【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】与突变麦芽糖结合蛋白融合的靶蛋白的溶解和纯化背景当需要大量纯蛋白时,重组蛋白在生物技术中具有多种用途。微生物表达系统,如大肠杆菌和酵母通常是第一选择, 这是由于它们的低成本和高产率。当在大肠杆菌中表达异种蛋白时, 通常碰到蛋白的低水平表达和/或不溶的问题。即使蛋白充分表达并保 持可溶,其必须从细胞提取物的大量其它蛋白中纯化。要促进靶蛋白 的表达和纯化,通常使用的一种方法是对该蛋白融合亲和标记。好的亲和标记具有这样的性质——当融合到靶蛋白的N-末端时,其促进高 水平表达,并提供简单的一步亲和纯化,其允许靶蛋白从表达环境中 被纯化。大肠杆菌的麦芽糖结合蛋白(MBP)通常被用作表达和纯 化大肠杆菌中产生的异种蛋白的亲和标记。MBP的天然功能是在外膜 孔蛋白结合麦芽糖糊精并在内膜将其释放到MalEFK转运元件 (transport apparatus)。 MBP的C-末端与耙蛋白的N-末端融合允许融 合蛋白在大肠杆菌中表达(附图说明图1)。 MBP禾BMBP融合体(ftision)可以 通过结合到色谱基质而在一步内被纯化,所述色谱基质含有大量葡萄 糖a-l—4-葡萄糖多糖中 ...
【技术保护点】
修饰的麦芽糖结合蛋白(MBP),其包括:具有突变的MBP氨基酸序列,其中所述突变使所述修饰的MBP,当融合于蛋白时,具有以下至少一项的提高:(i)对麦芽糖糊精底物的结合亲和力;和(ii)当蛋白具有有限溶解度时的溶解度。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员:PD里格斯,PC赫斯,I沃克,PA科卢西,M加奈特拉,CH塔龙,
申请(专利权)人:新英格兰生物实验室公司,
类型:发明
国别省市:US[美国]
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