一种用于培养间充质干细胞的无血清培养基和方法技术

本申请属于干细胞培养技术领域，具体涉及一种用于培养间充质干细胞的无血清培养基。本发明专利技术所提供的无血清培养基针对MSCs体外培养定制化地对基础培养基L‑DMEM或DMEM/F12及多种添加成分进行了复配，使得培养基中各组分之间起到了协同增效的作用；尤其是DKK‑1的使用，极大改善了体外培养MSCs的稳定性及成功率，而且还采用了无动物源成分的配方，提高了所培养细胞在临床研究中的安全性。与现有产品相比，本发明专利技术培养基极大地提高了体外培养MSCs的增值效率，维持了MSCs的细胞生长形态及其细胞表型稳定，为临床应用中的MSCs培养提供了新型的高效稳定安全的培养体系，具有很高的科研和医学应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于干细胞培养
，具体涉及一种用于培养间充质干细胞的无血清培养基和方法。
技术介绍
间充质干细胞(mesenchymalstemcells，MSCs)是一种具有高度分化潜能的干细胞，因能分化为间质组织而得名。MSCs主要存在于结缔组织和器官间质中，具有高度的分化功能和免疫调控功能，能够分泌多种细胞因子，是继造血干细胞之后细胞治疗临床应用研究最多，也是相对较为成熟的一种成体干细胞。MSCs可以向多种中胚层和神经外胚层来源的组织细胞分化，如成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肌腱细胞、平滑肌细胞、骨髓基质细胞、成纤维细胞及多种血管内皮细胞，甚至神经系统的神经元和神经胶质细胞等。从1995年首次报道MSCs应用于临床试验开始，国内外已将MSCs应用于临床治疗移植物抗宿主病(GVHD)、充血性心衰及心梗、脊髓损伤、2型糖尿病、骨和软骨损伤、烧伤、类风湿性关节炎、帕金森病等。但由于直接从人体获得的MSCs数量有限，要达到临床应用的细胞数量级，必须经过体外的扩增培养。而在体外培养的过程中，适当的培养体系是MSCs培养效率和安全性的关键。选择适当的培养体系才能保证MSCs在经过数次传代本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于培养间充质干细胞的无血清培养基，其特征在于，包括：基础培养基、DKK‑1、凝血酶、纤粘连蛋白、人血白蛋白、转铁蛋白、碱性成纤维细胞生长因子、血小板衍生生长因子、胰岛素样生长因子、白血病抑制因子、表皮生长因子、转化生长因子、硝酸铁、亚硒酸钠、硫酸铜和硫酸锌、维生素E、还原性谷胱甘肽、氢化可的松、孕酮、抗坏血酸磷酸酯、乙醇胺、亚油酸、胆固醇和半乳糖。

【技术特征摘要】
1.一种用于培养间充质干细胞的无血清培养基，其特征在于，包括：基础培养基、DKK-1、凝血酶、纤粘连蛋白、人血白蛋白、转铁蛋白、碱性成纤维细胞生长因子、血小板衍生生长因子、胰岛素样生长因子、白血病抑制因子、表皮生长因子、转化生长因子、硝酸铁、亚硒酸钠、硫酸铜和硫酸锌、维生素E、还原性谷胱甘肽、氢化可的松、孕酮、抗坏血酸磷酸酯、乙醇胺、亚油酸、胆固醇和半乳糖。2.根据权利要求1所述的无血清培养基，其特征在于，所述基础培养基为DMEM/F12或L-DMEM。3.根据权利要求1所述的无血清培养基，其特征在于，每毫升所述基础培养基中包含：DKK-110-1000ng，凝血酶0.1-0.4IU、纤粘连蛋白10-100ng、人血白蛋白1-50μg、转铁蛋白10-200ng、碱性成纤维细胞生长因子1-100ng、血小板衍生生长因子1-100ng、胰岛素样生长因子1-100μg、白血病抑制因子1-50ng、表皮生长因子1-10ng、转化生长因子-β1-10ng、硝酸铁0.1-1μg、亚硒酸钠0.01-0.1μg、硫酸铜0.001-0.1μg、硫酸锌0.1-5μg、维生素E1-...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖佳，朱江，韩荣飞，
申请(专利权)人：深圳江淼医疗有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44