一种伪狂犬病病毒疫苗耐热冻干保护剂及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种伪狂犬病病毒疫苗耐热冻干保护剂，所述保护剂包括以下重量百分数的组分：水解明胶2-6％、乳糖0.2-4％、蔗糖2-5％、植物多糖0.1-0.5%、山梨醇1-3%、L-谷氨酸1-1.5％、L-组氨酸0.1-1％、维生素C 0.2-0.5%、维生素E 0.1-0.3%、无水磷酸二氢钾1-2%、叔丁醇0.5-1%、人血清白蛋白0.1-1％，余量为注射用水。本发明专利技术还提供了该伪狂犬病病毒疫苗耐热冻干保护剂的制备方法。本发明专利技术伪狂犬病病毒疫苗耐热冻干保护剂具有能够显著延长疫苗在2-8℃以及在36℃下的保存期，此外其制备方法简单，便于生产应用。

Anti heat and freeze drying protective agent for pseudorabies virus vaccine and preparation method thereof

The invention relates to a pseudorabies virus vaccine freeze-dried agent, the protective agent comprises the following components: the weight percentage of the hydrolyzed gelatin 2-6%, lactose 0.2-4%, sucrose 2-5%, plant polysaccharides 0.1-0.5%, 1-3%, 1-1.5%, L- sorbitol glutamate L- histidine 0.1-1%, vitamin C, vitamin E 0.2-0.5%, 0.1-0.3% anhydrous potassium dihydrogen phosphate 1-2% and tert butyl alcohol 0.5-1%, human serum albumin 0.1-1%, the balance of water for injection. The invention also provides a preparation method of the heat resistance and freeze drying protective agent of the pseudorabies virus vaccine. The invention has the advantages of being capable of prolonging the storage period of the vaccine at 2-8 DEG C and at 36 DEG C, and has the advantages of simple preparation method and convenient production and application.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及疫苗助剂领域，具体涉及一种伪狂犬病病毒疫苗耐热冻干保护剂及其制备方法。
技术介绍
本专利技术所涉及重组伪狂犬病毒，保藏于中国典型培养物培养中心、保藏号为：CCTCC-V201408，可用于制备猪伪狂犬病防治用疫苗。目前，在我国兽用生物制品中，活的冻干疫苗占相当大的比例，国内常用的保护剂主要为牛奶、蔗糖、明胶等，组方简单，保护功能差。如果在2℃～8℃条件下，保存期只有4～6月，多需要在-15℃以下保存。加上国内传统的兽用生物制品保护剂的研制相对滞后，使成品的长期保存和运输受限。所以，耐热冻干保护剂的研究是非常急需的，在20世纪80年代，发达国家就已开始进行耐热冻干保护剂的研究。我国在耐热冻干保护剂方面的研究起步较晚，加上中国市场巨大，国外生物制品涌入，市场竞争加剧。为了本国生物制品业的生存和发展，新型有效的耐热冻干保护剂的研究和应用显得尤为迫切。中国专利申请201310553466.X公开了一种动物活疫苗耐热冻干保护剂，各成分含量为：乳糖80-200g/L、水解乳白蛋白10-40g/L、聚乙烯吡咯烷酮5-20g/L、甘露醇0-20g/L、谷氨酸钠5-20g/L、精氨酸盐酸盐5-15g/L、水解蚕丝蛋白10-30g/L，制得的疫苗安全无菌、质量稳定，具有耐热、保存时间长的特点，解决了疫苗在运输过程中需要低温冷冻、贮存不便等问题。但该保护剂在36℃温度下保存时间不长。因此，有必要提供一种在较高温度和低温下保存时间长，病毒损失率低，耐老化程度高的耐热冻干保护剂。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种外观良好，病毒损失率低，耐老化程度高，保存期长的重组伪狂犬病病毒疫苗耐热冻干保护剂，相应地，本专利技术还提供该耐热冻干保护剂的制备方法。为解决上述问题，本专利技术所采用的技术方案如下：一种伪狂犬病病毒疫苗耐热冻干保护剂，所述保护剂包括以下重量百分数的组分：水解明胶2-6％、乳糖0.2-4％、蔗糖2-5％、植物多糖0.1-0.5%、山梨醇1-3%、L-谷氨酸1-1.5％、L-组氨酸0.1-1％、维生素C0.2-0.5%、维生素E0.1-0.3%、无水磷酸二氢钾1-2%、叔丁醇0.5-1%和人血清白蛋白0.1-1％，余量为注射用水。优选地，所述保护剂包括以下重量百分数的组分：水解明胶2％、乳糖0.2％、蔗糖2％、植物多糖0.1%、山梨醇1%、L-谷氨酸1％、L-组氨酸0.1％、维生素C0.2%、维生素E0.1%、无水磷酸二氢钾1%、叔丁醇0.5%和人血清白蛋白0.1％，余量为注射用水。优选地，所述保护剂包括以下重量百分数的组分：水解明胶6％、乳糖4％、蔗糖5％、植物多糖0.3%、山梨醇3%、L-谷氨酸1.5％、L-组氨酸1％、维生素C0.5%、维生素E0.3%、无水磷酸二氢钾2%、叔丁醇1%和人血清白蛋白1％，余量为注射用水。优选地，所述保护剂包括以下重量百分数的组分：水解明胶4％、乳糖2％、蔗糖3.5％、植物多糖0.5%、山梨醇2%、L-谷氨酸1.5％、L-组氨酸0.5％、维生素C0.4%、维生素E0.2%、无水磷酸二氢钾1.5%、叔丁醇0.8%和人血清白蛋白0.5％，余量为注射用水。优选地，所述伪狂犬病病毒为重组伪狂犬病病毒，所述重组伪狂犬病病毒保藏于中国典型培养物培养中心，保藏号为：CCTCC-V201408。优选地，所述植物多糖由黄芪多糖和香菇多糖按（1-1.5）：（0.5-1）的重量比组成。优选地，所述保护剂还包括以下重量百分数的组分：天冬氨酸0.5-1%。相应地，本专利技术还提供了一种所述伪狂犬病病毒疫苗耐热冻干保护剂的制备方法，包括如下步骤：a.取水解明胶、乳糖、蔗糖、植物多糖、山梨醇、无水磷酸二氢钾和叔丁醇溶于部分注射用水中，该部分的注射用水占注射用水总量的2/5-4/5，然后在115-125℃的温度下进行灭菌处理15-25min，得到溶液A；b.取L-谷氨酸、L-组氨酸、维生素C、维生素E以及人血清白蛋溶于剩余部分的注射用水中，用孔径为0.15-0.20μm的滤膜过滤除菌，得到溶液B；c.将a步骤得到的溶液A与b步骤得到的溶液B按1:1的体积比混合，即得产品。优选地，在所述b步骤中加入天冬氨酸。优选地，所述a步骤中，在115℃的温度下进行灭菌处理15min，所述b步骤中，滤膜孔径为0.20μm。与现有技术相比，本专利技术具有如下优点：（1）本专利技术耐热冻干保护剂能够使疫苗在2-8℃下保存期由原来的1年提高到2年,保存时间显著延长。（2）本专利技术耐热冻干保护剂保护的冻干产品（疫苗），耐热后病毒含量仅下降约0.1-0.2个滴度，现有的耐热冻干保护剂下降0.8个滴度。下面结合具体实施方式对本专利技术进行详细说明。具体实施方式本专利技术部分组分的厂家和货号等信息如下：组分厂家CAS号水解明胶厦门华烜明胶有限公司68410-45-7乳糖上海鼓臣生物技术有限公司63-42-3蔗糖上海鼓臣生物技术有限公司57-50-1黄芪多糖上海万疆生物技术有限公司89250-26-0香菇多糖陕西斯诺特生物技术有限公司37339-90-5山梨醇上海鼓臣生物技术有限公司5989-81-1L-谷氨酸上海鼓臣生物技术有限公司56-86-0L-组氨酸上海鼓臣生物技术有限公司71-00-1维生素C西安迪诺生物科技有限公司50-81-72-->维生素E上海鼓臣生物技术有限公司59-02-9无水磷酸二氢钾上海鼓臣生物技术有限公司14265-44-2叔丁醇上海鼓臣生物技术有限公司75-65-0人血清白蛋白上海鼓臣生物技术有限公司70024-90-7实施例1一种重组伪狂犬病毒疫苗耐热冻干保护剂所述保护剂包括以下重量百分数的组分：水解明胶2％、乳糖0.2％、蔗糖2％、植物多糖0.1%、山梨醇1%、L-谷氨酸1％、L-组氨酸0.1％、维生素C0.2%、维生素E0.1%、无水磷酸二氢钾1%、叔丁醇0.5%和人血清白蛋白0.1％，余量为注射用水，其中，所述植物多糖由黄芪多糖0.05%和香菇多糖0.05%组成。制备方法：a.取水解明胶、乳糖、黄芪多糖、香菇多糖、蔗糖、山梨醇、无水磷酸二氢钾和叔丁醇溶于部分注射用水中，该部分的注射用水占注射用水总量的2/5，然后在115℃的温度下进行...

【技术保护点】
一种伪狂犬病病毒疫苗耐热冻干保护剂，其特征在于，所述保护剂包括以下重量百分数的组分：水解明胶2‑6％、乳糖0.2‑4％、蔗糖2‑5％、植物多糖0.1‑0.5%、山梨醇1‑3%、L‑谷氨酸1‑1.5％、L‑组氨酸0.1‑1％、维生素C  0.2‑0.5%、维生素E  0.1‑0.3%、无水磷酸二氢钾1‑2%、叔丁醇0.5‑1%和人血清白蛋白0.1‑1％，余量为注射用水。

【技术特征摘要】
1.一种伪狂犬病病毒疫苗耐热冻干保护剂，其特征在于，所述保护剂包括以下重量百
分数的组分：水解明胶2-6％、乳糖0.2-4％、蔗糖2-5％、植物多糖0.1-0.5%、山梨醇1-3%、L-
谷氨酸1-1.5％、L-组氨酸0.1-1％、维生素C0.2-0.5%、维生素E0.1-0.3%、无水磷酸二
氢钾1-2%、叔丁醇0.5-1%和人血清白蛋白0.1-1％，余量为注射用水。
2.根据权利要求1所述的伪狂犬病病毒疫苗耐热冻干保护剂，其特征在于，所述保护剂
包括以下重量百分数的组分：水解明胶2％、乳糖0.2％、蔗糖2％、植物多糖0.1%、山梨醇1%、
L-谷氨酸1％、L-组氨酸0.1％、维生素C0.2%、维生素E0.1%、无水磷酸二氢钾1%、叔丁醇
0.5%和人血清白蛋白0.1％，余量为注射用水。
3.根据权利要求1所述的伪狂犬病病毒疫苗耐热冻干保护剂，其特征在于，所述保护剂
包括以下重量百分数的组分：水解明胶6％、乳糖4％、蔗糖5％、植物多糖0.3%、山梨醇3%、L-
谷氨酸1.5％、L-组氨酸1％、维生素C0.5%、维生素E0.3%、无水磷酸二氢钾2%、叔丁醇1%和
人血清白蛋白1％，余量为注射用水。
4.根据权利要求1所述的伪狂犬病病毒疫苗耐热冻干保护剂，其特征在于，所述保护剂
包括以下重量百分数的组分：水解明胶4％、乳糖2％、蔗糖3.5％、植物多糖0.5%、山梨醇2%、
L-谷氨酸1.5％、L-组氨酸0.5％、维生素C0.4%、维生素E0.2%、无水磷酸二氢钾1.5%、叔
丁醇0.8%和人血清白蛋白0.5％，余量为注射用水。
...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈瑞爱，黄红亮，谢小雨，唐兆新，徐家华，高艳，张文炎，
申请(专利权)人：肇庆大华农生物药品有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44