本发明专利技术提供了一种新型的磷脂类衍生化合物，得到形如磷脂‑PEG‑叶酸或磷脂‑PEG‑鼠李糖的磷脂类衍生物。本发明专利技术还提供了含有所述磷脂类衍生物的脂质体药物组合物及其制备方法，其可用于靶向免疫治疗肿瘤，利用补体依赖毒性免疫靶向杀伤肿瘤细胞。本发明专利技术采用鼠李糖和叶酸修饰的磷脂作为原料制备脂质体，靶向性好，充分利用人体天然免疫高效杀伤肿瘤细胞，毒副作用极小，适合临床应用研究和工业化生产。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药物化学领域，具体涉及一种利用天然糖抗体靶向免疫治疗肿瘤的脂质体及其制备方法与应用。
技术介绍
鼠李糖(rhamnose,Rha)是一种单糖，存在于许多细菌中，但人体中却不能合成。大量研究已经表明鼠李糖具有免疫原性。而最近的研究发现，在人体血清中具有高滴度的鼠李糖抗体，并且其含量比α-Gal丰富，而改造过的α-Gal已被利用多价效应能有效杀伤肿瘤细胞。而且在野生型小鼠中，anti-Rha比anti-α-Gal数量多很多，anti-α-Gal几乎没有，说明如果做小鼠实验的话，利用anti-α-Gal需要将小鼠体内的半乳糖基转移酶基因进行敲除，而利用anti-Rha则不用；另外，鼠李糖的结构也比α-Gal简单，更容易通过化学方法进行改造。这提示我们，应用鼠李糖作为免疫抗原进行改造，用作抗肿瘤药物研究会有更好的效果。脂质体是一种很好的运送载体，很多研究都利用脂质体包裹药物。但是脂质体载药普遍面临一大问题，即包封率不高且容易泄露，另外许多药物本身毒副作用大，这些都极大地限制了脂质体包封药物的应用。而且肿瘤细胞有许多分子特征，特别是一些肿瘤细胞表面会过表达许多受体，如表皮生长因子受体(EGFR)、叶酸受体(FR)等；其中叶酸受体在90％的肿瘤细胞表面过表达，如卵巢癌、乳腺癌、宫颈癌、子宫内膜癌、肾癌、膀胱癌、胰腺癌、黑色素瘤、骨肉瘤等。况且，叶酸分子结构简单，易于进行化学改造。本专利技术采用鼠李糖和叶酸修饰的磷脂作为原料制备脂质体，无需包裹、靶向性好，充分利用人体天然免疫高效杀伤肿瘤细胞，毒副作用极小。
技术实现思路
本专利技术的一个目的提供一种新型磷脂类衍生物，其可用于制备靶向免疫治疗肿瘤的脂质体，利用补体依赖毒性免疫靶向杀伤肿瘤细胞。本专利技术提供了一种新型的磷脂类衍生化合物，其具有如式(I)所示的结构：其中，R1选自如下的基团：R2选自如下的基团：其中，式(I)结构中的m为大于零的正整数；优选的，m的范围为1-500的正整数；更优选的，m的范围为1-40、40-50或50-500的正整数；更优选的，m的范围为20-40、40-50或50-150的正整数；最优选的，m为正整数45；其中，R1基团中的R3选自H，Na，K，更优选为H；其中，R2基团中的R4为一价阳离子，选自H+，Na+，K+，NH4+，优选为NH4+；其中，R2基团中的n为10-20的正整数；优选的，n为正整数12，14或16；更优选的，n为正整数16；其中，R2基团中的p和q各自为5-15的正整数；优选的，p和q各自为5-10的正整数；更优选的，p和q分别为正整数7。优选的,式(I)选自如下结构的化合物：(1)(2)式(I)的化合物是由PEG修饰的磷脂与叶酸或鼠李糖反应生成。其中，磷脂主体结构的如R2所示，优选的磷脂种类为1,2-二油酰-SN-甘油-3-磷脂酰乙醇胺(DOPE)，二-十二酰基磷脂酰乙醇胺(DLPE),二-十四酰基磷脂酰乙醇胺(DMPE),1,2-二硬酯酸-3-磷脂酰乙醇胺(DSPE),棕榈酰油酰磷脂酰胆碱(POPC)。更优选的磷脂种类为1,2-二油酰-SN-甘油-3-磷脂酰乙醇胺(DOPE)或1,2-二硬酯酸-3-磷脂酰乙醇胺(DSPE)。修饰磷脂的聚乙二醇分子量优选为1000-200000道尔顿，优选为1000-50000道尔顿，更优选为2000-20000道尔顿。将聚乙二醇修饰的磷脂与叶酸(Folate)或鼠李糖(Rhamnose)反应生成磷脂-PEG-Folate或磷脂-PEG-Rhamnose,其通式结构如式(I)所示。优选的，当所述的PEG分子量为2000时，通式中的m值为45。更优选的，当所述的磷脂为DSPE时，可以得到两种类型的具体化合物，1,2二硬酯酸-3磷脂酰乙醇胺－聚乙二醇－叶酸(DSPE-PEG-Folate)，1,2二硬酯酸-3磷脂酰乙醇胺－聚乙二醇－鼠李糖(DSPE-PEG-Rhamnose)。其中，优选的分子DSPE-PEG2000-Folate和DSPE-PEG2000-Rhamnose的结构式分别如(1)和(2)所述。本专利技术的另一目的是提供一种磷脂-PEG-Folate分子的制备方法，所述方法包括如下的步骤：(1)将叶酸与聚乙二醇修饰的磷脂在合适的溶剂及催化剂环境下反应；(2)分离得到磷脂-PEG-Folate分子，该分子结构如式(I)所示：其中，R1基团的结构如下所示：R2选自如下的基团：其中，式(I)结构中的m为大于零的正整数；优选的，m的范围为1-500的正整数；更优选的，m的范围为1-40、40-50或50-500的正整数；更优选的，m的范围为20-40、40-50或50-150的正整数最优选的，m为正整数45；其中，R1基团中的R3选自H，Na，K，更优选为H；其中，R2基团中的R4为一价阳离子，选自H+，Na+，K+，NH4+，优选为NH4+；其中，R2基团中的n为10-20的正整数；优选的，n为正整数12，14或16；更优选的，n为整数16；其中，R2基团中的p和q各自为5-15的正整数；优选的，p和q各自为5-10的正整数；更优选的，p和q分别为正整数7。上述反应步骤(1)中，优选的PEG修饰的磷脂种类为DOPE-PEG-NH2，DLPE-PEG-NH2,DMPE-PEG-NH2,DSPE-PEG-NH2，POPC-PEG-NH2。更优选的PEG修饰的磷脂种类DOPE-PEG-NH2或DSPE-PEG-NH2。修饰磷脂的聚乙二醇分子量优选为1000-200000道尔顿，优选为1000-50000道尔顿，更优选为2000-20000道尔顿。一种优选的PEG修饰的磷脂为DSPE-PEG2000-NH2。上述反应步骤(1)中，所述合适的溶剂选自二甲亚砜(DMSO)、甲醇、乙醇、氯仿、丙酮、乙醚及乙酸乙酯中的一种或其混合物，优选为二甲亚砜(DMSO)。反应条件为将叶酸(Folate)溶解在DMSO中，再加入PEG修饰的磷脂(例如DSPE-PEG-NH2或DOPE-PEG-NH2)和吡啶。其中叶酸和PEG修饰的磷脂的摩尔比为1:1-20:1，优选为1:1-10:1，更优选为1:1-5:1。反应温度为0℃-45℃，优选为10℃-30℃，优选为室温环境。上述反应步骤(1)中，所述合适的催化剂为常用缩合剂，如二环己基二亚胺(DCC)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)等，更优选为二环己基碳二亚胺(DCC)。上述反应步骤(2)中，反应完成后加热蒸发去除溶剂，加入水溶解，离心收取上清，透析后，冻干得到磷脂-PEG-Folate分子。本专利技术的另一目的是提供一种磷脂-PEG-Rhamnose分子的制备方法，所述方法包括如下的步骤：(1)将鼠李糖衍生物(RhaNBuacid)与聚乙二醇修饰的磷脂在合适的溶剂及催化剂环境下反应；其中，鼠李糖衍生物的结构如下所示：(2)分离得到磷脂-PEG-Rhamnose分子，其结构如式(I)所示：其中，R1基团的结构如下所示：R2选自如下的基团：其中，式(I)结构中的m为大于零的正整数；优选的，m的范围为1-500的正整数；更优选的，m的范围为1-40、40-50或50-500的正整数；更优选的，m的范围为20-40、40-50或50-150本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种磷脂类衍生化合物，其具有如式(I)所示的结构：其中，R1选自如下的基团：R2选自如下的基团：其中，式(I)结构中的m为大于零的正整数；优选的，m的范围为1‑500的正整数；更优选的，m的范围为1‑40、40‑50或50‑500的正整数；更优选的，m的范围为20‑40、40‑50或50‑150的正整数；最优选的，m为正整数45；其中，R1基团中的R3选自H，Na，K，更优选为H；其中，R2基团中的R4为一价阳离子，选自H+，Na+，K+，NH4+，优选为NH4+；其中，R2基团中的n为10‑20的正整数；优选的，n为正整数12，14或16；更优选的，n为正整数16；其中，R2基团中的p和q各自为5‑15的正整数；优选的，p和q各自为5‑10的正整数；更优选的，p和q分别为正整数7。
【技术特征摘要】
1.一种磷脂类衍生化合物，其具有如式(I)所示的结构：其中，R1选自如下的基团：R2选自如下的基团：其中，式(I)结构中的m为大于零的正整数；优选的，m的范围为1-500的正整数；更优选的，m的范围为1-40、40-50或50-500的正整数；更优选的，m的范围为20-40、40-50或50-150的正整数；最优选的，m为正整数45；其中，R1基团中的R3选自H，Na，K，更优选为H；其中，R2基团中的R4为一价阳离子，选自H+，Na+，K+，NH4+，优选为NH4+；其中，R2基团中的n为10-20的正整数；优选的，n为正整数12，14或16；更优选的，n为正整数16；其中，R2基团中的p和q各自为5-15的正整数；优选的，p和q各自为5-10的正整数；更优选的，p和q分别为正整数7。2.根据权利要求1所述的磷脂类衍生化合物，其选自如(1)或(2)所示结构的化合物：(1)(2)3.一种磷脂-PEG-Folate分子的制备方法，所述方法包括如下的步骤：(1)将叶酸与聚乙二醇修饰的磷脂在合适的溶剂及催化剂环境下反应；(2)分离得到磷脂-PEG-Folate分子，该分子结构如式(I)所示：其中，R1基团的结构如下所示：R2选自如下的基团：其中，式(I)结构中的m为大于零的正整数；优选的，m的范围为1-500的正整数；更优选的，m的范围为1-40、40-50或50-500的正整数；更优选的，m的范围为20-40、40-50或50-150的正整数最优选的，m为正整数45；其中，R1基团中的R3选自H，Na，K，更优选为H；其中，R2基团中的R4为一价阳离子，选自H+，Na+，K+，NH4+，优选为NH4+；其中，R2基团中的n为10-20的正整数；优选的，n为正整数12，14或16；更优选的，n为整数16；其中，R2基团中的p和q各自为5-15的正整数；优选的，p和q各自为5-10的正整数；更优选的，p和q分别为正整数7。4.一种磷脂-PEG-Rhamnose分子的制备方法，所述方法包括如下的步骤：(1)将鼠李糖衍生物(RhaNBuacid)与聚乙二醇修饰的磷脂在合适的溶剂及催化剂环境下反应；其中，鼠李糖衍生物的结构如下所示：(2)分离得到磷脂-PEG-Rhamnose分子，其结构如式(I)所示：其中，R1基团的结构如下所示：R2选自如下的基团：其中，式(I)结构中的m为大于零的正整数；优选的，m的范围为1-500的正整数；更优选的，m的范围为1-...
【专利技术属性】
技术研发人员：易文，饶雄剑，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33
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