一种新的柠檬苦素类化合物及其制备方法和医药用途技术

本发明专利技术公开了一种新的柠檬苦素类化合物及其制备方法和医药用途。该化合物为首次报道，是一种结构新颖的柠檬苦素类化合物，可以从佛手的干燥成熟果实中提取、分离纯化得到。体外试验证明该化合物能够有效抑制HepG2细胞的生长增殖，降低细胞的存活率，且降低程度与该化合物浓度呈现一定的剂量效应趋势，同时在同一浓度下，细胞存活率随着干预时间的增加而呈现持续降低的趋势，可以用来开发成治疗肝癌的药物。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于药物
，具体涉及从佛手的干燥成熟果实中分离得到的一种具有治疗肝癌作用的柠檬苦素类化合物及其制备方法。
技术介绍
佛手(CitrusmedicaL.var.sarcodactylisSwingle)，佛手柑、五指橘、飞穰、蜜罗柑、五指香橼、五指柑，系芸香科植物佛手的干燥果实，具有疏肝理气、止痛和胃、燥湿化痰的功效，用于治疗肝胃气滞、胸胁胀痛、胃脘痞满、食少呕吐、咳嗽痰多等疾病。佛手原产印度，在我国已有400多年的种植和应用历史，主要产于浙江、广东、广西、福建、四川、云南等省。根、茎、叶、花、果均可入药，辛、苦、甘、温、无毒；入肝、脾、胃三经，有理气化痰、止呕消胀、舒肝健脾、和胃更多种药用功能。对老年人的气管炎、哮喘病有明显的缓解作用；对一般人的消化不良、胸腹胀闷，有更为显著的疗效。佛手可制成多种中药材，久服有保健益寿的作用。佛手含有挥发油、黄酮、多糖、微量元素等成分。现在药理研究表明佛手具有止咳平喘祛痰、抗肿瘤、抗氧化、免疫调节、抑菌、抗炎、抗抑郁等作用。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种从佛手的干燥成熟果实中分离得到的一种具有治疗肝癌作用的柠檬苦素类化合物及其制备方法。本专利技术的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：具有下述结构式的化合物(Ⅰ)，所述的化合物(Ⅰ)的制备方法，包含以下操作步骤：(a)将佛手的干燥成熟果实粉碎，用75～85％乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用10％乙醇洗脱8个柱体积，再用75％乙醇洗脱10个柱体积，收集75％乙醇洗脱液，减压浓缩得75％乙醇洗脱物浸膏；(c)步骤(b)中75％乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为75:1、45:1、20:1、12:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；(d)步骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为20:1、12:1和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；(e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为75％的甲醇水溶液等度洗脱，收集10～12个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(Ⅰ)。进一步地，所述大孔树脂为AB-8型大孔吸附树脂。进一步地，所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为80％。一种药物组合物，其中含有治疗有效量的所述的化合物(Ⅰ)和药学上可接受的载体。所述的化合物(Ⅰ)在制备治疗肝癌的药物中的应用。所述的药物组合物在制备治疗肝癌的药物中的应用。本专利技术化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。该药物组合物含有治疗有效量的本专利技术化合物(Ⅰ)，其余为药物学上可接受的、对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料以及药物制品辅剂。将本专利技术的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本专利技术药物可通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。附图说明图1为化合物(Ⅰ)结构式；图2为化合物(Ⅰ)理论ECD值与实验ECD值比较；图3为化合物(Ⅰ)对HepG2及L02细胞增殖的影响(n＝3)。具体实施方式下面结合实施例进一步说明本专利技术的实质性内容，但并不以此限定本专利技术保护范围。尽管参照较佳实施例对本专利技术作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本专利技术的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本专利技术技术方案的实质和范围。实施例1：化合物(Ⅰ)分离制备及结构确证试剂来源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷为分析纯，购自上海凌峰化学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。制备方法：(a)将佛手的干燥成熟果实(10kg)粉碎，用80％乙醇热回流提取(25L×3次)，合并提取液，浓缩至无醇味(3L)，依次用石油醚(3L×3次)、乙酸乙酯(3L×3次)和水饱和的正丁醇(3L×3次)萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物(431g)和正丁醇萃取物；(b)步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8型大孔树脂除杂，先用10％乙醇洗脱8个柱体积，再用75％乙醇洗脱10个柱体积，收集75％乙醇洗脱液，减压浓缩得75％乙醇洗脱物浸膏(157g)；(c)步骤(b)中75％乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为75:1(8个柱体积)、45:1(8个柱体积)、20:1(8个柱体积)、12:1(8个柱体积)和1:1(5个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；(d)步骤(c)中组分4(49g)用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为20:1(8个柱体积)、12:1(10个柱体积)和5:1(8个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；(e)步骤(d)中组分2(25g)用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为75％的甲醇水溶液等度洗脱，收集10-12个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(Ⅰ)(35mg)。结构确证：HR-ESIMS显示[M+Na]+为m/z637.2308，结合核磁特征可得分子式为C32H38O12，不饱和度为14。核磁共振氢谱数据δH(ppm，DMSO-d6，400MHz)：H-3(4.84，s)，H-5(3.20，d，J＝5.7)，H-6(4.19，d，J＝5.7)，H-11(3.57，m)，H-12(2.01，d，J＝16.0)，H-12(2.16，d，J＝16.0)，H-14(1.52，dd，J＝12.4，7.2)，H-15(2.66，dd，J＝18.9，7.2)，H-15(2.96，dd，J＝18.9，12.4)，H-17(4.89，s)，H-18(0.99，s)，H-19(1.06，s)，H-21(7.19，s)，H-22(6.05，br，s)，H-23(7.31，t，J＝1.6)，H-28(1.01，s)，H-29(0.83，s)，H-30(3.24，s)，H-3’(6.93，m)，H-4’(1.86，m)，H-5’(1.87，s)，6-OH(3.25，s)，8-OH(4.16，s)，7-OCH3(3.87，s)；核磁共振碳谱数据δC(ppm，DMSO-d6，100MHz)：207.7(C，1-C)，77.6(C，2-C)，8本文档来自技高网...

【技术保护点】
具有下述结构式的化合物(Ⅰ)，

【技术特征摘要】
1.具有下述结构式的化合物(Ⅰ)，
2.权利要求1所述的化合物(Ⅰ)的制备方法，其特征在于包含以下操作步骤：(a)
将佛手的干燥成熟果实粉碎，用75～85％乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次
用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正
丁醇萃取物；(b)步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用10％乙醇洗脱8个柱
体积，再用75％乙醇洗脱10个柱体积，收集75％乙醇洗脱液，减压浓缩得75％乙醇洗脱物
浸膏；(c)步骤(b)中75％乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为75:1、45:1、
20:1、12:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；(d)步骤(c)中组分4用正相
硅胶进一步分离，依次用体积比为20:1...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴金凤，
申请(专利权)人：吴金凤，
类型：发明
国别省市：江苏;32