多囊性肾病的生物标志物及其用途制造技术

本文提供了用于确定患者中的多囊性肾病(PKD)的治疗功效、诊断患者中的PKD、对患者中的PKD进行分期、以及监测患者中的PKD的方法。这些方法包括确定一个或多个选自下组的标志物的单个或多个水平：增殖细胞核抗原(PCNA)、周期蛋白D1、周期蛋白D3、MAPK‑ERK激酶1(MEK)、核糖体蛋白S6(S6)、磷酸化核糖体蛋白S6(pS6)、胞外信号调控的激酶(ERK)、磷酸化胞外信号调控的激酶(pERK)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(pAkt)、胱天蛋白酶‑2、总S6、和视网膜母细胞瘤结合蛋白(RBBP)。还提供了包含特异性结合至这些标志物中的一个或多个的至少三种抗体的试剂盒。

Biomarkers for polycystic kidney disease and uses thereof

This article provides methods for determining the therapeutic efficacy of polycystic kidney disease (PKD) in patients, diagnosing PKD in patients, staging PKD in patients, and monitoring PKD in patients. The method includes determining a single one or more selected from the group consisting of markers or multiple levels of proliferating cell nuclear antigen (PCNA), cyclin D1, cyclin D3, MAPK ERK kinase 1 (MEK), ribosomal protein S6 (S6), phosphorylated ribosomal protein S6 (pS6), extracellular signal regulated kinase (ERK), phosphorylated extracellular signal regulated kinase (pERK), protein kinase B (Akt), phosphorylated protein kinase B (pAkt), caspase 2, S6, and retinoblastoma binding protein (RBBP). Kits for containing at least three antibodies that are specifically bound to one or more of these markers are also provided.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】多囊性肾病的生物标志物及其用途相关申请的交叉引用本申请要求申请日为2014年8月4日、序列号62/033,031为的美国临时申请的优先权，其全部内容通过提述并入本文。
本专利技术涉及分子医药和分子生物学的方法。专利技术背景多囊性肾病(PKD)是一种常见的遗传病症，其特征为患者肾中随时间的充有流体的上皮内衬的(epithelial-lined)囊肿的形成(Park等,BMBReports44:359-368,2011)。PKD患者中的囊肿可以在数十年内在尺寸和数量上增加，并且取代和破坏邻近的肾实质，其可以最终导致患者的终末期肾病(Chapin等,J.CellBiol.191:701-710,2010)。除了分化和极性的丧失之外，已经显示多种机制贡献于PKD，包括增加的增殖和凋亡(Belibi等,Expert.Opin.Invest.Drugs19:315-328,2010)。许多终末期PKD患者依赖于移植或血液透析以减弱肾衰竭(Park等,2011；同上)。存在两种类型的PKD：常染色体显性PKD(ADPKD)和常染色体隐性PKD(ARPKD)。在2006年，美国约有500,000人被诊断为患有PKD，其中约500到1000人中有1人患ADPKD，而约20,000至40,000人中有1人患ARPKD。ADPKD是肾脏最常见的遗传病症，占美国的终末期肾病患者的～5％(Pei等,Adv.ChronicKidneyDis.17:140-152,2010)。专利技术概述本专利技术基于(至少部分基于)如下发现：增殖细胞核抗原(PCNA)、周期蛋白D1、周期蛋白D3、MAPK-ERK激酶1(MEK)、核糖体蛋白S6(S6)、磷酸化核糖体蛋白S6(pS6)、胞外信号调控的激酶(ERK)、磷酸化胞外信号调控的激酶(pERK)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(pAkt)、胱天蛋白酶-2、总核糖体蛋白S6(S6+pS6)和视网膜母细胞瘤结合蛋白(RBBP)的水平在含有来自PKD患者的生物流体(例如尿液样品或富含外来体的尿液样品)中是升高的，所述水平在含有来自患较晚期PKD的患者的生物流体(例如尿液样品或富含外来体的尿液样品)的样品中与患较早期PKD的患者相比是增加的，且所述水平在含有来自施用了治疗上有效的PKD治疗的PKD受试者的生物流体(例如尿液样品或富含外来体的尿液样品)的样品中是降低的。鉴于此发现，本文提供了用于确定患者中的PKD治疗功效、诊断患者中的PKD、对患者中的PKD进行分期、以及监测患者中的PKD的方法，该方法包括确定PCNA、周期蛋白D1、周期蛋白D3、MEK、S6、pS6、ERK、pERK、Akt、pAkt、胱天蛋白酶-2、总核糖体蛋白S6、和RBBP中的一项或多项的水平。本文提供了在PKD患者中确定针对多囊性肾病(PKD)的治疗功效的方法，其包括：(a)提供包含生物流体的第一样品，所述生物流体在第一时间点处获取自PDK患者；(b)针对外来体而浓缩所述第一样品；(c)确定所述第一样品中选自下组的至少一个标志物的水平：增殖细胞核抗原(PCNA)、周期蛋白D1、周期蛋白D3、MAPK-ERK激酶1(MEK)、核糖体蛋白S6(S6)、磷酸化核糖体蛋白S6(pS6)、胞外信号调控的激酶(ERK)、磷酸化胞外信号调控的激酶(pERK)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(pAkt)、胱天蛋白酶-2、总核糖体蛋白S6、和视网膜母细胞瘤结合蛋白(RBBP)；(d)对所述PKD患者施用针对PKD的治疗；(e)提供包含生物流体的第二样品，所述生物流体在步骤(d)之后的第二时间点处获取自所述PDK患者，并在所述第二样品上进行步骤(b)和(c)；及(f)如果在所述第二时间点处的水平与第一时间点相比是下降的，则鉴定所施用的治疗为有效。在本文所述的任一方法的一些实施方案中，所述施用的治疗是施用葡萄糖基神经酰胺合酶(glucosylceramidesynthase,GCS)抑制剂。在本文所述的任一方法的一些实施方案中，所述GCS抑制剂选自下组：(S)-奎宁环-3-基(2-(4'-(2-甲氧基乙氧基)-[1,1'-联苯基]-4-基)丙-2-基)氨基甲酸酯；4-氟-1-(5-氟-4-(4-((2-甲氧基乙氧基)甲基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(4-甲基-1-氮杂双环[3.2.2]壬-4-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-((2-甲氧基乙氧基)甲基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(3-甲基奎宁环-3-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-((2-甲氧基乙氧基)甲基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(4-甲基-1-氮杂双环[3.2.2]壬-4-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-(甲氧基甲基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(3-甲基奎宁环-3-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-(甲氧基甲基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(4-甲基-1-氮杂双环[3.2.2]壬-4-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(3-甲基奎宁环-3-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(4-甲基-1-氮杂双环[3.2.2]壬-4-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-(2-氟乙氧基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(奎宁环-3-基)哌啶-4-羧酰胺；及4-氟-1-(4-(4-(2-氟乙氧基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(4-甲基-1-氮杂双环[3.2.2]壬-4-基)哌啶-4-羧酰胺。本文所述的任一方法的一些实施方案在(f)后进一步包括：(g)施用额外剂的被鉴定为对PKD患者有效的施用的GCS抑制剂。在本文所述的任一方法的一些实施方案中，在步骤(g)中对PKD患者施用额外剂的如下：(S)-奎宁环-3-基(2-(4'-(2-甲氧基乙氧基)-[1,1'-联苯基]-4-基)丙-2-基)氨基甲酸酯；4-氟-1-(5-氟-4-(4-((2-甲氧基乙氧基)甲基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(4-甲基-1-氮杂双环[3.2.2]壬-4-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-((2-甲氧基乙氧基)甲基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(3-甲基奎宁环-3-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-((2-甲氧基乙氧基)甲基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(4-甲基-1-氮杂双环[3.2.2]壬-4-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-(甲氧基甲基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(3-甲基奎宁环-3-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-(甲氧基甲基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(4-甲基-1-氮杂双环[3.2.2]壬-4-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(3-甲基奎宁环-3-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(4-甲基-1-氮杂双环[3.2.2]壬-4-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-(2-氟乙氧基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(奎宁环-3-基)哌啶-4-羧酰胺；或4-氟-1-(4-(4-(本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种确定多囊性肾病(PKD)患者中的PKD的治疗功效的方法，该方法包括：(a)提供包含生物流体的第一样品，所述生物流体在第一时间点处获取自PDK患者；(b)针对外来体而浓缩所述第一样品；(c)确定所述第一样品中选自下组的至少一个标志物的水平：增殖细胞核抗原(PCNA)、周期蛋白D1、周期蛋白D3、MAPK‑ERK激酶1(MEK)、核糖体蛋白S6(S6)、磷酸化核糖体蛋白S6(pS6)、胞外信号调控的激酶(ERK)、磷酸化胞外信号调控的激酶(pERK)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(pAkt)、胱天蛋白酶‑2、总核糖体蛋白S6、和视网膜母细胞瘤结合蛋白(RBBP)；(d)对所述PKD患者施用针对PKD的治疗；(e)提供包含生物流体的第二样品，所述生物流体在步骤(d)之后的第二时间点处获取自所述PDK患者，并在所述第二样品上进行步骤(b)和(c)；及(f)如果在所述第二时间点处的水平与第一时间点相比是下降的，则鉴定所施用的治疗为有效。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.08.04 US 62/033,0311.一种确定多囊性肾病(PKD)患者中的PKD的治疗功效的方法，该方法包括：(a)提供包含生物流体的第一样品，所述生物流体在第一时间点处获取自PDK患者；(b)针对外来体而浓缩所述第一样品；(c)确定所述第一样品中选自下组的至少一个标志物的水平：增殖细胞核抗原(PCNA)、周期蛋白D1、周期蛋白D3、MAPK-ERK激酶1(MEK)、核糖体蛋白S6(S6)、磷酸化核糖体蛋白S6(pS6)、胞外信号调控的激酶(ERK)、磷酸化胞外信号调控的激酶(pERK)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(pAkt)、胱天蛋白酶-2、总核糖体蛋白S6、和视网膜母细胞瘤结合蛋白(RBBP)；(d)对所述PKD患者施用针对PKD的治疗；(e)提供包含生物流体的第二样品，所述生物流体在步骤(d)之后的第二时间点处获取自所述PDK患者，并在所述第二样品上进行步骤(b)和(c)；及(f)如果在所述第二时间点处的水平与第一时间点相比是下降的，则鉴定所施用的治疗为有效。2.权利要求1的方法，其中所述施用的治疗是施用葡萄糖基神经酰胺合酶(glucosylceramidesynthase,GCS)抑制剂。3.权利要求2的方法，其中所述GCS抑制剂选自下组：(S)-奎宁环-3-基(2-(4'-(2-甲氧基乙氧基)-[1,1'-联苯基]-4-基)丙-2-基)氨基甲酸酯；4-氟-1-(5-氟-4-(4-((2-甲氧基乙氧基)甲基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(4-甲基-1-氮杂双环[3.2.2]壬-4-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-((2-甲氧基乙氧基)甲基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(3-甲基奎宁环-3-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-((2-甲氧基乙氧基)甲基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(4-甲基-1-氮杂双环[3.2.2]壬-4-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-(甲氧基甲基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(3-甲基奎宁环-3-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-(甲氧基甲基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(4-甲基-1-氮杂双环[3.2.2]壬-4-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(3-甲基奎宁环-3-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(4-甲基-1-氮杂双环[3.2.2]壬-4-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-(2-氟乙氧基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(奎宁环-3-基)哌啶-4-羧酰胺；和4-氟-1-(4-(4-(2-氟乙氧基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(4-甲基-1-氮杂双环[3.2.2]壬-4-基)哌啶-4-羧酰胺。4.权利要求2的方法，其在(f)后进一步包括：(g)施用额外剂的所述被鉴定为对PKD患者有效的施用的GCS抑制剂。5.权利要求4的方法，其中在步骤(g)中对PKD患者施用的额外剂的如下：(S)-奎宁环-3-基(2-(4'-(2-甲氧基乙氧基)-[1,1'-联苯基]-4-基)丙-2-基)氨基甲酸酯；4-氟-1-(5-氟-4-(4-((2-甲氧基乙氧基)甲基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(4-甲基-1-氮杂双环[3.2.2]壬-4-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-((2-甲氧基乙氧基)甲基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(3-甲基奎宁环-3-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-((2-甲氧基乙氧基)甲基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(4-甲基-1-氮杂双环[3.2.2]壬-4-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-(甲氧基甲基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(3-甲基奎宁环-3-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-(甲氧基甲基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(4-甲基-1-氮杂双环[3.2.2]壬-4-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(3-甲基奎宁环-3-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(4-甲基-1-氮杂双环[3.2.2]壬-4-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-(2-氟乙氧基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(奎宁环-3-基)哌啶-4-羧酰胺；或4-氟-1-(4-(4-(2-氟乙氧基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(4-甲基-1-氮杂双环[3.2.2]壬-4-基)哌啶-4-羧酰胺。6.权利要求1的方法，其中步骤(c)和(e)包括确定至少两个选自下组的标志物的水平：PCNA、周期蛋白D1、周期蛋白D3、MEK、S6和pS6，并且若所述两个水平的至少一个在第二时间点处与在第一时间点处相比是降低的，则鉴定所述施用的治疗为有效。7.权利要求6的方法，其中如果两个水平在第二时间点处与在第一时间点处相比都是降低的，则鉴定所述施用的治疗为有效。8.权利要求1的方法，其中步骤(c)和(e)包括确定至少三个选自下组的标志物的水平：PCNA、周期蛋白D1、周期蛋白D3、MEK、S6和pS6，并且若所述三个水平的至少一个在第二时间点处与在第一时间点处相比是降低的，则鉴定所述施用的治疗为有效。9.权利要求8的方法，其中如果全部三个水平在第二时间点处与在第一时间点处相比都是降低的，则鉴定所述施用的治疗为有效。10.权利要求1的方法，其中步骤(c)和(e)包括确定至少四个选自下组的标志物的水平：PCNA、周期蛋白D1、周期蛋白D3、MEK、S6和pS6，并且若所述四个水平的至少一个在第二时间点处与在第一时间点处相比是降低的，则鉴定所述施用的治疗为有效。11.权利要求10的方法，其中如果全部四个水平在第二时间点处与在第一时间点处相比都是降低的，则鉴定所述施用的治疗为有效。12.权利要求1的方法，其中所述施用的治疗是对所述PKD患者施用CDK抑制剂。13.权利要求12的方法，其中所述CDK抑制剂是R-ROSCOVITINE。14.权利要求1的方法，其中(b)和(e)中所述的浓缩分别包括对第一和第二样品进行超速离心。15.权利要求1的方法，其中所述第一和第二样品包含尿液。16.权利要求1的方法，其中(c)和(e)中确定至少一个标志物的水平包括确定所述至少一个标志物的蛋白水平。17.权利要求16的方法，其中(c)和(e)包括使所述样品接触抗体，所述抗体特异性结合至所述至少一个标志物的蛋白。18.权利要求1的方法，其中(c)和(e)包括确定周期蛋白D1和MEK之一或二者的水平。19.权利要求1的方法，其在(f)后进一步包括：(g)施用额外剂的所述被鉴定为对PKD患者有效的施用的治疗。20.权利要求19的方法，其中所述被鉴定为有效的施用的治疗是CDK抑制剂，且在步骤(g)中对PKD患者施用额外剂的所述CDK抑制剂。21.权利要求20的方法，其中在步骤(g)中对所述PKD患者施用额外剂的S-CR8。22.一种在鉴定为患有多囊性肾病(PKD)的患者中确定治疗的功效的方法，该方法包括：(a)提供包含生物流体的第一样品，所述生物流体在第一时间点处获取自PDK患者；(b)确定所述第一样品中选自下组的至少一个标志物的水平：增殖细胞核抗原(PCNA)、周期蛋白D1、周期蛋白D3、MAPK-ERK激酶1(MEK)、核糖体蛋白S6(S6)、磷酸化核糖体蛋白S6(pS6)、胞外信号调控的激酶(ERK)、磷酸化胞外信号调控的激酶(pERK)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(pAkt)、胱天蛋白酶-2、总S6、和视网膜母细胞瘤结合蛋白(RBBP)；(c)对所述PKD患者施用针对PKD的治疗；(d)提供包含生物流体的第二样品，所述生物流体在步骤(c)之后的第二时间点处获取自所述患者，并在所述第二样品上进行步骤(b)；及(e)如果在所述第二时间点处的水平与第一时间点相比是下降的，则将所施用的治疗鉴定为有效。23.权利要求22的方法，其中所述施用的治疗是施用葡萄糖基神经酰胺合酶(GCS)抑制剂。24.权利要求23的方法，其中所述GCS抑制剂选自下组：(S)-奎宁环-3-基(2-(4'-(2-甲氧基乙氧基)-[1,1'-联苯基]-4-基)丙-2-基)氨基甲酸酯；4-氟-1-(5-氟-4-(4-((2-甲氧基乙氧基)甲基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(4-甲基-1-氮杂双环[3.2.2]壬-4-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-((2-甲氧基乙氧基)甲基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(3-甲基奎宁环-3-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-((2-甲氧基乙氧基)甲基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(4-甲基-1-氮杂双环[3.2.2]壬-4-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-(甲氧基甲基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(3-甲基奎宁环-3-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-(甲氧基甲基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(4-甲基-1-氮杂双环[3.2.2]壬-4-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(3-甲基奎宁环-3-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(4-甲基-1-氮杂双环[3.2.2]壬-4-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-(2-氟乙氧基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(奎宁环-3-基)哌啶-4-羧酰胺；和4-氟-1-(4-(4-(2-氟乙氧基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(4-甲基-1-氮杂双环[3.2.2]壬-4-基)哌啶-4-羧酰胺。25.权利要求23的方法，其在(e)后进一步包括：(f)施用额外剂的所述被鉴定为对PKD患者有效的GCS抑制剂。26.权利要求25的方法，其中在步骤(f)中对PKD患者施用额外剂的如下：(S)-奎宁环-3-基(2-(4'-(2-甲氧基乙氧基)-[1,1'-联苯基]-4-基)丙-2-基)氨基甲酸酯；4-氟-1-(5-氟-4-(4-((2-甲氧基乙氧基)甲基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(4-甲基-1-氮杂双环[3.2.2]壬-4-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-((2-甲氧基乙氧基)甲基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(3-甲基奎宁环-3-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-((2-甲氧基乙氧基)甲基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(4-甲基-1-氮杂双环[3.2.2]壬-4-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-(甲氧基甲基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(3-甲基奎宁环-3-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-(甲氧基甲基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(4-甲基-1-氮杂双环[3.2.2]壬-4-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(3-甲基奎宁环-3-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(4-甲基-1-氮杂双环[3.2.2]壬-4-基)哌啶-4-羧酰胺；4-氟-1-(4-(4-(2-氟乙氧基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(奎宁环-3-基)哌啶-4-羧酰胺；或4-氟-1-(4-(4-(2-氟乙氧基)苯基)嘧啶-2-基)-N-(4-甲基-1-氮杂双环[3.2.2]壬-4-基)哌啶-4-羧酰胺。27.权利要求22的方法，其中步骤(b)和(d)包括确定至少两个选自下组的标志物的水平：PCNA、周期蛋白D1、周期蛋白D3、MEK、S6和pS6，并且若所述两个水平的至少一个在第二时间点处与在第一时间点处相比是降低的，则鉴定所述施用的治疗为有效。28.权利要求27的方法，其中如果两个水平在第二时间点处与在第一时间点处相比都是降低的，则鉴定所述施用的治疗为有效。29.权利要求22的方法，其中步骤(b)和(d)包括确定至少三个选自下组的标志物的水平：PCNA、周期蛋白D1、周期蛋白D3、MEK、S6和pS6，并且若所述三个水平的至少一个在第二时间点处与在第一时间点处相比是降低的，则鉴定所述施用的治疗为有效。30.权利要求29的方法，其中如果全部三个水平在第二时间点处与在第一时间点处相比都是降低的，则鉴定所述施用的治疗为有效。31.权利要求22的方法，其中步骤(b)和(d)包括确定至少四个选自下组的标志物的水平：PCNA、周期蛋白D1、周期蛋白D3、MEK、S6和pS6，并且若所述四个水平的至少一个在第二时间点处与在第一时间点处相比是降低的，则鉴定所述施用的治疗为有效。32.权利要求31的方法，其中如果全部四个水平在第二时间点处与在第一时间点处相比都是降低的，则鉴定所述施用的治疗为有效。33.权利要求22的方法，其中所述施用的治疗是施用CDK抑制剂。34.权利要求33的方法，其中所述CDK抑制剂是R-ROSCOVITINE。35.权利要求22的方法，其中(b)和(d)中确定至少一个标志物的水平包括确定所述至少一个标志物的蛋白水平。36.权利要求35的方法，其中(b)和(d)包括使所述样品接触抗体，所述抗体特异性结合至所述至少一个标志物的蛋白。37.权利要求22的方法，其中(b)和(d)包括确定PCNA、周期蛋白D3、pERK、和Akt中至少两项的水平。38.权利要求22的方法，其在(e)后进一步包括：(f)施用额外剂的所述被鉴定为对PKD患者有效的施用的治疗。39.权利要求38的方法，其中所述被鉴定为有效的施用的治疗是CDK抑制剂，且在步骤(f)中对PKD患者施用额外剂的所述CDK抑制剂。40.权利要求39的方法，其中在步骤(f)中对所述PKD患者施用额外剂的ROSCOVITINE。41.一种诊断患者中的多囊性肾病(PKD)的方法，包括：(a)提供包含生物流体的样品，所述生物流体来自疑患PDK的患者；(b)针对外来体而浓缩所述样品；(c)确定所述样品中选自下组的至少一个标志物的水平：增殖细胞核抗原(PCNA)、周期蛋白D1、周期蛋白D3、MAPK-ERK激酶1(MEK)、核糖体蛋白S6(S6)、磷酸化核糖体蛋白S6(pS6)、胞外信号调控的激酶(ERK)、磷酸化胞外信号调控的激酶(pERK)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(pAkt)、胱天蛋白酶-2、总S6、和视网膜母细胞瘤结合蛋白(RBBP)；和(d)如果所述水平与对照水平相比是升高的，则将该患者鉴定为患有PKD。42.权利要求41的方法，其中步骤(c)包括确定至少两个选自下组的标志...

【专利技术属性】
技术研发人员：O·别斯克罗夫内亚，N·布卡诺夫，S·莫雷诺，
申请(专利权)人：建新公司，
类型：发明
国别省市：美国,US