一种大黄酸酰胺类衍生物纳米混悬剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种大黄酸酰胺类衍生物纳米混悬剂及其制备方法和应用。由于大黄酸水溶性低，生物利用度差，极大地限制了大黄酸的开发和临床应用。本发明专利技术对大黄酸酰胺类衍生物提出了一种更加简单、快速、高产率的大黄酸酰胺类衍生物纳米混悬剂的制备方法：将大黄酸酰胺类衍生物溶于有机溶剂中，作为油相；将稳定剂溶于水中，作为水相；将水相置于冰水浴中，搅拌下，逐滴加入油相，分散完全后继续搅拌30‑40min，旋蒸除去有机溶剂，在20000rpm条件下，用高速剪切机连续剪切，静置，消泡后，得到粗混悬剂；将粗混悬剂经超声法和/或高压均质法处理，得大黄酸酰胺类衍生物纳米混悬剂。

Rhein amide derivative nano suspension agent, preparation method and application thereof

The present invention discloses one kind of Rhein amide derivative nano suspension agent and its preparation method and application. Due to the low solubility and low bioavailability of rhein, Rhein has greatly restricted the development and clinical application of rhein. The invention provides a method for preparing rheinic acid amide derivatives - a more simple and rapid, high rate of suspension of rheinic acid amide derivatives: rheinic acid amide derivatives dissolved in an organic solvent, as the oil phase; the stabilizer is dissolved in water, as water mixing in aqueous phase; the ice water bath, and dropwise adding the oil phase, dispersed completely after continue stirring for 30 40min, rotary evaporation to remove the organic solvent, under the condition of 20000rpm, with continuous shear, shearing machine static, defoaming, crude suspension; crude suspension by ultrasonic method and / or high pressure homogenization treatment to chrysophanic acid amide derivatives nanosuspension.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于药物制剂领域，具体地涉及一种大黄酸酰胺类衍生物纳米混悬剂及其制备方法和应用。
技术介绍
大黄来源于蓼科多年生草本植物掌叶大黄(RheumpalmatumL.)、唐古特大黄(R.tanguticumMaxim.exBalf.)或药用大黄(RheumofficinaleBaill.)的干燥根及根茎。始载于《神农本草经》，其性味苦寒，归脾、胃、大肠、肝、心经，具有逐癖痛经，泄热通肠，凉血解毒的功效。临床常用于胆囊炎、肝炎、糖尿病、肾病、慢性肾功能衰竭以及便秘等疾病的治疗。大黄的主要药理成分是蒽醌衍生物(含量约占3％～5％)和少量二蒽酮类衍生物。其中，游离型蒽醌为大黄的主要抗菌成分，结合型蒽醌则为大黄的主要泻下成分。现代研究表明，游离型蒽醌类化合物具有抗肿瘤活性。大黄酸(Rhein，RH)作为中药大黄、中药芦荟等的主要有效成分，属单蒽核类1,8-二羟基蒽醌衍生物，大量的药理学研究结果表明，大黄酸在降糖调脂、抗肿瘤、抗病毒、抗纤维化、抗菌、保肝等多方面具有广泛的药理活性，特别是在治疗骨关节炎、糖尿病、肾病及协同抗肿瘤方面有突出的治疗作用，是近年来研究热点之一。但是由于其水溶性低，生物利用度差，极大地限制了大黄酸的开发和临床应用。现有技术中均只是对大黄酸进行了结构改造，而没有相关制剂的深入研究。纳米混悬剂是20世纪末发展起来的一种新型纳米给药系统，由于不使用添加剂，纳米混悬剂可以避免由添加剂在体内消除和聚集引起的毒性问题。与传统小分子抗肿瘤药物相比，纳米混悬剂具有如下突出优点：1)可使药物具有控释效果，能够延长药物在体内的半衰期；2)可使药物具有靶向输送的效果，纳米混悬剂通过其高通透性和滞留效应(EPR)，能够将药物靶向输送至肿瘤部位，从而降低其对正常组织的毒副作用，提高药物的生物利用度；3)可通过化学键键和、表面吸附或者物理增溶等方式提高疏水性抗癌药物的溶解性，有效改善其给药方式；4)可以通过胞吞方式进入肿瘤细胞，并解决有效克服上皮和内皮运输障碍的问题；5)可同时输送多种药物，实现联合给药，增强药物抗肿瘤等作用；6)可通过包载或与显像剂连接，使药物输送可视化，便于实时跟踪研究药物在体内的输送和释放过程。因此，为了进一步提高原化合物的生物利用度，同时具有缓释作用，开发大黄酸酰胺类衍生物的新剂型，具有重要的作用。
技术实现思路
本专利技术的目的之一是，提供一种更加简单、快速、高产率的大黄酸酰胺类衍生物混悬剂的制备方法。本专利技术的目的之二是，提供大黄酸酰胺类衍生物纳米混悬剂在临床上的应用。本专利技术采用的技术方案是：一种大黄酸酰胺类衍生物纳米混悬剂，制备方法包括如下步骤：1)将大黄酸酰胺类衍生物溶于有机溶剂中，作为油相；将稳定剂溶于水中，作为水相；2)将水相置于冰水浴中，搅拌下，逐滴加入油相，分散完全后继续搅拌30-40min，旋蒸除去有机溶剂，在20000rpm条件下，用高速剪切机连续剪切，静置，消泡后，得到粗混悬剂；3)将粗混悬剂经超声法和/或高压均质法处理，得大黄酸酰胺类衍生物纳米混悬剂。上述的一种大黄酸酰胺类衍生物纳米混悬剂，所述的大黄酸酰胺类衍生物具有通式(Ⅰ)的结构，其中，R为L-丙氨酸、L-缬氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸、L-脯氨酸、L-苯丙氨酸、L-色氨酸、L-蛋氨酸、L-甘氨酸、L-丝氨酸、L-苏氨酸、L-半胱氨酸、L-酪氨酸、L-天冬酰胺、L-谷氨酰胺、L-赖氨酸、L-组氨酸、L-天冬氨酸、L-谷氨酸。优选的，R为L-异亮氨酸或L-苯丙氨酸。上述的一种大黄酸酰胺类衍生物纳米混悬剂，按重量比，大黄酸酰胺类衍生物：稳定剂＝1：0.3-1。优选的，大黄酸酰胺类衍生物：稳定剂＝1：1。上述的一种大黄酸酰胺类衍生物纳米混悬剂，所述的有机溶剂选自甲醇、无水乙醇、乙酸乙酯、氯仿、丙酮、DMSO或DMF中的一种或二种以上的混合。优选的，有机溶剂是甲醇，其用量控制在，2～8mL/50毫克大黄酸酰胺类衍生物，更优选的，甲醇用量为4mL。上述的一种大黄酸酰胺类衍生物纳米混悬剂，所述的稳定剂选自泊洛沙姆188(F68)、卵磷脂(LC)、聚维酮(PVP)或羟丙基纤维素(HPC)中的一种或二种以上的混合。优选的，稳定剂是，按重量比，泊洛沙姆188：卵磷脂＝1：1的混合。上述的一种大黄酸酰胺类衍生物纳米混悬剂，将油相匀速逐滴加入水相中，匀速是指0.5～2.0mL/min，优选1.0mL/min。上述的冻干保护剂选自甘露醇、乳糖、蔗糖、海藻糖、麦芽糖中的一种或几种的组合，优选甘露醇。其用量控制在1～10％，优选5％。上述的一种大黄酸酰胺类衍生物纳米混悬剂，所述的超声法是：将粗混悬剂转移至超声波细胞粉碎机中，于超声功率135～360W下，探头超声时间控制在2～8min。优选的，超声功率为315W，探头超声时间控制在4min上述的一种大黄酸酰胺类衍生物纳米混悬剂，所述的高压均质法是：将粗混悬剂转移至高压微射流机中，4660psi均质3次后，于6990～16310psi压力下均质5～25次。优选的，4660psi均质3次后，于11650psi压力下均质20次。本专利技术在对粗混悬剂进行处理时，可以单一的选择超声法或高压均质法，也可以两者同时使用。为了方便长期储存及动物试验，上述的一种大黄酸酰胺类衍生物纳米混悬剂，包括冻干步骤，所述的冻干步骤是：于大黄酸酰胺类衍生物纳米混悬剂中，加入冻干保护剂，完全溶解后，在-80℃条件下预冻48h后取出，放入冷冻干燥机中冻干，得纳米混悬剂冻干粉。此冻干粉可进一步加工制备成胶囊剂、片剂、注射剂等。上述的一种大黄酸酰胺类衍生物纳米混悬剂，所述的冻干保护剂选自甘露醇、乳糖、蔗糖、海藻糖、麦芽糖中的一种或二种以上的组合。本专利技术提供的大黄酸酰胺类衍生物纳米混悬剂在制备治疗抗肿瘤药物中的应用。本专利技术提供的大黄酸酰胺类衍生物的合成方法如下：1)大黄酰氨基酸甲酯的合成：称取大黄酸(RH)于茄形瓶中，加入过量羧基保护的氨基酸甲酯盐酸盐(或二乙酯盐酸盐)，RH与羧基保护的氨基酸甲酯盐酸盐(或二乙酯盐酸盐)摩尔比控制在1:1～1:5之间，置于磁力搅拌上，继续加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDC·HCl)，1-羟基苯并三氮唑(HOBt)，沿壁加入三乙胺，加入二氯甲烷。室温搅拌反应，TLC(氯仿做展开剂)监测反应进程。6h反应完毕，将上述反应液倒入分液漏斗中，缓慢加入18％盐酸溶液萃取三次，收集二氯甲烷层液体，二氯甲烷相用饱和NaHCO3水溶液反复萃取至上层无色，二氯甲烷相无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压蒸发浓缩，即得大黄酰氨基酸甲酯。2)大黄酸酰胺类衍生物的合成：向上述大黄酰氨基酸甲酯中加入适量1MNaOH溶液，超声溶解后，45℃搅拌反应，TLC(氯仿做展开剂)监测反应，1h水解完全，过滤，收集滤液。将反应液置于0℃冰水浴中，搅拌下逐滴加入10％盐酸溶液，调节pH1～2，静置过夜，析出固体，抽滤，收集滤饼，干燥，即得大黄酸酰胺类衍生物。本专利技术采用高效液相(HPLC)法测定了各化合物在不同有机溶剂和不同pH缓冲液中的溶解度(见表1、表2)，以及不同pH缓冲液中的油水分配系数(见表3)，结果表明有部分化合物的水溶性及脂溶性较RH均有明显提高，油水分配系数也有所提高；采用MTT法(见表4)初本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种大黄酸酰胺类衍生物纳米混悬剂，其特征在于，制备方法包括如下步骤：1)将大黄酸酰胺类衍生物溶于有机溶剂中，作为油相；将稳定剂溶于水中，作为水相；2)将水相置于冰水浴中，搅拌下，逐滴加入油相，分散完全后继续搅拌30‑40min，旋蒸除去有机溶剂，在20000rpm条件下，用高速剪切机连续剪切，静置，消泡后，得到粗混悬剂；3)将粗混悬剂经超声法和/或高压均质法处理，得大黄酸酰胺类衍生物纳米混悬剂。

【技术特征摘要】
1.一种大黄酸酰胺类衍生物纳米混悬剂，其特征在于，制备方法包括如下步骤：1)将大黄酸酰胺类衍生物溶于有机溶剂中，作为油相；将稳定剂溶于水中，作为水相；2)将水相置于冰水浴中，搅拌下，逐滴加入油相，分散完全后继续搅拌30-40min，旋蒸除去有机溶剂，在20000rpm条件下，用高速剪切机连续剪切，静置，消泡后，得到粗混悬剂；3)将粗混悬剂经超声法和/或高压均质法处理，得大黄酸酰胺类衍生物纳米混悬剂。2.根据权利要求1所述的一种大黄酸酰胺类衍生物纳米混悬剂，其特征在于，所述的大黄酸酰胺类衍生物具有通式(Ⅰ)的结构，其中，R为L-丙氨酸、L-缬氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸、L-脯氨酸、L-苯丙氨酸、L-色氨酸、L-蛋氨酸、L-甘氨酸、L-丝氨酸、L-苏氨酸、L-半胱氨酸、L-酪氨酸、L-天冬酰胺、L-谷氨酰胺、L-赖氨酸、L-组氨酸、L-天冬氨酸、L-谷氨酸。3.根据权利要求1或2所述的一种大黄酸酰胺类衍生物纳米混悬剂，其特征在于，按重量比，大黄酸酰胺类衍生物：稳定剂＝1：0.3-1。4.根据权利要求1或2所述的一种大黄酸酰胺类衍生物纳米混悬剂，其特征在于，所述的有机溶剂选自甲醇、无水乙醇、乙酸乙酯、氯仿、丙酮、DMSO、DMF中的一...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈立江，荣景宏，刘宇，王欣，梁啸，崔庆国，赵京华，
申请(专利权)人：辽宁大学，
类型：发明
国别省市：辽宁;21