一种葱鳞葡萄孢菌的快速检测方法及应用技术

本发明专利技术建立了一种针对葱鳞葡萄孢菌进行快速检测的特异性分子标记引物和检测方法，该方法通过PCR反应能特异性扩增出属于葱鳞葡萄孢菌的特征性产物，大小为301bp。本发明专利技术适用于从田间到采后的各个环节，能够实现对葱蒜类蔬菜的主要病害——葱鳞葡萄孢菌进行快速可靠的诊断和鉴定，为葱蒜类蔬菜的病害预警、防治，并为该类作物采后的安全贮运提供保障。本发明专利技术还提出了一种包含所述用于快速检测葱鳞葡萄孢菌的特异性分子标记引物的试剂盒，以及将所述检测方法用于葱鳞葡萄孢菌的鉴别或葱蒜类蔬菜作物的田间和采后灰霉病的诊断和预警中的应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于作物病害诊断及防治
，具体涉及一种快速检测葱属类作物主 要病原菌葱鳞葡萄孢菌（Botrytissquamosa)的快速检测方法及应用。 技术背景 葱蒜类蔬菜是具有特殊气味的一类作物，主要包括葱、大蒜、蒜薹、蒜苗、洋葱、韭 菜等。富含糖分、维生素以及多种矿物质，并具有杀菌作用，在东西方饮食文化中都占据重 要地位。然而葱蒜类蔬菜无论在田间栽培还是采后储运过程中，都容易受到病害的威胁，其 中一种最主要的真菌性病原为葱鳞葡萄孢菌，其拉丁学名为：BotrytissquamosaWalker， 该菌属半知菌亚门葡萄孢属，在葱蒜类蔬菜的主要种植产区如亚洲、欧洲、南美洲及北美洲 造成重大的经济损失。以我国的特色蔬菜蒜薹为例，在采收以后由B.squamosa引起的灰霉 病，每年可导致20-30%的损失。B.squamosa主要侵染葱蒜类蔬菜的叶片。该菌的菌丝及分子孢子可随病残体越 冬；或以菌核形态在土壤中越冬越夏，并随种苗调运传播，当遇有较低的温度和较高的湿度 条件时即可发生和流行。该菌的分生孢子可在3-27°C范围内由菌核产生，而且一旦侵染 寄主便会大量产生分生孢子，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种葱鳞葡萄孢菌的快速检测方法，其特征在于，所述方法主要包括以下步骤：(1)设计检测所述葱鳞葡萄孢菌的特异性引物为：采用RAPD和SCAR相结合的方法，设计一对能够特异性检测的引物，所述引物如以下SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示：上游引物5’‑CTCCGAGGAATGTAGCAATG‑3'  (SEQ ID NO.1)；下游引物5'‑CTCAAAGGCCAACCATACAG‑3'  (SEQ ID NO.2)；(2)提取对待检样品的总DNA；(3)以待检样品DNA为模板，用所述葱鳞葡萄孢菌特异性引物进行PCR聚合酶链式反应；(4)将得到的PCR产物经2％琼脂糖凝胶电泳，经Go...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：朱品宽，刘丽影，许玲，
申请(专利权)人：华东师范大学，
类型：发明
国别省市：上海;31