测定Hg2+浓度对红裸须摇蚊幼虫抗氧化酶活性的方法技术

一种测定Hg2+浓度对红裸须摇蚊幼虫抗氧化酶活性的方法。近年来关于昆虫毒理学方面的研究受到较大重视。摇蚊幼虫为完全变态类昆虫，是一种分布广泛且种类数量众多的底栖动物。一种测定Hg2+浓度对红裸须摇蚊幼虫抗氧化酶活性的方法，其组成包括：试验材料和试验方法，以及数据处理方法，所述的试验材料采用红裸须摇蚊幼虫，所述的试验材料中试验用水使用蒸馏水，试验水温为21.0±0.5℃，pH为7.0±0.5，所述的试验材料中使用的Hg2+用分析纯HgCl2，配置浓度有六个处理组，分别是0 mg/L、1.6 mg/L、2.4 mg/L、3.6 mg/L、5.4 mg/L、8.1mg/L。本发明专利技术应用于昆虫毒理实验领域。

【技术实现步骤摘要】


：
本专利技术涉及一种测定
Hg2+
浓度对红裸须摇蚊幼虫抗氧化酶活性的方法。以红裸须摇蚊幼虫为实验材料，得出
CAT
、
POD
和
SOD
这三种生物指标在汞暴露下的变化规律，目的是探究汞对红裸须摇蚊幼虫抗氧化系统的效应，同时用以评估红裸须摇蚊幼虫对汞胁迫的敏感性，本方法也将为红裸须摇蚊幼虫重金属污染的生物监测提供理论依据。

技术介绍
：
近年来关于昆虫毒理学方面的研究受到较大重视。摇蚊幼虫为完全变态类昆虫，是一种分布广泛且种类数量众多的底栖动物，具有解毒能力低、对污染物的暴露敏感、生活周期短等特性，且在实验室内易饲养，是水体质量监测中的重要指示生物。在加强在水生态毒理学中应用研究中，摇蚊幼虫被广泛应用于毒性测试。基于摇蚊幼虫对水体中重金属的敏感性，开展了重金属对摇蚊幼虫的急性和慢性毒性实验。相关的研究有
Cu2+
、
Cd2+
对红裸须摇蚊
(Propsilocerus akamusi)
幼虫和羽摇蚊
(Chironomus plumosus)
幼虫的急性毒性效应及对过氧化氢酶（
CAT
）、超氧化物歧化酶（
SOD
）和谷胱甘肽/>-S-
转移酶（
GSTs
）活性的影响等。
Hg2+
是存在于水环境中极具毒性的重金属，其毒性涉及到氧化应激，即
Hg2+
可诱导自由基的形成并改变了细胞的抗氧化能力，并且暴露于含有
Cd
和
Cu
的沉积物，对伸展摇蚊
(Chironomus tentans)
幼虫具有致畸作用。
关于生物体内重要解毒酶，我国近年来也开展了一些工作，研究的污染物涉及重金属、有机物污染物和工业废水，基于这些特性，摇蚊幼虫作为水生态系统食物链的关键环节，其体内抗氧化酶的活性或表达量与重金属
Hg
浓度之间的效应关系，可作为监测环境污染的一项灵敏指标。抗氧化酶系被用作指示环境污染的早期预警，从而成为分子毒理学生物标志物研究的热点之一。然而，摇蚊幼虫在
Hg2+
的胁迫下，生物体内重要的抗氧化酶，如
CAT
、
POD
和
SOD
的活性如何，还需要进行科学验证。
红裸须摇蚊是摇蚊中的优势种，广泛地分布于我国的淡水环境中，在水生态系统食物链中占有重要的地位。

技术实现思路
：
本专利技术的目的是提供一种测定
Hg2+
浓度对红裸须摇蚊幼虫抗氧化酶活性的方法。
上述的目的通过以下的技术方案实现：
一种测定
Hg2+
浓度对红裸须摇蚊幼虫抗氧化酶活性的方法，其组成包括：试验材料和试验方法，以及数据处理方法，所述的试验材料采用红裸须摇蚊幼虫，所述的试验材料中试验用水使用蒸馏水，试验水温为
21.0
±
0.5
℃，
pH
为
7.0
±
0.5
，所述的试验材料中使用的
Hg2+
用分析纯
HgCl2
，配置浓度有六个处理组，分别是
0 mg/L
、
1.6 mg/L
、
2.4 mg/L
、
3.6 mg/L
、
5.4 mg/L
、
8.1mg/L
。
所述的测定
Hg2+
浓度对红裸须摇蚊幼虫抗氧化酶活性的方法，所述的试验方法是净水染毒法，所述的六个处理组每组设置三个平行样，容器是
500ml
烧杯，所述的试验方法中每个烧杯中放
50
个生理状态相似的红裸须摇蚊幼虫，所述的试验方法中每个烧杯中的红裸须摇蚊幼虫在
Hg2+
浸泡处理
6
小时、
24
小时、
48
小时、
72
小时后，分别取活性较好的摇蚊幼虫，置于
-20
℃冰箱保存，用作蛋白质，
CAT
、
POD
和
SOD
这三种抗氧化酶含量的测定。
所述的测定
Hg2+
浓度对红裸须摇蚊幼虫抗氧化酶活性的方法，所述的数据处理方法使用
SPSS16.0
统计软件对试验数据进行分析，数据用平均值±标准偏差表示，在同一时间段不同浓度下
Hg2+
对酶活性的影响用
SPSS
软件的单因素方差分析进行多重比较。
所述的测定
Hg2+
浓度对红裸须摇蚊幼虫抗氧化酶活性的方法，所述的试验材料中使用的
Hg2+
用分析纯
HgCl2
纯度
99.5%
。
本专利技术的有益效果：
1.
本专利技术用于测定汞离子对红裸须摇蚊幼虫抗氧化酶活性影响的方法，试验方法简单高效，根据试验得出的
CAT
、
POD
和
SOD
这三种生物抗氧化酶活性的变化规律，探究自然水体中重金属汞离子的污染程度。对自然环境水质监测有较好的服务价值，产生间接的经济价值。
本专利技术方法简单有效，便于人工操作，具有良好的稳定性，可以根据
CAT
、
POD
和
SOD
这三种生物抗氧化酶活性的变化规律，探究自然水体中重金属汞离子的污染程度。
本专利技术方法的试验过程在实验室条件下进行，对自然环境无污染，同时对自然环境水质监测有较好的服务价值，产生间接的经济价值。
具体实施方式：
实施例
1
：
一种测定
Hg2+
浓度对红裸须摇蚊幼虫抗氧化酶活性的方法，其组成包括：试验材料和试验方法，以及数据处理方法，其特征是：所述的试验材料采用红裸须摇蚊幼虫，所述的试验材料中试验用水使用蒸馏水，试验水温为
21.0
±
0.5
℃，
pH
为
7.0
±
0.5
，所述的试验材料中使用的
Hg2+
用分析纯
HgCl2本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种测定Hg2+浓度对红裸须摇蚊幼虫抗氧化酶活性的方法，其组成包括：试验材料和试验方法，以及数据处理方法，其特征是：所述的试验材料采用红裸须摇蚊幼虫，所述的试验材料中试验用水使用蒸馏水，试验水温为21.0±0.5℃，pH为7.0±0.5，所述的试验材料中使用的Hg2+用分析纯HgCl2，配置浓度有六个处理组，分别是0 mg/L、1.6 mg/L、2.4 mg/L、3.6 mg/L、5.4 mg/L、8.1mg/L。

【技术特征摘要】
1.一种测定Hg2+浓度对红裸须摇蚊幼虫抗氧化酶活性的方法，其组成包括：试验材料和试验方法，以及数据处理方法，其特征是：所述的试验材料采用红裸须摇蚊幼虫，所述的试验材料中试验用水使用蒸馏水，试验水温为21.0±0.5℃，pH为7.0±0.5，所述的试验材料中使用的Hg2+用分析纯HgCl2，配置浓度有六个处理组，分别是0 mg/L、1.6 mg/L、2.4 mg/L、3.6 mg/L、5.4 mg/L、8.1mg/L。2.根据权利要求1所述的测定Hg2+浓度对红裸须摇蚊幼虫抗氧化酶活性的方法，其特征是：所述的试验方法是净水染毒法，所述的六个处理组每组设置三个平行样，容器是500ml烧杯，所述的试验方法中每个烧杯中放50个生理状态相似的...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘曼红，陈菲，蔡艳，谢鹏，耿飞飞，孟瑶，聂英男，
申请(专利权)人：东北林业大学，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23