一种杂质吸附型净化柱及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种杂质吸附型净化柱及其制备方法与应用。本发明专利技术净化由柱管和从所述管柱的进液口至所述管柱的出液口依次设于所述管柱内的上筛板、混合型填料和下筛板组成；所述混合型填料由酸性氧化铝填料与N-丙基乙二胺组成。本发明专利技术净化柱应用在纯水提取用于高效液相色谱串联质谱法测定的谷物和/或谷物加工副产品中霉菌毒素。本发明专利技术对流过净化柱的液体待测样品中霉菌毒素进行选择性吸附，提取的洗脱液为纯水，不添加有机溶剂，从而使干扰质谱检测的脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其衍生物杂质被吸附在净化柱上，经净化的流出液再经微孔滤膜过滤后，可直接用于液相色谱串联质谱仪进行上机测定。

【技术实现步骤摘要】
一种杂质吸附型净化柱及其制备方法与应用
本专利技术涉及一种杂质吸附型净化柱及其制备方法与应用，属于饲料质量安全检测领域。
技术介绍
脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)是由镰刀菌属真菌产生的一种霉菌毒素，是玉米、小麦等谷物中污染最为严重的霉菌毒素之一，对人和动物均能造成不同程度的健康危害。近年来的研究发现，谷物污染的DON除其原形外，还往往伴有其乙酰化衍生物(AC-DONs)，主要包括3-乙酰化脱氧雪腐镰刀菌烯醇(3-AC-DON)和15-乙酰化脱氧雪腐镰刀菌烯醇(15-AC-DON)，这些衍生物能够在人或动物体内转化成DON。谷物中DON的测定方法很多，比如酶联免疫法(ELISA)、液相色谱(HPLC)法和高效液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)法等。其中，LC-MS/MS法具有灵敏、准确、抗干扰能力强的优势，并且能够同时测定DON和AC-DONs。目前，配合LC-MS/MS检测DON和AC-DONs的样品前处理方法，主要包括免疫亲和柱(IAC)、固相萃取(SPE)、和多功能净化柱(MFC)等。但是，IAC价格很高，操作步骤繁琐，SPE和MFC虽然成本较低，但需要消耗大量有机溶剂，会对环境和操作人员都产生潜在的危害，而且操作步骤比较复杂。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种杂质吸附型净化柱及其制备方法与应用，本专利技术用于提取谷物中脱氧雪腐镰刀菌烯醇和/或所述脱氧雪腐镰刀菌烯醇的乙酰化衍生物时，采用纯水提取，不添加有机溶剂提取，无污染且环境友好。本专利技术提供的杂质吸附型净化柱，该净化柱的填料是由酸性氧化铝填料与N-丙基乙二胺组成的混合型填料。上述的净化柱中，该净化柱由柱管和从所述柱管的进液口至所述柱管的出液口依次设于所述柱管内的上筛板、所述填料和下筛板组成。上述的净化柱中，所述上筛板和所述下筛板的材质均为聚乙烯；所述上筛板和所述下筛板的孔径均可为5～10μm，具体可为10μm；所述柱管的内径可为5～12mm，具体可为10mm，长度可为50～60mm，具体可为50mm；所述酸性氧化铝填料与所述N-丙基乙二胺的质量比可为1:1～3；所述酸性氧化铝的粒径为100～200目，具体可为150目；所述N-丙基乙二胺的粒径为40～60μm；所述混合型填料的填充量可为400～500mg，具体可为500mg。本专利技术还提供了上述的净化柱的制备方法，包括如下步骤：1)将N-丙基乙二胺和酸性氧化铝混合，得到混合型填料；2)在所述管柱的出液口端，安装所述下筛板，然后向所述管柱内加入所述混合型填料，再于所述管柱的进液端的所述混合型填料上安装上筛板，即得到所述杂质吸附型净化柱。上述的方法中，所述上筛板和所述下筛板的安装方式均为过盈配合。本专利技术所述的净化柱在纯水提取用于高效液相色谱串联质谱法测定的谷物和/或谷物加工副产品中霉菌毒素的应用。上述的应用中，所述谷物为玉米、小麦、大麦或稻米；所述谷物加工副产品为玉米胚芽粕、玉米酒精糟、小麦麸或米糠；所述霉菌毒素为脱氧雪腐镰刀菌烯醇、3-乙酰化脱氧雪腐镰刀菌烯醇和15-乙酰化脱氧雪腐镰刀菌烯醇中至少一种。本专利技术进一步提供了所述净化柱提取用于高效液相色谱串联质谱法测定的谷物和/或谷物加工副产品中霉菌毒素的方法，包括如下步骤：将待测谷物和/或谷物加工副产品中加入蒸馏水，震荡超声，然后离心处理取上清液；将所述上清液通过所述净化柱的进液口依次通过所述上筛板、所述混合型填料和所述下筛板，然后从所述净化柱的出液口流出，经与净化柱的出液口连接的微孔滤膜过滤，得到用于高效液相色谱串联质谱法谷物中霉菌毒素。上述的方法中，所述谷物和/或谷物加工副产品的粒径可为20～40目；所述谷物和/或谷物加工副产品与所述蒸馏水的质量体积比可为1g：4～5mL，具体可为1g：4mL；所述上清液的体积可为1～1.5mL，具体可为1mL；所述上清液在所述净化柱内的流速可为1～1.2mL/min，采用柱塞杆施压使所述上清液通过所述净化柱和所述微孔滤膜。上述的方法中，所述微孔滤膜的直径可为13～17mm，具体可为13mm，孔径可为0.22μm。本专利技术具有以下优点：本专利技术的净化柱利用混合填料的吸附原理，对流过净化柱的液体待测样品中杂质进行选择性吸附，提取的洗脱液为纯水，不添加有机溶剂，从而使这些干扰质谱检测的DON及其衍生物杂质被吸附在净化柱上，经净化的流出液再经微孔滤膜过滤后，可直接用于液相色谱串联质谱仪进行上机测定。本专利技术的杂质吸附型净化柱及其应用方法的优点在于制作方便、操作简单、成本低廉、净化快速、益于环保、适用范围广等特点。附图说明图1为本专利技术杂质吸附型净化柱的结构示意图。图中标记如下：1管柱；2上筛板；3混合型填料；4下筛板；5出液管。图2为实施例2中空白玉米基质匹配标准溶液的定量离子色谱图(浓度为20ng/mL)。具体实施方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。下述实施例中所采用的标准品：脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol，DON)、15-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇(15-AcetylDeoxynivalenol，15-ACDON)和3-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇(3-AcetylDeoxynivalenol，3-ACDON)均为sigma公司产品，纯度＞99％。下述实施例中所采用的柱管(内径10mm，长度50mm，货号：AZ003)、筛板(孔径10μm，货号：AS003-A)、酸性氧化铝(粒度：150目，货号：AC36570025P2110)、N-丙基乙二胺(粒度：40-60μm，货号：CP0007)、微孔滤膜(直径13mm，孔径0.22μm，货号：AS021320-PT)均购自天津艾杰尔科技有限公司。实施例1、杂质吸附型净化柱的制备一、混合型填料的配制1、准确称取酸性氧化铝填料100g；2、准确称取N-丙基乙二胺100g；3、将上述称量好的酸性氧化铝和N-丙基乙二胺置于混合器中充分混合均匀，形成混合型填料。二、杂质吸附型净化柱的制备1、取一内径为10mm的柱管1；2、通过过盈连接的方式置一聚乙烯材质的下筛板4于柱管1的出液口5一端；3、向柱管1中加入500mg上述混合型填料3；4、通过过盈连接的方式置一聚乙烯材质的上筛板2于混合型填料3上方，即柱管1的进液口(图中未标)端，并将填料压实，即得到杂质吸附型净化柱，结构如图1所示。实施例2、杂质吸附型净化柱在玉米中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其乙酰化衍生物检测中的应用一、方法性能考察1、标准溶液制备标准品：脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol，DON)、15-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇(15-AcetylDeoxynivalenol，15-ACDON)和3-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇(3-AcetylDeoxynivalenol，3-ACDON)。准确称取上述标准品，用甲醇溶解并定容，配制成1000μg/mL的标准储备液；准确移取各标准储备液1mL，混合于100mL容量瓶中，用甲醇定容，配制成10μg/mL的混合标准工作液。2、样品前处理称取5.000±0.010g玉米粉样品(粒径20～40目)于50mL塑料离心管内，加入20mL蒸馏水，振荡1min，超声20min，静置10min，移本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种杂质吸附型净化柱，其特征在于：该净化柱的填料是由酸性氧化铝填料与N‑丙基乙二胺组成的混合型填料。

【技术特征摘要】
1.一种杂质吸附型净化柱在纯水提取用于高效液相色谱串联质谱法测定的谷物和/或谷物加工副产品中霉菌毒素的应用；所述杂质吸附型净化柱的填料是由酸性氧化铝填料与N-丙基乙二胺组成的混合型填料；所述霉菌毒素为脱氧雪腐镰刀菌烯醇、3-乙酰化脱氧雪腐镰刀菌烯醇和15-乙酰化脱氧雪腐镰刀菌烯醇中至少一种。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述净化柱由柱管和从所述柱管的进液口至所述柱管的出液口依次设于所述柱管内的上筛板、所述填料和下筛板组成。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述净化柱由包括如下步骤的制备方法制备得到：1)将N-丙基乙二胺和酸性氧化铝混合，得到混合型填料；2)在所述柱管的出液口端，安装所述下筛板，然后向所述柱管内加入所述混合型填料，再于所述柱管的进液端的所述混合型填料上安装上筛板，即得到所述杂质吸附型净化柱。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述上筛板和所述下筛板的安装方式均为过盈配合。5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述上筛板和所述下筛板的材质均为聚乙烯；所述上筛板和所述下筛板的孔径均为5～10μm；所述柱管的内径为5～12mm，长度为50～60mm；所述酸性氧化铝填料与所述N-丙基乙二胺的质量比为1:1～3；所述酸性氧化铝的粒径为100～200目；所述N-丙基乙二胺的粒径为40～60μm；所述混合型填料的填充量为400～500mg。6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述谷物为玉米、小麦、大麦或稻米；所述谷物加工副产品为玉米胚芽粕、玉米酒精糟、小麦麸或米糠。7.一种杂质吸附型净化柱提取用于高效液相色谱...

【专利技术属性】
技术研发人员：王瑞国，苏晓鸥，王培龙，张维，李阳，索德成，
申请(专利权)人：中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11