抗锯齿蛋白1抗体及使用方法技术

本公开文本提供抗锯齿蛋白1抗体及其使用方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】专利
本专利技术涉及抗锯齿蛋白(Jagged)抗体及其使用方法。专利技术背景刻缺蛋白(Notch)信号传导途径调节一系列多样的细胞功能(Kopan et al.，Cell 137：216-233(2009))。已经在哺乳动物中鉴定了四种刻缺蛋白受体，即刻缺蛋白1-4，它们共享基本结构元件，包括胞外域，跨膜域，和胞内域。类似地，规范的刻缺蛋白配体共享某些结构相似性，但是也已经鉴定了一些非规范的刻缺蛋白配体(Kopan et al.，Cell 137：216-233(2009))。哺乳动物中的五种规范配体是德耳塔样(Delta-like)1，德耳塔样3，德耳塔样4，锯齿蛋白1和锯齿蛋白2。刻缺蛋白配体对刻缺蛋白受体胞外域的结合启动始于ADAM(解联蛋白和金属蛋白酶)家族的α-分泌酶在胞外S2位点处的蛋白水解切割的信号传导级联。S2处的切割继以γ-分泌酶在胞内S3位点处的蛋白水解切割，这导致胞内域释放和下游事件，最终活化刻缺蛋白依赖性转录因子诸如Hes1和Hey。异常刻缺蛋白表达和信号传导牵涉多种疾病，包括癌症(Koch et al.，Cell.Mol.Life Sci.64：2746-2762(2007))。清楚的是仍然需要具有最适于开发成治疗剂的临床属性的药剂。本文所述专利技术满足了此需求并提供了其它好处。专利技术概述本专利技术提供抗锯齿蛋白1抗体及其使用方法。本专利技术人出乎意料地发现，抗锯齿蛋白1抗体A-1(见图4和PCT公开文本No.2014/028446)在热处理和/或冻融条件后在重链中受到切割。该抗体较差的稳定性潜在地降低它作为治疗剂的价值。分析切割位点没有揭示已知的蛋白酶切割基序。因此不知道改变抗体序列是否能降低观察到的切割。而且，因为切割位点在一个重链HVR中，所以即使氨基酸改变会降低切割，也不知道是否能在没有显著降低该抗体对锯齿蛋白1的亲和力的情况下进行此类改变。专利技术人令人惊讶地发现突变HVR-H3中第101位处的氨基酸降低切割且亲和力只有轻微损失。在一些实施方案中，提供了一种结合人锯齿蛋白1的分离的抗体，其中该抗体包含包含氨基酸序列SEQ ID NO：55或59的HVR-H3，其中X为除S以外的任何氨基酸。在一些实施方案中，该抗体包含至少一个，至少两个，至少三个，至少四个，或五个选自下述的HVR：包含氨基酸序列SEQ ID NO：35或78的HVR-H1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：28或36的HVR-H2；包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的HVR-L1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：39的HVR-L2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：16或40的HVR-L3。在一些实施方案中，该抗体包含(a)包含氨基酸序列SEQ ID NO：78的HVR-H1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：36的HVR-H2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：55的HVR-H3；或(b)包含氨基酸序列SEQ ID NO：78的HVR-H1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：36的HVR-H2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：59的HVR-H3；或(c)包含氨基酸序列SEQ ID NO：78的HVR-H1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：28的HVR-H2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：59的HVR-H3。在本文所述任何实施方案中，该抗体可包含(a)包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的HVR-L1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：39的HVR-L2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：40的HVR-L3；或(b)包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的HVR-L1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：39的HVR-L2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：16的HVR-L3；或(c)包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的HVR-L1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：39的HVR-L2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：16的HVR-L3。在一些实施方案中，结合锯齿蛋白1的分离的抗体包含(a)包含氨基酸序列SEQ ID NO：78的HVR-H1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：36的HVR-H2；包含氨基酸序列SEQ ID NO：55的HVR-H3；包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的HVR-L1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：39的HVR-L2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：40的HVR-L3；或(b)包含氨基酸序列SEQ ID NO：78的HVR-H1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：36的HVR-H2；包含氨基酸序列SEQ ID NO：59的HVR-H3；包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的HVR-L1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：39的HVR-L2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：16的HVR-L3；或(c)包含氨基酸序列SEQ ID NO：78的HVR-H1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：28的HVR-H2；包含氨基酸序列SEQ ID NO：59的HVR-H3；包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的HVR-L1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：39的HVR-L2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：16的HVR-L3。在一些实施方案中，结合锯齿蛋白1的分离的抗体包含与氨基酸序列SEQ ID NO：54，58，或62具有至少95％同一性的VH序列。在一些实施方案中，结合锯齿蛋白1的分离的抗体包含与氨基酸序列SEQ ID NO：10，26，或34具有至少95％同一性的VL序列。在一些实施方案中，该抗体包含(a)与氨基酸序列SEQ ID NO：54具有至少95％同一性的VH序列和与氨基酸序列SEQ ID NO：34具有至少95％同一性的VL序列；或(b)与氨基酸序列SEQ ID NO：58具有至少95％同一性的VH序列和与氨基酸序列SEQ ID NO：10具有至少95％同一性的VL序列；或(c)与氨基酸序列SEQ ID NO：62具有至少95％同一性的VH序列和与氨基酸序列SEQ ID NO：26具有至少95％同一性的VL序列。在一些实施方案中，结合人锯齿蛋白1的分离的抗体包含(a)VH序列SEQ ID NO：54，其中X为除S以外的任何氨基酸，和VL序列SEQ ID NO：34；或(b)VH序列SEQ ID NO：58，其中X为除S以外的任何氨基酸，和VL序列SEQ ID NO：10；或(c)VH序列SEQ ID NO：62，其中X为除S以外的任何氨基酸，和VL序列SEQ ID NO：26。在一些实施方案中，该抗体包含VH序列SEQ ID NO：54和VL序列SEQ ID NO：34。在一些实施方案中，重链包含氨基酸序列SEQ ID NO：56且轻链包含氨基酸序列SEQ ID NO：53。在一些实施方案中，重链包含氨基酸序列SEQ ID NO：57且轻链包含氨基酸序列SEQ ID NO：53。在本文所述任何实施方案中，X可以是除S或H以外的任何氨基酸。在本文所述任何实施方案中，X可以选自A，D，E，G，I，K，L，N，Q，R，T，和V。在本文所述任何实施方案中，X可以是T。在一些实施方案中，提供了一种结合人锯齿蛋白1的分离的抗体本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种结合人锯齿蛋白1的分离的抗体，其中该抗体包含包含氨基酸序列SEQ ID NO：55或59的HVR‑H3，其中X为除S以外的任何氨基酸。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.02.12 US 61/939,1101.一种结合人锯齿蛋白1的分离的抗体，其中该抗体包含包含氨基酸序列SEQ ID NO：55或59的HVR-H3，其中X为除S以外的任何氨基酸。2.权利要求1的分离的抗体，其中该抗体包含至少一个，至少两个，至少三个，至少四个，或五个选自下述的HVR：包含氨基酸序列SEQ ID NO：35或78的HVR-H1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：28或36的HVR-H2；包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的HVR-L1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：39的HVR-L2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：16或40的HVR-L3。3.前述权利要求任一项的分离的抗体，其中该抗体包含：a)包含氨基酸序列SEQ ID NO：78的HVR-H1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：36的HVR-H2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：55的HVR-H3；或b)包含氨基酸序列SEQ ID NO：78的HVR-H1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：36的HVR-H2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：59的HVR-H3；或c)包含氨基酸序列SEQ ID NO：78的HVR-H1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：28的HVR-H2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：59的HVR-H3。4.前述权利要求任一项的分离的抗体，其中该抗体包含：a)包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的HVR-L1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：39的HVR-L2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：40的HVR-L3；或b)包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的HVR-L1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：39的HVR-L2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：16的HVR-L3；或c)包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的HVR-L1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：39的HVR-L2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：16的HVR-L3。5.前述权利要求任一项的分离的抗体，其中该抗体包含：a)包含氨基酸序列SEQ ID NO：78的HVR-H1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：36的HVR-H2；包含氨基酸序列SEQ ID NO：55的HVR-H3；包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的HVR-L1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：39的HVR-L2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：40的HVR-L3；或b)包含氨基酸序列SEQ ID NO：78的HVR-H1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：36的HVR-H2；包含氨基酸序列SEQ ID NO：59的HVR-H3；包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的HVR-L1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：39的HVR-L2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：16的HVR-L3；或c)包含氨基酸序列SEQ ID NO：78的HVR-H1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：28的HVR-H2；包含氨基酸序列SEQ ID NO：59的HVR-H3；包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的HVR-L1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：39的HVR-L2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：16的HVR-L3。6.前述权利要求任一项的分离的抗体，其中该抗体包含与氨基酸序列SEQ ID NO：54，58，或62具有至少95％同一性的VH序列。7.前述权利要求任一项的分离的抗体，其中该抗体包含与氨基酸序列SEQ ID NO：10，26，或34具有至少95％同一性的VL序列。8.前述权利要求任一项的分离的抗体，其中该抗体包含：a)与氨基酸序列SEQ ID NO：54具有至少95％同一性的VH序列和与氨基酸序列SEQ ID NO：34具有至少95％同一性的VL序列；或b)与氨基酸序列SEQ ID NO：58具有至少95％同一性的VH序列和与氨基酸序列SEQ ID NO：10具有至少95％同一性的VL序列；或c)与氨基酸序列SEQ ID NO：62具有至少95％同一性的VH序列和与氨基酸序列SEQ ID NO：26具有至少95％同一性的VL序列。9.一种结合人锯齿蛋白1的分离的抗体，其包含：a)VH序列SEQ ID NO：54，其中X为除S以外的任何氨基酸，和VL序列SEQ ID NO：34；或b)VH序列SEQ ID NO：58，其中X为除S以外的任何氨基酸，和VL序列SEQ ID NO：10；或c)VH序列SEQ ID NO：62，其中X为除S以外的任何氨基酸，和VL序列SEQ ID NO：26。10.权利要求9的分离的抗体，其中该抗体包含VH序列SEQ ID NO：54和VL序列SEQ ID NO：34。11.权利要求10的分离的抗体，其中重链包含氨基酸序列SEQ ID NO：56且轻链包含氨基酸序列SEQ ID NO：53。12.权利要求10的分离的抗体，其中重链包含氨基酸序列SEQ ID NO：57且轻链包含氨基酸序列SEQ ID NO：53。13.前述权利要求任一项的分离的抗体，其中X为除S或H以外的任何氨基酸。14.前述权利要求任一项的分离的抗体，其中X选自A，D，E，G，I，K，L，N，Q，R，T，和V。15.前述权利要求任一项的分离的抗体，其中X为T。16.一种结合人锯齿蛋白1的分离的抗体，其包含：a)包含氨基酸序列SEQ ID NO：78的HVR-H1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：36的HVR-H2；包含氨基酸序列SEQ ID NO：37的HVR-H3；包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的HVR-L1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：39的HVR-L2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：40的HV...

【专利技术属性】
技术研发人员：Y·钦，J·Q·杭，C·W·西贝尔，Y·吴，
申请(专利权)人：豪夫迈·罗氏有限公司，
类型：发明
国别省市：瑞士;CH