水溶性的促凝血药维生素K2固态复合物及其制备方法技术

水溶性的促凝血药维生素K2固态复合物及其制备方法，属药物技术领域。产品为单‑[6‑(二乙烯三胺基)‑6‑脱氧]‑β‑环糊精与维生素K2的固态复合物，复合比2:1。将单‑(6‑氧‑6‑对甲苯磺酰基)‑β‑环糊精加入二乙烯三胺中，氮气保护下溶解升温进行反应，蒸馏掉大部二乙烯三胺后加入丙酮得粗产物，溶于水，用凝胶柱分离，得单‑[6‑(二乙烯三胺基)‑6‑脱氧]‑β‑环糊精。将维生素K2丙酮溶液加入单‑[6‑(二乙烯三胺基)‑6‑脱氧]‑β‑环糊精水溶液中，密封于35‑40℃下搅拌4.5～5.5天，除去丙酮和未参与包结的维生素K2。所得产品毒性低，维生素K2经包结后在水中的溶解度增大110倍，可作为维生素K2的替代品应用于临床。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属药物
，具体涉及水溶性的促凝血药维生素K2固态复合物及其制备方法。
技术介绍
维生素K2(英文名menaquinone)的结构如下：指的是一族2-甲基-1,4-萘醌的同系物，其第3位为含有4～13个异戊二烯单位的异戊烯侧链所取代，这些称为甲萘醌；后缀(-4)表示侧链上异二烯单位的数目。1934年，丹麦科学家首先发现维生素K，并证实其为脂溶性维生素。天然存在的有维生素K1、K2，维生素K1广泛存在于绿色植物中，是食物中维生素K的重要来源；维生素K2主要由肠道细菌合成。在动物体内具有生物活性的是维生素K2，而维生素K1和维生素K3都要转化为维生素K2才能起作用。三种维生素K的形式都在肝中转化成维生素K2，并和胃肠微生物合成的维生素K2一起被吸收利用。维生素K缺乏可引起这些凝血因子合成障碍或异常，临床可见出血倾向和凝血酶原时间延长。维生素K与血液凝固密切相关，缺乏时，可引起肝脏对多种凝血因子的合成障碍，引起机体凝血时间延长和出血倾向，及时补充维生素K可使凝血功能恢复。维生素K2具有多种功能，如：(1)治疗和预防骨质疏松症。维生素K2生成骨蛋白质，再与钙共同生成骨质，增加骨密度，防止骨折。(2)预防肝硬化进展为肝癌。(3)治疗维生素K2缺乏性出血症，如新生儿出血。维生素K2促进凝血酶原的形成，加速凝血，维持正常的凝血时间。(4)具有利尿、强化肝脏的解毒功能，并能降低血压。此外，维生素K2还能选择性地诱导白血病细胞凋亡，对志愿者正常骨髓细胞只有微弱的抑制作用。(J.J.Dink,S.M.Planchon,C.Tagliarino.J.Biol.Chem.2000,275,5416.；M.Ynguchi,K.Miyazawa,M.Otawa.Leukemia.1998,12,1392.)由此可见，维生素K2具有较大的医用价值，因此自上市以来对其的研究方兴未艾，但其应用存在着明显的制肘：维生素K2为油状物，几乎不溶于水(溶解度为0.054mg/mL)；维生素K2注射液收载于《中国药典2000年版二部》中，所用增溶剂为吐温一80，由于吐温一80是聚氧乙烯失水山梨醇单油酸醋，该物质具有溶血作用，并且容易发生氧化，氧化产物会造成过敏；所制成的注射液在低温放置易发生浑浊，常温下难以恢复，需要加热，才能重新溶解；由于吐温一80中的聚氧乙烯以醚键方式与失水山梨醇结合，体内降解缓慢，抗凝血作用也缓慢，不利于应急治疗。这些特点限制了维生素K2在临床上的使用。环糊精(Cyclodextrins,Cycloamyloses,通常简称为CD),是一类由D型吡喃葡萄糖单元以1,4苷键首尾相连的截锥状大环分子，具有疏水的空腔和亲水性的表面。因此，环糊精可选择性键合各种有机、无机以及生物分子形成超分子固态复合物。环糊精习惯上用一个希腊字母表示其葡萄糖单元数目，其中最常见的是α-、β-、γ-环糊精，分别拥有6、7和8个葡萄糖单元。含7个葡萄糖单元的β-环糊精可通过淀粉的酶促降解大量制备，价格低廉，而且性质稳定，无毒害。这些特性使其广泛应用于脂溶性药物载体、食品添加剂、化妆品填料等各个领域(刘育，尤长城，张衡益，《超分子化学-合成受体的分子识别与组装》，南开大学出版社，2001年)。使用环糊精作为母体构筑功能分子，可对药物分子的包结作用创造良好的条件(K.Uekama,F.Hirayama,T.Irie,Chem.Rev.1998,98,2045.)。很多研究表明，天然环糊精对药物分子的包结配位作用一般比较微弱，修饰环糊精在大部分情况下可以提高环糊精主体对客体分子的键合稳定常数。如Koizumi教授报道了维生素K2与Glucosy1-β-环糊精在水溶液中通过1:1～1:3复合。加入Glucosy1-β-环糊精后，维生素K2在水溶液中对光和热的稳定性都显著增强(Y.Okada,M.Tachibana,K.Koizumi,Chem.Pharm.Bull.1990,38,2047.)。遗憾的是，目前用修饰β-环糊精包结维生素K2分子的固态复合物研究未见报道，尽管固态复合物具有便于携带、运输和贮存，稳定性好，制剂时不需要加入防腐剂的优点。单-[6-(二乙烯三胺基)-6-脱氧]-β-环糊精是一种低毒性且水溶性极高的药物载体，其合成方法为已有技术(例如可见：I.Tabushi,N.Shimizu,T.Sugimoto,M.Shiozuka,K.Yamamura,J.Am.Chem.Soc.1977,99,7100；I.Tabushi,N.Shimizu,Jpn.KodaiTokkyoKoho78102985,1978[Chem.Abstr.,1979,90,39196b])。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有技术的不足，提供一种水溶性的促凝血药维生素K2固态复合物及其制备方法。本专利技术水溶性的促凝血药维生素K2固态复合物是单-[6-(二乙烯三胺基)-6-脱氧]-β-环糊精与维生素K2的固态复合物，单-[6-(二乙烯三胺基)-6-脱氧]-β-环糊精与维生素K2的复合比为2:1。本专利技术单-[6-(二乙烯三胺基)-6-脱氧]-β-环糊精与维生素K2的固态复合物的制备方法如下：1)将维生素K2溶入丙酮中，再将维生素K2丙酮溶液加入单-[6-(二乙烯三胺基)-6-脱氧]-β-环糊精水溶液中，搅拌，将溶液密封，35-40℃下搅拌4～6天；2)蒸发除去溶剂丙酮，抽滤除去未参与包结的维生素K2，将所得的滤液蒸干，即得棕红色的晶体，真空干燥，可得单-[6-(二乙烯三胺基)-6-脱氧]-β-环糊精和维生素K2(20)固态复合物。优化的制备方法如下：1)室温下将2.9～3.1份重量的单-(6-氧-6-对甲苯磺酰基)-β-环糊精加入到28～32份重量的的蒸馏提纯后的二乙烯三胺中，氮气保护下搅拌至溶解后升温到74～76℃反应7.8～8.2小时，然后减压蒸馏掉不少于50％的二乙烯三胺，把剩余的液体加入到4.8～5.2倍体积的丙酮中，抽滤收集沉淀，重复次操作3～4次，再把丙酮换成无水乙醇进行此操作一次，得粗产物。2)将上面所得的粗产物溶于水，使用SephadexG-25凝胶柱分离，以二次蒸馏水为洗脱剂，得到单-[6-(二乙烯三胺基)-6-脱氧]-β-环糊精。3)将1份重量的维生素K2放入153～166份重量的丙酮中使其溶解，再将该维生素K2丙酮溶液加入单-[6-(二乙烯三胺基)-6-脱氧]-β-环糊精370～380份重量的水溶液中，搅拌，将溶液密封，35-40℃下搅拌4.5～5.5天，维生素K2与单-[6-(二乙烯三胺基)-6-脱氧]-β-环糊精的重量比为1:5.4～5.6，最佳为1:5.5。4)蒸发除去溶剂丙酮，抽滤除去未参与包结的维生素K2，将所得的滤液蒸干，即得棕红色的晶体，真空干燥，可得单-[6-(二乙烯三胺基)-6-脱氧]-β-环糊精和维生素K2固态复合物。本专利技术方法所得固体产物经过氢谱(1HNMR)、扫描电子显微镜(SEM)、X射线粉末衍射(XRD)、热重-差热分析(TG-TDA)、红外光谱(IR)等手段证明。本专利技术的有益效果：单-[6-(二乙烯三胺基)-6-脱氧]-β-环糊精作为一种低毒性且易溶于水的药物载体，在对促凝血药物维生素K2包结后，大本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种水溶性的促凝血药维生素K2固态复合物，其特征在于为单‑[6‑(二乙烯三胺基)‑6‑脱氧]‑β‑环糊精与维生素K2的固态复合物，单‑[6‑(二乙烯三胺基)‑6‑脱氧]‑β‑环糊精与维生素K2的复合比为2:1。

【技术特征摘要】
1.一种水溶性的促凝血药维生素K2固态复合物，其特征在于为单-[6-(二乙烯三胺基)-6-脱氧]-β-环糊精与维生素K2的固态复合物，单-[6-(二乙烯三胺基)-6-脱氧]-β-环糊精与维生素K2的复合比为2:1。2.一种单-[6-(二乙烯三胺基)-6-脱氧]-β-环糊精与维生素K2的固态复合物的制备方法，其特征在于按如下步骤：1)将维生素K2溶入丙酮中，再将维生素K2丙酮溶液加入单-[6-(二乙烯三胺基)-6-脱氧]-β-环糊精水溶液中，搅拌，将溶液密封，35-40℃下搅拌4～6天；2)蒸发除去溶剂丙酮，抽滤除去未参与包结的维生素K2，将所得的滤液蒸干，即得棕红色的晶体，真空干燥，可得单-[6-(二乙烯三胺基)-6-脱氧]-β-环糊精和维生素K2(20)固态复合物。3.如权利要求2所述的单-[6-(二乙烯三胺基)-6-脱氧]-β-环糊精与维生素K2的固态复合物的制备方法，其特征在于按如下步骤：1)室温下将2.9～3.1份重量的单-(6-氧-6-对甲苯磺酰基)-β-环糊精加入到28～32份重量的的蒸馏提纯后的二乙烯三胺中，氮气保护下搅拌至溶解后升温到74～76℃反应7.8～8.2小时，然后减压蒸...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵焱，杨自明，朱茜，朱洪友，阮琼，郑萍，尹华滔，
申请(专利权)人：云南师范大学，
类型：发明
国别省市：云南;53