水溶性C-27甾体配糖体的制备方法技术

提供一种植物水溶性Ｃ－２７甾体配糖体冻干粉的制备方法。植物原料经粉碎后，用甲醇或乙醇提取，经过滤、减压浓缩、回收溶剂至无醇得浓缩液，浓缩液用活性炭脱色，经盐析，分离，澄清，过滤，冷冻干燥即可。该方法简单易行，适于批量制备和工业化生产，所得到的植物Ｃ－２７甾体配糖体具有水溶性的特点，适于制备多种制剂，并有防治心血管疾病、抗菌、抗炎、抗氧化损伤、抗衰老、抗癌、以及降低血糖等作用，可用于制药、保健食品、食品、以及功能化妆品等行业。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及化学领域化合物的分离提取方法，具体地，涉及具有生理活性的植物水溶性C-27甾体配糖体的制备方法。
技术介绍
C-27甾体配糖体为一类重要的天然产物，存在于多种植物中，特别是药用植物中。已报道的研究结果表明，C-27甾体配糖体具有多方面的生理活性，富含这类配糖体的植物通常对于风湿关节炎，动脉粥样硬化，高血脂，冠心病，心绞痛、癌症、糖尿病等有一定的治疗和预防作用。同时还具有止血活血、抗菌、抗氧化、抗衰老等作用。按甾体母核的结构，C-27甾体配糖体可分为螺甾烷型和呋甾烷型两大类。螺甾烷型甾体皂甙水溶性差，溶血性强，生物利用度低。而呋甾烷型甾体配糖体的水溶性好，溶血性低(表1)。呋甾烷型甾体配糖体的甾体母核为多羟基-呋甾-5-烯(polyhydroxyl furost-5-en)。在甾体母核的C-26位上具有-O-β-D-葡萄吡喃糖基取代，是螺甾型甾体皂甙生物合成的前体，在葡萄糖转化酶的作用下，可转化为螺甾烷型。研究结果表明，呋甾烷型甾体配糖体具有显著的生理活性。例如，抗霉菌作用，抗真菌作用，降低血糖作用，抗肿瘤作用，抗血小板聚积作用，抗氧化作用，抗心率失常，以及抗心肌缺血，保护心脏损伤等作用。原薯蓣皂甙(protodioscin)为一种植物中较普遍存在的呋甾烷型甾体配糖体，原薯蓣皂甙及其类似物或衍生物具有多方面的生理活性，并对白血病细胞株和多数实体瘤细胞株(例如结肠癌和前列腺癌细胞株等)显示显著的细胞毒活性。因此，植物水溶性呋甾烷型C-27甾体配糖体具有显著的应用前景。 螺甾烷型 呋甾烷型表1，C-27甾体配糖体的水溶性和溶血性 目前，现有技术将含有水溶性C-27甾体配糖体的植物粗提物或总皂甙作为原料生产相关产品，而粗提物或总皂甙含有大量的螺甾烷型甾体皂甙，溶血性强，不仅影响产品的作用与功能，而且产品质量不稳定，难以控制。因此，制备仅含有呋甾烷型的水溶性C-27甾体配糖体及其制剂，不仅成分稳定，溶解性好，同时具有溶血性极低的特点，保证其安全性，对于甾体植物资源的合理利用与深度开发具有积极的意义。
技术实现思路
针对上述现有技术中的不足，本专利技术的目的在于以富含C-27甾体皂甙的植物为原料，提供一种植物水溶性呋甾烷型C-27甾体配糖体的制备方法。该方法简单易行，适于批量制备和工业化生产。按本专利技术提供的方法制备的C-27甾体配糖体质量稳定，具有良好的溶解性，增加了生物利用度，可广泛用于保健食品，食品，化妆品，以及医药行业。为了实现本专利技术的上述目的，本专利技术提供了如下的技术方案水溶性C-27甾体配糖体的制备方法，植物原料经粉碎后，用甲醇或乙醇提取，经过滤、减压浓缩、回收溶剂至无醇得浓缩液，浓缩液用活性炭脱色，经盐析，分离，澄清，过滤，冷冻干燥，得水溶性C-27甾体配糖体冻干粉。植物原料包括但不限于穿山龙(Dioscorea nipponica Makino)、盾叶薯蓣(D.zingerbrensis C.H.Wright)、黄山药(D.panthaica Prainet Burk.)、福州薯蓣(D.futschauensis Uline ex R.Kunth)、绵萆(D.septemloba Thunb.)、菊叶薯蓣(D.composita Hemsl.)、粉背薯蓣(D.hypoglauca Palibin)、纤细薯蓣(D.gracillima Miq)、延龄草(Trillium tschonoskii Maxim)、植物云南重楼(Paris polyphyllaSmith var.yunnanensis(Franch.)Hand Mazz)、百合〔Lilium brownii var.colchesteri(Van Houtte)Wilson ex Elwes〕、天门冬〔Asparaguscochinchinensis(Lour.)Merr.〕、云南开口箭(Tupistra yunnanensis Wanget Liang)、菝葜(Smilax china Linn.)、康定玉竹(Polygonatum prattiiBaker)、高大鹿药〔Smilacina atropurpurea(Franch.)Wang et Tang〕、闭鞘姜〔Costus speciosus(Koenig)Smith〕、胡芦巴(Trigonellafoenum-graecum L.)或蒺藜(Tribulus terrester L.)。上述方法中的提取步骤选用加热回流或超声波方法；脱色剂选用用量为提取液体积的2-5％的活性炭；盐析溶剂选用饱和的氯化钠、氯化铵或硫酸镁无机盐水溶液；分离选用聚苯乙烯型大孔吸附树脂MCI Gel，Diaion，XAD，D-101或KB-8进行柱层析，提取物与大孔吸附树脂的重量比为1∶8-15，柱径高比为1∶10-15；澄清处理选用ZTC澄清剂。上述方法中所得冻干粉可进一步用水溶解，过滤，冷冻干燥，灌封，灭菌，得精制冻干粉。本专利技术提供了更具体的方法取植物原料穿山龙(Dioscoreanipponica Makino)、盾叶薯蓣(D.zingerbrensis C.H.Wright)、黄山药(D.panthaica Prain et Burk.)、福州薯蓣(D.futschauensis Uline exR.Kunth)、绵萆(D.septemloba Thunb.)、菊叶薯蓣(D.compositaHemsl.)、粉背薯蓣(D.hypoglauca Palibin)、纤细薯蓣(D.gracillima Miq)、延龄草(Trillium tschonoskii Maxim)、植物云南重楼(Paris polyphylla Smith var.yunnanensis(Franch.)Hand Mazz)、百合〔Lilium brownii var.colchesteri(Van Houtte)Wilson ex Elwes〕、天门冬〔Asparagus cochinchinensis(Lour.)Merr.〕、云南开口箭(Tupistrayunnanensis Wang et Liang)、菝葜(Smilax china Linn.)、康定玉竹(Polygonatum prattii Baker)、高大鹿药〔Smilacina atropurpurea(Franch.)Wang et Tang〕、闭鞘姜〔Costus speciosus(Koenig)Smith〕、胡芦巴(Trigonella foenum-graecum L.)或蒺藜(Tribulus terrester L.)，经粉碎后，用70％-80％甲醇或乙醇加热回流提取3次，每次2-3小时，提取液减压浓缩至无醇得浓缩液，浓缩液中加入2％-5％活性炭，充分搅拌，静止过夜，离心，上清液部分加入水饱和的氯化钠、氯化铵或硫酸镁无机盐水溶液，该部分与上清液部分体积比为1∶5-7，静止过夜，离心，清液通过聚苯乙烯型大孔吸附树脂MCIGel，Diaion，XAD，D-101或KB-8进行柱层析，清液与大孔吸附树脂的重量比为1∶8-15，柱径高比为1∶10-15，分别以水和80％乙醇洗脱，浓缩80％乙醇洗脱液至无醇，搅拌加本文档来自技高网...

【技术保护点】
水溶性Ｃ－２７甾体配糖体的制备方法，其特征是植物原料经粉碎后，用甲醇或乙醇提取，经过滤、减压浓缩、回收溶剂至无醇得浓缩液，浓缩液用活性炭脱色，经盐析，分离，澄清，过滤，冷冻干燥，得水溶性Ｃ－２７甾体配糖体冻干粉。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王东，张颖君，杨崇仁，李海舟，张影，
申请(专利权)人：中国科学院昆明植物研究所，
类型：发明
国别省市：53[中国|云南]