单糖单元为D-甘露糖的皂苷及其制备方法和在制药中的用途技术

本发明专利技术属于药物技术领域。提供了单糖单元为D-甘露糖的皂苷及其制备方法和在制药中的用途，具体涉及单糖单元为D-甘露糖的齐墩果酸皂苷和白桦脂酸皂苷及其制备方法和在制备抗流感病毒药物中的用途。本发明专利技术以天然产物齐墩果酸和白桦脂酸为原料，通过结构修饰首先在C-28位引入酯基，然后在C-3位引入α-构型的D-甘露糖得到具有抑制高致病流感病毒H5N1感染宿主细胞的单糖单元为D-甘露糖的皂苷，本发明专利技术进行了药理实验，结果表明，所述的皂苷类化合物对H5N1高致病流感病毒的侵入宿主细胞过程有明显的抑制作用，可进一步用于制备预防或治疗流感病毒的药物，以及制备与其它抗病毒药的联合用药以及包含它的药物组合物。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于药物
涉及单糖单元为D-甘露糖的皂苷及其制备方法和在制药中的用途，具体涉及单糖单元为D-甘露糖的齐墩果酸皂苷及白桦脂酸皂苷及其制备方法和在制备抗流感病毒药物中的用途。
技术介绍
流感病毒属于正黏液病毒科(Orthomyxoviridae)，是一种球形或丝状、有包膜的单股负链RNA病毒，基因组分为8个节段，这一特点使其在复制过程中极易发生基因重组，导致新病毒的出现。根据流感病毒核蛋白(NP)和基质蛋白(M1)抗原性的不同，可将其分为甲(A)、乙(B)和丙(C)型。甲型常以流行的形式出现，可在禽类和哺乳类宿主间传播，较易发生突变，具有强烈的传染性和致病性，是对人类威胁最大的亚型；乙型常造成局部爆发，可感染人类和海豹、猪等；丙型则多散发，是对人类危害较小的非临床病原体。甲型流感病毒外膜上镶嵌着3种重要的膜蛋白，分别为血凝素(hemagglutinin,HA)、神经氨酸酶(neuraminidase,NA)和基质蛋白(M2)。依据HA和NA抗原性特性的不同，甲型流感病毒可进一步被分为16个H(H1-H16)亚型和9个N(N1-N2)亚型，经组合后有100多种亚型的病毒株。甲型流感病毒还可以发生变异，进而感染其它物种(包括人类)。H5N1高致病流感病毒即是如此，1997年在中国香港首次证实了H5N1高致病流感病毒感染人类的病例，说明该病毒已具备以人为宿主的跨种属传播的能力。WHO的数据显示，2003-2013年我国发生45例H5N1禽流感，四季均有发生，以11月到次年2月为主，5月也是一个发病高峰(http://www.who.int/influenza/human_animal_interface/Influenza_Summary_IRA_HA_interface_13Mar13.)。2013年在中国又出现了H7N9流感病毒，截止到2013年6月2日，已经确诊132人，死亡38人，康复77人。死亡率达28.8％，目前为止还没有有效的疫苗，因此开发新型、高效、低毒、高特异性和用药方便的抗流感病毒药物迫在眉睫。目前，临床上针对甲型流感病毒的药物主要有两个靶点：M2离子通道抑制剂和神经氨酸酶抑制剂。前者包括有Amantadine和Rimantadine，后者包括Oseltamivir和Zanamivir等(J.Clin.Virol.30,(2004):115-133)。但由于流感病毒的高变异性，目前已经对所有M2离子通道抑制剂产生耐药性(自2007年起，美国FDA已经禁止这类药物用作病毒性流感治疗药物)；因而神经氨酸酶抑制剂几乎是唯一一类临床用药,但自2006年起，在泰国和越南出现了对该类药物耐药的H5N1高致病流感病毒株(NipponRinsho.64,(2006):1845-1852；AntiviralRes.73(2007):228-231)。同时，还是由于流感病毒的高变异性，目前尚无一劳永逸的针对流感病毒的疫苗。血凝素蛋白(HA)是流感病毒表面的糖蛋白，由HA1和HA2两个亚基组成。其中HA1亚基与靶细胞膜上的唾液酸受体结合，介导病毒进入细胞质，并被包裹在包体内；HA2为跨膜亚基，介导病毒膜与包体内膜的融合，是病毒基因进入宿主细胞并进行复制的关键分子。因此，若能在这个环节上阻断流感病毒的入侵，则可以有效地进行预防和治疗。本专利技术即针对此环节，在前期发现的结构复杂的薯蓣皂苷和熊果酸皂苷的基础上，进行了深入的构效关系研究和结构改造，发现了两个结构简单的齐墩果酸和白桦脂酸皂苷有抑制高致病流感病毒H5N1感染宿主细胞的作用。
技术实现思路
本专利技术目的在于提供新的单糖单元为D-甘露糖的皂苷及其制备方法和在制药中的用途，具体涉及单糖单元为D-甘露糖的齐墩果酸皂苷和白桦脂酸皂苷及其制备方法和在制备抗流感病毒药物中的用途。本专利技术以齐墩果酸和白桦脂酸作为原料，合成出具有抑制高致病流感病毒H5N1感染宿主细胞的单糖单元为D-甘露糖的皂苷，其包括齐墩果酸皂苷和白桦脂酸皂苷。本专利技术所述的皂苷，其特征在于，所述皂苷的单糖单元为D-甘露糖，包括如结构通式(I)和(II)所示的齐墩果酸皂苷和白桦脂酸皂苷，其中，R1为C1-C18烷氧基；单糖通过α-糖苷键与齐墩果酸和白桦脂酸的C-3链接；本专利技术所述的皂苷类化合物以齐墩果酸和白桦脂酸作为原料，按式(I)反应路线，通过下述步骤制备：(a)齐墩果酸或白桦脂酸与碘甲烷或其他醇反应，在C-28引入酯基；(b)分别将齐墩果酸酯和白桦脂酸酯的3β-OH与糖基供体反应引入α-甘露糖单元；(c)在CH3ONa/CH3OH条件下脱除糖单元上的酰基保护基分别得到3β-O-α-甘露糖基齐墩果酸酯和3β-O-α-D-甘露糖基白桦脂酸酯。本专利技术中，D-甘露糖基供体优选乙酰基、苯甲酰基、叔戊酰基为羟基保护基，甘露糖C-1活化基团优选三氯乙酰亚胺酯、乙硫苷、苯硫苷、对-甲苯硫苷；本专利技术中，构建α-D-甘露糖苷键的路易斯酸催化剂优选C3-C9的卤代酰胺、C1-C6的氟代烃基磺酸、C2-C8的硅基氟代烃基磺酸酯、C1-C6的氟代烃基磺酸银、三氟化硼-乙醚络合物或三氟化硼-乙醚混合物；本专利技术中，糖苷化反应中的有机溶剂优选C1-C4的氯代烷烃、甲苯或乙醚；本专利技术中，淬灭剂优选三甲胺、三乙胺或硫代硫酸钠；本专利技术中，分子筛优选型硅铝酸盐分子筛；本专利技术中，柱层析纯化中洗脱用的溶剂优选石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、三氯甲烷、甲醇、正己烷或环己烷中一种或多种的混合物。本专利技术中，脱保护基反应中极性溶剂优选四氢呋喃、甲醇、乙醇、二氯甲烷、水中的一种或多种的混合物；本专利技术中，重结晶纯化中的溶剂优选三氯甲烷、C1-C4的烷基醇、乙酸乙酯、丙酮、正己烷、石油醚、环己烷、二氯甲烷、水中一种或多种的混合物。本专利技术进行了药理实验，结果表明，所述的皂苷类化合物对H5N1高致病流感病毒的侵入宿主细胞过程有明显的抑制作用，可进一步用于制备预防或治疗流感病毒的药物，以及制备与其它抗病毒药的联合用药以及包含它的药物组合物。具体实施方式下面用实施例进一步说明本申请，但这并不意味着对本专利技术的限制。本专利技术采用的合成原料齐墩果酸和白桦脂酸为市售商品。实施例1：制备齐墩果酸-28-甲基酯将齐墩果酸(456mg,1.0mmol)溶于5mLDMF中，加入碳酸钾(414mg,3.0mmol)和碘甲烷(180μL,3.0mmol)，50℃条件下反应7h，TLC检测原料无剩余，减压浓缩除去大部分DM本文档来自技高网...

【技术保护点】
单糖单元为D‑甘露糖的皂苷，其特征在于，所述皂苷的单糖单元为D‑甘露糖，包括如结构通式(I)和(II)所示的齐墩果酸皂苷和白桦脂酸皂苷，其中，R1为C1‑C18烷氧基；单糖通过α‑糖苷键与齐墩果酸和白桦脂酸的C‑3链接；

【技术特征摘要】
1.单糖单元为D-甘露糖的皂苷，其特征在于，所述皂苷的单糖单元为D-
甘露糖，包括如结构通式(I)和(II)所示的齐墩果酸皂苷和白桦脂酸皂苷，
其中，R1为C1-C18烷氧基；单糖通过α-糖苷键与齐墩果酸和白桦脂酸的
C-3链接；
2.权利要求1所述的单糖单元为D-甘露糖的皂苷的制备方法，其特征在于，
以齐墩果酸和白桦脂酸作为原料，按式(I)反应路线，通过下述步骤制备：
(a)齐墩果酸或白桦脂酸与碘甲烷或其他醇反应，在C-28引入酯基；
(b)分别将齐墩果酸酯和白桦脂酸酯的3β-OH与糖基供体反应引入α-甘
露糖单元；
(c)在CH3ONa/CH3OH条件下脱除糖单元上的酰基保护基分别得到
3β-O-α-甘露糖基齐墩果酸酯和3β-O-α-D-甘露糖基白桦脂酸酯。
3.如权利要求2的制备方法，其特征在于，D-甘露糖基供体选自乙酰基、
苯甲酰基、叔戊酰基为羟基保护基；甘露糖C-1活化基团选自三氯乙酰亚胺酯、
乙硫苷、苯硫苷或对-甲苯硫...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘国运，郭颖，李英霞，任素梅，高顶顶，
申请(专利权)人：复旦大学，中国医学科学院药物研究所，
类型：发明
国别省市：上海;31