌损伤的影响，主要是高温和脱水。研究发现，对进料液单独雾化过程菌株没被破坏，或者引起的损伤不明显，高温和干燥脱水才是引起益生菌损伤的主要原因。高温能破坏微生物的细胞膜，使细胞膜上类脂质成分形成极小的孔，使细胞内容物泄漏，从而导致死亡。高温还导致益生菌的细胞壁、核酸、酶系统等重要生物高分子的氢键受到破坏，导致菌体蛋白质凝固变性，核酸发生降解变性失活，从而导致菌体死亡。脱水可引起细胞膜、蛋白质结构和功能完整性的不可逆变化，从而破坏菌体结构。同时，缺少保护成分的益生菌在长时间放置时，益生菌质量也不稳定。
技术实现思路
基于上述原因本专利技术提供了一种适用于喷雾干燥方法生产益生菌干燥物的方法。所述益生菌干燥物的制备方法为：(1)将益生菌投入到含LB肉汤培养基的发酵罐中，繁殖培养后，搅拌发酵罐中成分，使其成为均一的菌悬液；(2)发酵后益生菌悬液与多孔淀粉、葡萄糖均匀混合；(3)混合均匀后用喷雾干燥机喷雾干燥处理；所述在培养条件为37～42℃，标准大气压下经48小时繁殖培养；所述益生菌为枯草芽孢杆菌与地衣芽孢杆菌中的一种或混合物，所述枯草芽孢杆菌与地衣芽孢杆菌的菌落数比为0:1～1:0。所述LB肉汤培养基添加量与枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌的质量比为100:1，所述枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌的菌落数均≥100亿cfu/g。所述发酵后的益生菌菌悬液：多孔淀粉:葡萄糖的质量比为10:1:1～10:1:3，优选10:1:2。所述利用喷雾干燥处理，得到混合益生菌干燥物的性状为微黄色粉末状固体，平均粒径3um。本专利技术所用的多孔淀粉又名微孔淀粉，是一种新型的变性淀粉，它是具有生淀粉酶活力的酶在低于糊化温度下，作用于生淀粉而形成的多孔性蜂窝状产物。微孔淀粉表面布满直径为1μm左右的小孔，小孔由表面向中心深入，孔的容积占颗粒体积的50％左右。因此，多孔淀粉是一种极细的微细胞的粉末，是高科技含量的益生菌包埋保护材料。本专利技术的有益效果是：1、干燥物中益生菌成分(枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌)能在同一个含LB培养基的发酵罐中增殖，避免了益生菌因所需培养基的不同而单独发酵的特点，省时省力。2、使用多孔淀粉和葡萄糖作为保护剂。在制备混合益生菌干燥物的喷雾干燥过程中，能使益生菌进入多孔淀粉的内部。葡萄糖的应用能使淀粉孔中的菌体处于相对密闭的环境中。多孔淀粉和葡萄糖降低了高温对益生菌的影响，还能很好的保护菌体因装置工作噪音和其他外界因素的影响。多孔淀粉和葡萄糖避免了喷雾干燥过程中，因为高温和脱水导致益生菌的细胞膜、细胞壁、核酸、酶系统等重要生物高分子的氢键受到破坏，菌体蛋白质凝固变性，最终导致菌体死亡。多孔淀粉和葡萄糖使干燥物中活菌的数量能够保证在一个较高的水平，很好的解决传统生产过程中含菌量低、功能损失严重、质量不稳定等多种问题，用同样的生产设备，高效、稳定的连续生产出活菌数含量高的混合益生菌干燥物。具体实施方式实施例1将菌落数为100亿cfu/g的枯草芽孢杆菌、100亿cfu/g地衣芽孢杆各100g投入到含LB肉汤培养基20kg的发酵罐中。(LB肉汤培养基的组成，胰蛋白胨10g，酵母5g，NaCl10g，用800mL蒸馏水溶解后调pH为7.0，之后定容至1000mL，在121℃、101kPa条件下高压蒸汽灭菌20min。可根据实际需要扩大各成分的比例。)(1)在42℃、标准大气压下经48小时繁殖培养后，搅拌发酵罐中成分，使其成为均一的菌悬液，取10kg进行喷雾干燥。得到微黄色粉末状固体物即为混合益生菌干燥物。40℃放置六个月，分别在0、1、2、3、6月取样后，检测干燥物中益生菌的活菌数。计数结果详见表1。(2)在剩余罐中加入1kg多孔淀粉、1kg葡萄糖，搅拌均匀后，喷雾干燥，得到微黄色粉末状固体物即为含保护剂的混合益生菌干燥物。40℃放置六个月，分别在0、1、2、3、6月取样后，检测干燥物中益生菌的活菌数。计数结果详见表1。检测干燥物中益生菌的活菌数的方法：(1)设两个组别：取两个装有9mL无菌生理盐水并有5个小玻璃珠的带塞子的试管，分别称取待测样品1.000g放入其中，在漩涡振荡器上充分振荡10min充分混匀，静置约20～30S即成10-1稀释液；试管A组室温(约25℃)放置10min、试管B组80℃水浴10min，取出立即冷却至室温。(2)再用1mL的移液枪吸取0.5mL的10-1稀释液放入装有4.5mL无菌水的试管中，充分混匀即成10-2稀释液；再取0.5mL的10-1稀释液放入装有4.5mL无菌水的试管中，充分混匀即成10-3稀释液；以此类推，连续稀释，制成10-4、10-5、10-6、10-7等一系列稀释度，供平板接种使用。(3)选10-7梯度溶液，用0.1mL的移液枪吸取0.1mL注入LB培养基，用无菌玻璃涂布棒轻轻涂布均匀。将上述培养皿倒置放于恒温培养箱内，37℃培养24h。每个组别设置三个平行，计数时应选取菌落数在30～300之间的梯度进行计数，取计数平均值。实施例2喷雾干燥前，将发酵后的益生菌菌悬液：多孔淀粉:葡萄糖的质量比为10：1:2混合均匀。将含量为100亿cfu/g的枯草芽孢杆菌200g投入到含LB肉汤培养基20kg的发酵罐中。(LB肉汤培养基的组成，胰蛋白胨10g，酵母5g，NaCl10g，用800mL蒸馏水溶解后调pH为7.0，之后定容至1000mL，在121℃、101kPa条件下高压蒸汽灭菌20min。可根据实际需要扩大各成分的比例。)在37℃、标准大气压下经48小时繁殖培养后，搅拌发酵罐中成分，使其成为均一的菌悬液，加入多孔淀粉2kg、葡萄糖4kg搅拌均匀后，喷雾干燥，得到微黄色粉末状固体物即为混合益生菌干燥物。40℃放置六个月，分别在0、1、2、3、6月取样后，检测干燥物中益生菌的活菌数。计数结果详见表1。实施例3喷雾干燥前，将发酵后的益生菌菌悬液：多孔淀粉:葡萄糖的质量比为10：1:3混合均匀。将含100亿cfu/g的地衣芽孢杆菌200g投入到含LB肉汤培养基20kg的发酵罐中。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种混合益生菌干燥物的制备方法，其制备步骤包括：(1)将益生菌投入到含LB肉汤培养基的发酵罐中，繁殖培养后，搅拌发酵罐中成分，使其成为均一的菌悬液；(2)发酵后益生菌悬液与多孔淀粉、葡萄糖均匀混合；(3)混合均匀后用喷雾干燥机喷雾干燥处理。

【技术特征摘要】
1.一种混合益生菌干燥物的制备方法，其制备步骤包括：(1)将益生菌投入到含LB肉汤培养基的发酵罐中，繁殖培养后，搅拌发酵罐中成分，使其成为均一的菌悬液；(2)发酵后益生菌悬液与多孔淀粉、葡萄糖均匀混合；(3)混合均匀后用喷雾干燥机喷雾干燥处理。2.如权利要求1所述的方法，所述培养条件为37～42℃，标准大气压下经48小时繁殖培养。3.如权利要求1所述的方法，所述益生菌为枯草芽孢杆菌与地衣芽孢杆菌中的一种或混合物，所述枯草芽孢杆菌与地衣芽孢杆菌的菌落数比为0:1～1:0...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈光明，李旭东，刘爱玲，高明燕，王莹，
申请(专利权)人：瑞普天津生物药业有限公司，
类型：发明
国别省市：天津,12