一种与胆管癌相关的分子标记物制造技术

本发明专利技术公开了一种与胆管癌相关的分子标记物，更具体地涉及LY6H基因在胆管癌诊断和治疗中的作用，属于基因新用途技术领域。本发明专利技术公开了LY6H基因在制备诊断胆管癌的产品中的应用，同时公开了LY6H基因在制备治疗胆管癌的药物中的应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，具体地涉及LY6H基因在胆管癌诊断、治疗中的用途。
技术介绍
胆管癌是一种来源于肝内或肝外胆管上皮的恶性肿瘤，发生率较低，约占所有人类恶性肿瘤的2％以下，消化道肿瘤的3％左右，但恶性程度很高，五年生存率大约5％。该病发病没有悬殊的性别差异，男性发病率约为女性的1.5倍。全世界胆管癌病人的平均发病年龄约在50岁，西方人平均发病年龄大于65岁。胆管癌的发病率在世界范围内差异很大，其中东南亚发病率最高，非洲发病率最低。近年来，胆管癌的发病率有所提高，但是其高恶性程度以及发病机制还不确定。早期预防、早期发现、早期治疗是提高人胆管癌手术根治率和5年生存率的关键。胆管癌预后很差，5年生存率大约在5％。胆管癌对放疗化疗均不敏感，唯一治愈性治疗为外科手术切除或肝移植，但大多数的病例在确诊时都已是晚期，失去了切除的机会，病程多在12个月内，尤其是确诊后的三个月内死亡率极高。胆管癌的姑息性治疗可以有旁路内引流术、置管引流术、支撑管放置术、光动力疗法等，对晚期胆管癌的生活质量有所改善。早期外科手术可以提高胆管癌的生存率，但是目前仍然缺乏一种特异的和敏感的诊断方法。
技术实现思路
为了弥补现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种可用于胆管癌早期诊断的分子标志物。相比传统的胆管癌的诊断方法，使用基因标志物来诊断胆管癌的具有及时性、特异性和灵敏性，从而使患者在癌症早期就能知晓癌症风险，针<br>对风险高低，采取相应的预防和治疗措施。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术提供了一种LY6H基因及其表达产物在制备诊断胆管癌的产品中的应用。进一步，上面所提到的诊断产品包括：通过RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交或芯片检测LY6H基因及其表达产物的表达水平以诊断胆管癌的产品。进一步，所述用RT-PCR诊断胆管癌的产品至少包括一对特异扩增LY6H基因的引物；所述用实时定量PCR诊断胆管癌的产品至少包括一对特异扩增LY6H基因的引物；所述用免疫检测诊断胆管癌的产品包括：与LY6H蛋白特异性结合的抗体；所述用原位杂交诊断胆管癌的产品包括：与LY6H基因的核酸序列杂交的探针；所述用芯片诊断胆管癌的产品包括：蛋白芯片和基因芯片；其中，蛋白芯片包括与LY6H蛋白特异性结合的抗体，基因芯片包括与LY6H基因的核酸序列杂交的探针。优选地，所述产品包括芯片、试剂盒。本专利技术提供了一种诊断胆管癌的产品，所述的产品能够通过检测胆管组织中LY6H基因的表达水平来诊断胆管癌。进一步，所述产品包括芯片、或试剂盒。其中，所述芯片包括基因芯片、蛋白质芯片；所述基因芯片包括固相载体以及固定在固相载体的寡核苷酸探针，所述寡核苷酸探针包括用于检测LY6H基因转录水平的针对LY6H基因的寡核苷酸探针；所述蛋白质芯片包括固相载体以及固定在固相载体的LY6H蛋白的特异性抗体；所述试剂盒包括基因检测试剂盒和蛋白免疫检测试剂盒；所述基因检测试剂盒包括用于检测LY6H基因转录水平的试剂；所述蛋白免疫检测试剂盒包括LY6H蛋白的特异性抗体。进一步，所述试剂包括使用RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交或芯片方法检测LY6H基因表达水平过程中所需的试剂。优选地，所述试剂包括针对LY6H基因的引物和/或探针。根据SEQIDNO.2所示的核苷酸序列信息设计出可以用于检测LY6H基因表达水平的引物和探针。与LY6H基因的核酸序列杂交的探针可以是DNA、RNA、DNA-RNA嵌合体、PNA或其它衍生物。所述探针的长度没有限制，只要完成特异性杂交、与目的核苷酸序列特异性结合，任何长度都可以。所述探针的长度可短至25、20、15、13或10个碱基长度。同样，所述探针的长度可长至60、80、100、150、300个碱基对或更长，甚至整个基因。由于不同的探针长度对杂交效率、信号特异性有不同的影响，所述探针的长度通常至少是14个碱基对，最长一般不超过30个碱基对，与目的核苷酸序列互补的长度以15-25个碱基对最佳。所述探针自身互补序列最好少于4个碱基对，以免影响杂交效率。进一步，所述LY6H蛋白的特异性抗体包括单克隆抗体、多克隆抗体。所述LY6H蛋白的特异性抗体包括完整的抗体分子、抗体的任何片段或修饰，例如，嵌合抗体、scFv、Fab、F(ab’)2、Fv等。只要所述片段能够保留与LY6H蛋白的结合能力即可。用于蛋白质水平的抗体的制备时本领域技术人员公知的，并且本专利技术可以使用任何方法来制备所述抗体。本专利技术还提供了LY6H基因及其表达产物在制备治疗胆管癌的药物中的应用。一方面，本专利技术所述的“治疗胆管癌的药物”包括能够括抑制胆管癌细胞生长、促进胆管癌细胞凋亡、抑制胆管癌细胞粘附、抑制胆管癌细胞迁移和侵袭。另一方面，本专利技术所述的“治疗胆管癌的药物”包含LY6H基因和/或其表达产物的抑制剂。所述抑制剂包括抑制LY6H基因表达的物质、抑制LY6H基因表达产物稳定性的物质、和/或抑制LY6H基因表达产物活性的物质。进一步，本专利技术所述的治疗胆管癌的药物包括：通过干扰RNA抑制LY6H基因表达的双链核糖核酸，或基于LY6H抗原蛋白的肿瘤疫苗，或用于抑制LY6H蛋白活性的蛋白质。本专利技术还提供了一种用于治疗胆管癌的药物，所述药物包含LY6H基因和/或其表达产物抑制剂。所述抑制剂包括抑制LY6H基因表达的物质、抑制LY6H基因表达产物稳定性的物质、和/或抑制LY6H基因表达产物活性的物质。进一步，本专利技术所述抑制剂包括：通过干扰RNA抑制LY6H基因表达的双链核糖核酸，或基于LY6H抗原蛋白的肿瘤疫苗、或用于抑制LY6H蛋白活性的蛋白质。本专利技术还提供了上述LY6H基因和/或其表达产物抑制剂在制备治疗胆管癌药物中的应用。在本专利技术中，所述RNA干扰(RNAinterference，RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA(double-strandedRNA，dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达，该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的基因治疗领域。以细胞为基础的RNAi筛选在功能基因学研究方面具有许多优势，主要表现在大多数细胞类型都能使用RNAi方法，并且相对较容易下调或沉默任何目的基因的表达。为了确保LY6H基因能够被高效剔除或沉默，根据LY6H基因的mRNA序列设计了s本文档来自技高网...

【技术保护点】
LY6H基因及其表达产物在制备诊断胆管癌的产品中的应用。

【技术特征摘要】
1.LY6H基因及其表达产物在制备诊断胆管癌的产品中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品包括：通过RT-PCR、
实时定量PCR、免疫检测、原位杂交或芯片检测LY6H基因及其表达产物的表达
水平以诊断胆管癌的产品。
3.一种诊断胆管癌的产品，其特征在于，所述产品能够通过检测胆管组织
中LY6H基因的表达水平来诊断胆管癌。
4.根据权利要求3所述的产品，其特征在于，所述产品包括芯片、或试剂
盒。其中，所述芯片包括基因芯片、蛋白质芯片；所述基因芯片包括固相载体以
及固定在固相载体的寡核苷酸探针，所述寡核苷酸探针包括用于检测LY6H基因
转录水平的针对LY6H基因的寡核苷酸探针；所述蛋白质芯片包括固相载体以及
固定在固相载体的LY6H蛋白的特异性抗体...

【专利技术属性】
技术研发人员：高倩倩，杨承刚，边洋，
申请(专利权)人：北京泱深生物信息技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11