头孢美唑酸的中间体S-氰甲基异硫脲的分析方法技术

本发明专利技术涉及一种合成头孢美唑酸的中间体S-氰甲基异硫脲的含量及有关物质测定方法，特别涉及一种同时检测S-氰甲基异硫脲、合成该中间体的起始物料硫脲和杂质2,4-二氨基噻唑的方法。该方法采用高效液相色谱法进行测定，色谱柱以辛烷基键合硅胶为填充剂，以缓冲盐-离子对-有机相为流动相，采用流动相或pH小于3的酸溶液或缓冲液作为稀释剂。在该方法下，硫脲、S-氰甲基异硫脲及2,4-二氨基噻唑得到良好的分离，S-氰甲基异硫脲与杂质也得到良好的分离。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于药物分析领域，具体而言，本专利技术涉及一种采用HPLC（高效液相色谱）测定头孢美唑酸化合物中间体S-氰甲基异硫脲及其有关物质的化学分析方法。
技术介绍
S-氰甲基异硫脲为合成的化学中间体，可用于合成头孢美唑酸等化合物。其合成路线为由硫脲（i）和氯乙腈（ii）反应制得S-氰甲基异硫脲（iii），经结晶提纯后制得S-氰甲基异硫脲成品，并进一步用于其他用途，例如可作为合成头孢美唑酸的中间体等。S-氰甲基异硫脲的合成路线如下所示。其中，2,4-二氨基噻唑（iv）为反应副产物，同时也是S-氰甲基异硫脲的主要降解产物。在头孢美唑酸合成过程中，需要测定S-氰甲基异硫脲的准确含量，以提高投料的准确性。S-氰甲基异硫脲、起始物料硫脲及2,4-二氨基噻唑极性较强，难以进行分离，S-氰甲基异硫脲与2,4-二氨基噻唑色谱行为相似，一般的反相色谱难以对其进行分离测定。此外，S-氰甲基异硫脲、硫脲及2,4-二氨基噻唑在有机溶剂中的溶解性较差，在水溶液中的溶解性较好，但在水溶液中S-氰甲基异硫脲会快速转变为2,4-二氨基噻唑，稳定性很差。目前，尚无文献报道S-氰甲基异硫脲的质量控制情况，对其测定分析亦无文献资料可循。为解决上述问题，专利技术人提供了一种测定方法，可以同时准确测定上述三种化合物。此法既解决了三者的色谱分离问题，也解决了S-氰甲基异硫脲在水溶液中的不稳定的问题，可用于测定合成S-氰甲基异硫脲时反应液中S-氰甲基异硫脲、硫脲和2,4-二氨基噻唑的含量，以判断合成S-氰甲基异硫脲时的反应进程，也可以用来测定S-氰甲基异硫脲成品中的硫脲及2,4-二氨基噻唑的含量，以及除硫脲及2,4-二氨基噻唑以外的其他杂质，进而评估所制备的S-氰甲基异硫脲的质量。
技术实现思路
针对现有技术的不足，本专利技术的目的是提供一种检测S-氰甲基异硫脲的方法，该方法可同时测定反应液中的S-氰甲基异硫脲、硫脲和2,4-二氨基噻唑的含量，以及测定S-氰甲基异硫脲成品的含量和有关物质。本专利技术的目的可以通过以下技术方案实现，具体如下：（1）检测条件色谱柱以辛烷基键合硅胶为填充剂；以pH为2.0~3.0的磷酸盐缓冲液（磷酸二氢钾浓度为0.1mol/L，离子对试剂浓度为0.005mol/L~0.015mol/L，用磷酸调节pH）为流动相A，以乙腈、甲醇或二者的混合物为流动相B；流动相A与流动相B的体积比为85~95∶5~15；流速为0.7ml~1.3ml/min；柱温为20-40℃；检测波长为200nm~240nm。其中，所述离子对试剂选自戊烷磺酸钠、己烷磺酸钠、庚烷磺酸钠、辛烷磺酸钠。（2）溶液的配制1）供试品溶液1：取制备S-氰甲基异硫脲的反应液适量，用稀释剂溶解并稀释制成每1ml含S-氰甲基异硫脲约0.01mg~1mg的溶液，即得。2）供试品溶液2：取S-氰甲基异硫脲供试品适量，用稀释剂溶解并稀释制成每1ml含S-氰甲基异硫脲约0.01mg~1mg的溶液，即得。3）对照品溶液：取S-氰甲基异硫脲、硫脲及2,4-二氨基噻唑对照品适量，用稀释剂溶解并稀释制成每1ml含各组分约0.01mg~1mg的溶液，即得。其中，所述稀释剂选自pH不大于3的缓冲液或酸溶液，优选为流动相或0.01mol/L~1mol/L的盐酸溶液。优选地，所述的高效液相色谱法的色谱条件为：以辛烷基键合硅胶为填充剂；以pH2.5的磷酸盐缓冲液（取庚烷磺酸钠2.2g，磷酸二氢钾13.6g，加水稀释至1000ml，混匀，用磷酸调节pH至2.5，抽滤，即得）-乙腈（90:10）为流动相；流速为1.0ml/min；柱温为30℃；检测波长为210nm；进样量为10μl；稀释剂为流动相，进行有关物质检查时供试品溶液的浓度以S-氰甲基异硫脲计为1mg/ml，进行含量测定时供试品溶液的浓度为0.1mg/ml。本专利技术人经过大量的实验研究，开发出了本专利技术提供的检测方法，其优点在于：（1）专属性好，灵敏度高。选用等度洗脱，色谱峰信号的基线良好；在选定的流动相条件下，各色谱峰得到良好的分离，专属性良好；在选定的波长下，各组分紫外吸收强，响应高，检测灵敏度高。（2）分析时间短，分离度好。由于多氨基的存在，硫脲、S-氰甲基异硫脲及2,4-二氨基噻唑极性很强，其色谱分离亦存在较大困难。在专利技术人选定的色谱条件下，仅采用等度洗脱，运行时间约10min，即可使难分离的化合物得到分离。（3）解决了待测组分在有机溶剂中溶解性不佳，在水溶液中稳定性较差的问题，使各组分可以得到准确测定。（4）可用于合成S-氰甲基异硫脲时的反应液中各组分的测定。在该法下，可定量检测反应液中起始物料硫脲含量，以判断反应进程。（5）可用于S-氰甲基异硫脲的质量控制。在本法下，可以检测S-氰甲基异硫脲的含量及有关物质，进而评估其质量。（6）此外，本方法还可用于检测头孢美唑酸、头孢美唑钠或注射用头孢美唑钠中的杂质硫脲、S-氰甲基异硫脲及2,4-二氨基噻唑的含量，可以更好的控制药品质量，保证用药安全。附图说明附图1专利技术实施例5硫脲、S-氰甲基异硫脲、2,4-二氨基噻唑对照品溶液色谱图附图2专利技术实施例6制备S-氰甲基异硫脲的反应液的色谱图附图3专利技术实施例7S-氰甲基异硫脲有关物质测定供试品溶液色谱图具体实施方式以下通过对本专利技术具体实施方式的描述说明，但不限制本专利技术。实施例1色谱条件的选择检测波长：210nm流动相流速：1ml/min柱温：30℃pH2.5的磷酸盐缓冲液：取磷酸二氢钾13.6g，加水稀释至1000ml，混匀，用磷酸调节pH至2.5，抽滤，即得。pH2.5的磷酸盐缓冲液-0.01mol/L庚烷磺酸钠：取庚烷磺酸钠2.2g，磷酸二氢钾13.6g，加水稀释至1000ml，混匀，用磷酸调节pH至2.5，抽滤，即得。供试品溶液：取硫脲、S-氰甲基异硫脲、2,4-二氨基噻唑适量，用0.5mol/L盐酸溶液配制成含各组分约为0.1mg/ml的混合溶液，即得。精密量取供试品溶液10μl，注入高效液相色谱仪，对色谱条件进行初步筛选，以S-氰甲基异硫脲与2,4-二氨基噻唑的分离情况为判断指标。结果见表1。表1色谱分离体系的初筛结果上述结果表明，使用不含离子对试剂的流动相体系，即使水相比例达到99%，各目标物仍难以分离。而当在流动相中添加阴离子离子对试剂庚烷磺酸钠后，待测组分可得到分离。基于表1所取得的结果，确定基本的色谱分离条件如下：色谱柱为C8柱，流动相为pH2.5的磷酸盐缓冲液（含0.01mol/L庚烷磺酸钠）-乙腈（90:10）；柱温为30℃；流速为1ml/min；进样量为10μl；检测波长为210nm。在基本的色谱条件下，对色谱条件的参数调整范围进行试验，结果如下。（1）其他色谱条件不变，调整缓冲盐与乙腈的比例为85:15、90:10和95:5，观察分离度，结果表明S-氰甲基异硫脲、2,4-二氨基噻唑、硫脲分离良好，与其他未知杂质峰的分离度也符合要求，分离度均大于1.5。（2）其他色谱条件不变，调整水相pH分别为2.0、2.5、和3.0，流动相比例为缓冲盐-有机相（90:10），观察分离度，结果表明S-氰甲基异硫脲、2,4-二氨基噻唑、硫脲分离良好，与其他未知杂质峰的分离度也符合要求，分离度均大于1.5。（3）其他色谱条件不本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种S‑氰甲基异硫脲的质量检测方法，其特征在于，采用高效液相色谱法，色谱柱以辛烷基键合硅胶为填充剂，检测波长为200～240nm，以pH为2.0~3.0的磷酸盐缓冲液为流动相A，以乙腈、甲醇或二者混合物为流动相B，其中，所述磷酸盐缓冲液加入0.005mol/L~0.015mol/L的离子对试剂，所述离子对试剂选自戊烷磺酸钠、己烷磺酸钠、庚烷磺酸钠、辛烷磺酸钠，流动相A与流动相B的体积比为85~95:5~15；进样量为1~100μl；流速为0.7~1.3ml/min。

【技术特征摘要】
1.一种S-氰甲基异硫脲的质量检测方法，其特征在于，采用高效液相色谱法，色谱柱以辛烷基键合硅胶为填充剂，检测波长为200～240nm，以pH为2.0~3.0的磷酸盐缓冲液为流动相A，以乙腈、甲醇或二者混合物为流动相B，其中，所述磷酸盐缓冲液加入0.005mol/L~0.015mol/L的离子对试剂，所述离子对试剂选自戊烷磺酸钠、己烷磺酸钠、庚烷磺酸钠、辛烷磺酸钠，流动相A与流动相B的体积比为85~95:5~15；进样量为1~100μl；流速为0.7~1.3ml/min。2.根据权利要求1所述的方法，所述离子对试剂为庚烷磺酸钠。3.根据权利要求1或2所述的方法，离子对试剂的浓度为0.01mol/L。4.根据权利要求1所述的方法，流动相B为乙腈。5.根据权利要求1或4所述的方法，流动相A和流动相B的体积比为90:10。6.根据权利要求1所述的方法，所述磷酸盐缓冲液为0.1mol/L的磷酸二氢钾，用磷酸调节pH至2.5。7.根据权利要求1所述的方法，检测波长为210nm，进样体积为10μl，流速为1.0ml/min。8.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭可垄，李睿，姚远，
申请(专利权)人：重庆药友制药有限责任公司，
类型：发明
国别省市：重庆;50