一种无动物源性的干细胞培养体系制造技术

技术编号:14314010 阅读:128 留言:0更新日期:2016-12-30 15:56
本发明专利技术公开了一种无动物源性的干细胞培养体系,包括由HFF制作而成的饲养层细胞和生长培养基组成,生长培养基包括DMEM培养基、由聚已内酯制作而成的三维支架、血清替代物、β‑疏基乙醇、LIF、非必需氨基酸、层黏蛋白、胰岛素和抗生素。本发明专利技术具有以下优点和效果:通过在培养体系中加入HFF制作而成的饲养层细胞,避免动物源性成分造成的污染和不确定成分,通过加入抑制干细胞分化的LIF和促进干细胞增殖的胰岛素及β‑疏基乙醇,用血清替代物代替人血清或动物血清,用聚已内酯制作而成的三维支架模拟出干细胞在体内所处的三维环境,提高干细胞培养效率,达到去除动物源性成分、培养成分和培养机制明确、培养效率高的效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及干细胞培养领域,特别涉及一种无动物源性的干细胞培养体系
技术介绍
干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞。在一定条件下,它可以分化成多种功能细胞。根据干细胞所处的发育阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞。根据干细胞的发育潜能分为三类:全能干细胞、多能干细胞和单能干细胞。公开号为CN101880649A的中国专利《一种干细胞培养方法》公开了一种干细胞培养方法,制备未经丧失分裂能力处理的羊膜上皮细胞滋养层;接种干细胞于羊膜上皮细胞滋养层上,在培养液中培养。但是该干细胞培养方法存在以下缺点:羊膜上皮细胞滋养层会分泌物内包含未知因子和成分,会包含动物源性成分,同时在培养时加入人全血清或脐带血清后,含有未知因子有可能诱导干细胞分化或死亡,滋养层和人全血清加入后会导致培养基内动物源性成分和不确定成分,限制了干细胞的应用与研究。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种无动物源性的干细胞培养体系,具成分确定的效果。本专利技术的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的:一种无动物源性的干细胞培养体系,包括由HFF制作而成的饲养层细胞和生长培养基组成,所述生长培养基包括DMEM培养基、由聚已本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种无动物源性的干细胞培养体系,其特征在于:包括由HFF制作而成的饲养层细胞和生长培养基组成,所述生长培养基包括DMEM培养基、由聚已内酯制作而成的三维支架、血清替代物、β‑疏基乙醇、LIF、非必需氨基酸、层黏蛋白、胰岛素和抗生素。

【技术特征摘要】
1.一种无动物源性的干细胞培养体系,其特征在于:包括由HFF制作而成的饲养层细胞和生长培养基组成,所述生长培养基包括DMEM培养基、由聚已内酯制作而成的三维支架、血清替代物、β-疏基乙醇、LIF、非必需氨基酸、层黏蛋白、胰岛素和抗生素。2.根据权利要求1所述的一种无动物源性的干细胞培养体系,其特征在于:所述生产培养基内所述血清替代物为10%,所述β-疏基乙醇浓度为0.1mmol/ml,所述LIF浓度为1.5×103U/ml,所述抗生素为60mg/L的青霉素和100mg/L的链霉素,所述胰岛素浓度为20ng/ml。3.根据权利要求2所述的一种无动物源性的干细胞培养体系,其特征在于:所述生长培养基还包括10g/L的人血清蛋白。4.根据权利要求3所述的一种无动物源...

【专利技术属性】
技术研发人员:汪铮吴振化
申请(专利权)人:浙江译美生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:浙江;33

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