一类含2-氨基嘧啶的萘酰亚胺化合物，其制备方法及应用技术

本发明专利技术公开一类含2-氨基嘧啶的萘酰亚胺化合物，其制备方法及应用，所述衍生物具有通式T的结构，其中R选自含杂原子的六元环、-NHCH2CH2OH、-NHCH2CH2N(CH3)2和-NHCH2CH2CH2CH3中的一种，所述杂原子为N、O和S原子中的至少一种，所述含杂原子的六元环中有至少一个N原子，且R通过N原子与通式T中的母核连接。本发明专利技术的化合物通过在萘酰亚胺衍生物母体上接入2-氨基嘧啶基团制备，该类衍生物对乳腺癌和宫颈癌等多种不同组织来源的肿瘤细胞具有抑制生长的活性，而对人体正常细胞的抑制活性较小，在制备抑制肿瘤细胞生长药物中具有广阔的前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一类抗肿瘤含2-氨基嘧啶的萘酰亚胺类化合物，属于有机合成

技术介绍
研究发现萘酰亚胺衍生物具有良好的抗癌活性，其中Amonafide(N-(β-二甲基氨基乙基)-3-胺基-1,8-萘酰亚胺)(MalviyaVK,LiuPY,AlbertsDS,etal.Am.J.Clin.Oncol.,1992,15:41-44.)和Mitonafide(N-(β-二甲基氨基乙基)-3-硝基-1,8-萘酰亚胺)(BranaM.F,SantosA.,RoldanC.M.,etal.Eur.J.Med.Chem.Chim.Ther.,1981,16,207-212)是非常著名的两个化合物，已经进入二期临床试验。该类化合物能够有效地抑制肿瘤细胞的生长，其作用机理是嵌插入DNA的碱基对之间，在拓扑异构酶Ⅱ的介入下诱导DNA链的断裂，影响DNA正常的生理功能，从而达到抑制癌细胞增殖的作用。但是，在对Mitonafide的临床试验中，发现它有非常严重的中枢神经系统(CNS)毒性，并且其临床活性有限；Amonafide在临床试验中的表现也不尽如人意，引起骨髓抑制、呕吐、皮疹以及中等程度的静脉炎等副作用。氨基嘧啶是具有抗肿瘤活性的潜在药效团，科研人员对其抗肿瘤的药效关系进行了大量研究。Sviripa等设计合成了一系列含氨基嘧啶药效团的抗肿瘤药物分子，一些在体内和体外抗肿瘤实验中展示了较高的细胞毒性，对各种肝癌和结肠癌细胞有好的抑制活性并且口服用药生物利用率高。XitaoLi等也对含氨基嘧啶基团的化合物的构效关系进行了研究，很多结构表现出好的抗肿瘤活性。专利技术内容本专利技术的目的是在萘酰亚胺活性位点接入氨基嘧啶基团，以此来扩展萘酰亚胺类药物的种类，并得到更加有效、毒副作用小的抗肿瘤药物。通过在萘酰亚胺母体上引入2-氨基嘧啶基团，设计合成了一类含2-氨基嘧啶的萘酰亚胺衍生物。其目的是：通过氨基缩合、胺基取代等反应合成一类含2-氨基嘧啶的萘酰亚胺衍生物，一方面希望改善母体的溶解性，另一方面希望通过引入2-氨基嘧啶改变母体的电子分布情况，影响与DNA的作用方式，实验证明其对体外肿瘤细胞生长具有抑制能力。本专利技术解决上述技术问题所采用的技术方案是：一类含2-氨基嘧啶的萘酰亚胺化合物，所述化合物具有通式T的结构：通式T中：R选自含杂原子的六元环、-NHCH2CH2OH、-NHCH2CH2N(CH3)2和-NHCH2CH2CH2CH3中的一种，所述杂原子为N、O和S原子中的至少一种，所述含杂原子的六元环中有至少一个N原子，且R通过N原子与通式T中的母核连接。进一步的，所述含杂原子的六元环选自中的一种。进一步的，本专利技术所述化合物最优选为：N-(2’-(N’-嘧啶胺基)-乙基)-4-哌啶基-1,8-萘酰亚胺、N-(2’-(N’-嘧啶胺基)-乙基)-4-吗啉基-1,8-萘酰亚胺、N-(2’-(N’-嘧啶胺基)-乙基)-4-硫吗啉基-1,8-萘酰亚胺或N-(2’-(N’-嘧啶胺基)-乙基)-4-吡咯烷基-1,8-萘酰亚胺。本专利技术的另一技术目的在于提供所述化合物的制备方法，包括以下步骤：以4-溴-1,8萘酐(化合物1)为起始原料，与相应的胺反应得相应中间体4-胺基-1,8萘酐衍生物(化合物2)，化合物2与乙二胺经氨基缩合反应得N-(2’-胺基乙基)-6-哌啶基-1,8-萘酰亚胺衍生物(化合物3)，化合物3再与2-溴嘧啶经取代反应得到所述化合物。合成路线如下：本专利技术的另一技术目的在于提供所述化合物在制备抑制肿瘤细胞生长药物中的应用，所述的肿瘤细胞包括乳腺癌MCF-7细胞和人宫颈癌Hela细胞。将上述合成的含2-氨基嘧啶的萘酰亚胺类化合物分别用四氮唑盐还原法对乳腺癌MCF-7细胞和人宫颈癌Hela细胞进行体外抑制肿瘤细胞生长活性的测定，并同时进行以上化合物对HL7702人正常肝细胞的体外抑制细胞生长活性的测定。所述四氮唑盐还原法实验步骤如下：1、接种细胞分别将乳腺癌MCF-7细胞、人宫颈癌Hela细胞和HL7702人正常肝细胞收集到培养基中，将细胞稀释每孔接种约5000个细胞，最外围加入200μLPBS，提供充足的水分保证细胞的生长环境，将培养板放至CO2培养箱中温育一到两天。2、添加药物当细胞培育至对数生长期时即可加药物，用培养基将本专利技术所述化合物分别稀释成2μM、20μM、40μM、80μM四个梯度浓度，向细胞中加入药物，每个药物浓度设置4个复孔，减小误差，并设置对照组，放回CO2培养箱中，培育24h。3、存活细胞数的检测在所有孔中均加入20μLMTT，放到CO2培养箱中温育4h；弃去孔中的溶液加入200μLDMSO，溶解形成的结晶。在酶标仪上测定各孔吸光度记录结果，按下列公式计算出被测物的IC50值。本专利技术的有益效果：本专利技术通过在萘酰亚胺母体接入2-氨基嘧啶基团，设计合成了一类含2-氨基嘧啶的萘酰亚胺类化合物，该类化合物对乳腺癌和宫颈癌等多种不同组织来源的肿瘤细胞具有抑制生长的活性，而对人体正常细胞的抑制活性较小，具有较好的选择性，在制备抑制肿瘤细胞生长药物中具有广阔的前景。具体实施方式下述非限制性实施例可以使本领域的普通技术人员更全面地理解本专利技术，但不以任何方式限制本专利技术。实施例1N-(2’-(N’-嘧啶胺基)-乙基)-4-哌啶基-1,8-萘酰亚胺(化合物T1)的合成：(1)4-哌啶基-1.8-萘酐(中间体2)合成在100mL两口瓶中加入5g(18.1mmol)的4-溴-1,8萘酐，加入40mL乙二醇单甲醚搅拌溶解，将2mL(20.2mmol)哌啶加入反应体系，加热至回流，磁力搅拌4h后停止反应，室温下冷却，将冷水加入反应液中，析出黄色沉淀，过滤后干燥，用硅胶柱层析提纯(洗脱液为CH2Cl2)得黄色固体4.77g，产率：93.6％。(2)N-(2’-胺基乙基)-6-哌啶基-1,8-萘酰亚胺(中间体3)的合成在100mL两口瓶中，加入20mL无水乙醇和20mL(0.3mol)乙二胺，磁力搅拌下，将4g(14.2mmol)的4-哌啶基-1,8-萘酐分批缓慢加入混合溶液中，升温至90℃反应1h。TLC跟踪至反应完全，加热停止，冷却后将反应体系倒入冷水中，静置析出黄色沉淀，抽滤，烘干。烘干后的固体盐酸水溶液重结晶，干燥得黄色产物2.45g。产率：57.4％。(3)化合物T1的合成在50mL两口瓶中，加入1.0g(3.1mmol)中间体3，加入20mL乙醇搅拌使溶解，再向反应瓶中加入0.49g(3.1mmol)2-溴嘧啶，磁力搅拌，加热至乙醇回流，反应3h，停止加热，冷却后将500mL左右冷水加入中反应体系，析出黄色沉淀，抽滤，水洗后烘干。硅胶柱层析提纯(洗脱液为CH3OH:CH2Cl2＝1:22)得黄绿色固体0.95g。产率：76.7％。熔点：143.2-143.9℃。+ESIMS(M+H):C23H23N5O2,计算值：401.19，实测值：401.28。1HNMR(500MHz,CDCl3)δ8.57(dd,J＝7.3,1.1Hz,1H),8.49(d,J＝8.1Hz,1H),8.38(dd,J＝8.4,1.1Hz,1H),8.25(s,2H),7.72(dd,J＝5.7,3.3Hz,1H),本文档来自技高网...

【技术保护点】
一类含2‑氨基嘧啶的萘酰亚胺化合物，其特征在于，所述化合物具有通式T的结构：通式T中：R选自含杂原子的六元环、‑NHCH2CH2OH、‑NHCH2CH2N(CH3)2和‑NHCH2CH2CH2CH3中的一种，所述杂原子为N、O和S原子中的至少一种，所述含杂原子的六元环中有至少一个N原子，且R通过N原子与通式T中的母核连接。

【技术特征摘要】
1.一类含2-氨基嘧啶的萘酰亚胺化合物，其特征在于，所述化合物具有通式T的结构：通式T中：R选自含杂原子的六元环、-NHCH2CH2OH、-NHCH2CH2N(CH3)2和-NHCH2CH2CH2CH3中的一种，所述杂原子为N、O和S原子中的至少一种，所述含杂原子的六元环中有至少一个N原子，且R通过N原子与通式T中的母核连接。2.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述含杂原子的六元环选自中的一种。3.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述化合物是：N-(2’-(N’-嘧啶胺基)-乙基)-4-哌啶基-1,8-萘酰亚胺、N-(2’-(N’-嘧啶胺基)-乙基)-4-吗啉基-1,8-萘酰亚胺、N-(2’-(N’-嘧啶胺基)...

【专利技术属性】
技术研发人员：李晓莲，范丽丽，李晓宇，
申请(专利权)人：大连理工大学，
类型：发明
国别省市：辽宁;21