【技术实现步骤摘要】
本申请涉及糖皮质激素受体激动剂或拮抗剂筛选，具体而言，涉及一种酵母菌及其应用、筛选糖皮质激素受体激动剂或拮抗剂的方法。
技术介绍
1、糖皮质激素受体(gr)是一种配体依赖的转录活化因子，属于核受体超家族中的成员之一，其配体主要是皮质醇和其他糖皮质激素。糖皮质激素(gc)已经成为临床上常用的一种激素，参与调节机体的生长发育、新陈代谢和免疫功能，主要发挥抗炎和免疫抑制作用，因此成为人体免疫系统疾病、呼吸系统疾病、消化系统疾病、皮肤疾病等治疗方案中的重要成员。
2、gr在体内几乎每个细胞中都有表达，gc作为一种脂溶性磷脂类物质，通过被动扩散经细胞膜进入胞内，与gr结合形成激素受体复合物，然后易位进入细胞核内，与靶基因启动子区域的激素反应元件结合，从而启动基因转录并合成各种蛋白质，如脂皮质素-1、黏附分子、核酸内切酶、神经内切酶、血管紧张素转化酶、抗炎或促炎蛋白等，产生生理及药理作用。
3、目前，评价物质对gr的激动或拮抗活性的细胞模型较少，主要是一些以哺乳动物细胞为模型的体外筛查方法，这些模型耐受性与稳定性较低，检测方法具有较高的技术门槛，操作繁琐，且检测成本较高。
技术实现思路
1、本申请的目的在于提供一种酵母菌及其应用、筛选糖皮质激素受体激动剂或拮抗剂的方法，其旨在改善现有的用于评价物质对糖皮质激素受体的激动或拮抗活性的细胞模型的灵敏度较低且检测稳定性较差的技术问题。
2、第一方面，本申请提供一种酵母菌，该酵母菌的命名为blyhgrs，该酵母菌的保
3、生物材料：blyhgrs，分类命名：酿酒酵母saccharomyces cerevisiae，于2023年09月07日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(cgmcc)，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为cgmcc no.28380。
4、本申请提供的酵母菌无需激发光源激发、无需添加酵母细胞裂解液、无需额外添加外源性底物且无需提供特殊的试验场所和条件，即能够自主、持续且稳定地产生发光响应信号，可以实现动态监测物质对糖皮质激素受体的激动或拮抗活性的变化，可快速、准确、可靠、直观地评价物质对糖皮质激素受体的激动或拮抗活性，灵敏度高、特异性高、成本低且操作简单易行。
5、第二方面，本申请提供一种上述第一方面提供的酵母菌在筛选糖皮质激素受体激动剂或糖皮质激素受体拮抗剂中的应用。
6、将上述第一方面提供的酵母菌用于筛选糖皮质激素受体激动剂或糖皮质激素受体拮抗剂，酵母菌无需激发光源激发、无需添加酵母细胞裂解液、无需额外添加外源性底物且无需提供特殊的试验场所和条件，即能够自主、持续且稳定地产生发光响应信号，可以实现动态监测物质对糖皮质激素受体的激动或拮抗活性的变化，可快速、准确、可靠、直观地评价物质对糖皮质激素受体的激动或拮抗活性，灵敏度高、特异性高、成本低且操作简单易行。
7、第三方面，本申请提供一种筛选糖皮质激素受体激动剂的方法，该方法包括：将上述第一方面提供的酵母菌的菌液与待筛选物质混合，得到混合体系；振荡孵育混合体系后，检测混合体系的发光信号强度；通过对比混合体系的发光信号强度与菌液的发光信号强度的大小关系，判断待筛选物质是否为糖皮质激素受体激动剂。
8、本申请提供的筛选糖皮质激素受体激动剂的方法中，采用上述第一方面提供的酵母菌，酵母菌无需激发光源激发、无需添加酵母细胞裂解液、无需额外添加外源性底物且无需提供特殊的试验场所和条件，即能够自主、持续且稳定地产生发光响应信号，通过对比含有待筛选物质和酵母菌的体系的发光信号强度与酵母菌本身的发光信号强度的大小关系，即可快速、有效且准确地判断出待筛选物质是否可作为糖皮质激素受体激动剂。若含有待筛选物质和酵母菌的体系的发光信号强度大于酵母菌本身的发光信号强度，则表明该待筛选物质为糖皮质激素受体激动剂。因此，本申请提供的筛选糖皮质激素受体激动剂的方法可快速、准确、可靠、直观地评价物质对糖皮质激素受体的激动或拮抗活性，灵敏度高、特异性高、成本低且操作简单易行。
9、第四方面，本申请提供一种筛选糖皮质激素受体拮抗剂的方法，该方法包括：将上述第一方面提供的酵母菌的菌液、已知的糖皮质激素受体激动剂以及待筛选物质混合，得到混合体系；振荡孵育混合体系后，检测混合体系的发光信号强度；通过对比混合体系的发光信号强度与已知的糖皮质激素受体激动剂的发光信号强度的大小关系，判断待筛选物质是否为糖皮质激素受体拮抗剂。
10、本申请提供的筛选糖皮质激素受体拮抗剂的方法中，采用上述第一方面提供的酵母菌，酵母菌无需激发光源激发、无需添加酵母细胞裂解液、无需额外添加外源性底物且无需提供特殊的试验场所和条件，即能够自主、持续且稳定地产生发光响应信号，通过对比含有待筛选物质、已知的糖皮质激素受体激动剂和酵母菌的体系的发光信号强度与已知的糖皮质激素受体激动剂本身的发光信号强度的大小关系，即可快速、有效且准确地判断出待筛选物质是否可作为糖皮质激素受体拮抗剂。若含有待筛选物质、已知的糖皮质激素受体激动剂和酵母菌的体系的发光信号强度小于已知的糖皮质激素受体激动剂本身的发光信号强度，则表明该待筛选物质为糖皮质激素受体拮抗剂。因此，本申请提供的筛选糖皮质激素受体拮抗剂的方法可快速、准确、可靠、直观地评价物质对糖皮质激素受体的拮抗活性，灵敏度高、特异性高、成本低、可实时监测且操作简单易行。
11、结合第四方面，在本申请可选的实施方式中，已知的糖皮质激素受体激动剂为地塞米松或皮质醇。地塞米松或皮质醇均对糖皮质激素受体表现出较高的激动活性，在与待筛选物质共同作用于本申请提供的酵母菌时，可以间接反应待筛选物质能否与激动剂(即地塞米松或皮质醇)竞争结合糖皮质激素受体从而产生拮抗活性，以筛选获得糖皮质激素受体拮抗剂。
12、结合第三方面或/和第四方面，在本申请可选的实施方式中，菌液的od600为0.08-0.15。
13、在上述技术方案中，与待筛选物质混合的菌液的od600为0.08-0.15时，有利于进一步提高检测物质对糖皮质激素受体的激动或拮抗活性的灵敏度、稳定性以及准确性。
14、结合第三方面或/和第四方面，在本申请可选的实施方式中，振荡孵育的温度为28-30℃。
15、在上述技术方案中，振荡孵育的温度在上述温度范围内，酵母菌具有较高的活性，有利于进一步提高检测物质对糖皮质激素受体的激动或拮抗活性的灵敏度、稳定性以及准确性。
16、结合第三方面或/和第四方面，在本申请可选的实施方式中，振荡孵育的时间为4-24h。
17、在上述技术方案中，振荡孵育的时间在上述时间范围内，有利于提高发光响应信号产生的稳定性，有利于进一步提高检测物质对糖皮质激素受体的激动或拮抗活性的灵敏度、稳定性以及准确性。
18、结合第三方面或/和第四方面，在本申请可选的实施方式中，振荡孵育的振荡转速为200本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种酵母菌，其特征在于，所述酵母菌的命名为BLYhGRS，所述酵母菌的保藏编号为CGMCC NO.28380。
2.如权利要求1所述的酵母菌在筛选糖皮质激素受体激动剂或糖皮质激素受体拮抗剂中的应用。
3.一种筛选糖皮质激素受体激动剂的方法，其特征在于，包括：将如权利要求1所述的酵母菌的菌液与待筛选物质混合，得到混合体系；振荡孵育所述混合体系后，检测所述混合体系的发光信号强度；通过对比所述混合体系的发光信号强度与所述菌液的发光信号强度的大小关系，判断所述待筛选物质是否为糖皮质激素受体激动剂。
4.一种筛选糖皮质激素受体拮抗剂的方法，其特征在于，包括：将如权利要求1所述的酵母菌的菌液、已知的糖皮质激素受体激动剂以及待筛选物质混合，得到混合体系；振荡孵育所述混合体系后，检测所述混合体系的发光信号强度；通过对比所述混合体系的发光信号强度与所述已知的糖皮质激素受体激动剂的发光信号强度的大小关系，判断所述待筛选物质是否为糖皮质激素受体拮抗剂。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述已知的糖皮质激素受体激动剂为地塞米松或皮质醇。>
6.根据权利要求3-5中任一项所述的方法，其特征在于，所述菌液的OD600为0.08-0.15。
7.根据权利要求3-5中任一项所述的方法，其特征在于，所述振荡孵育的温度为28-30℃。
8.根据权利要求3-5中任一项所述的方法，其特征在于，所述振荡孵育的时间为4-24h。
9.根据权利要求3-5中任一项所述的方法，其特征在于，所述振荡孵育的振荡转速为200-250rpm。
10.根据权利要求3-5中任一项所述的方法，其特征在于，所述菌液的制备方法包括：挑取所述酵母菌的单菌落于SD/(-Ura-Leu)培养液中，于28-30℃、200-250rpm振荡培养12-18h。
...【技术特征摘要】
1.一种酵母菌，其特征在于，所述酵母菌的命名为blyhgrs，所述酵母菌的保藏编号为cgmcc no.28380。
2.如权利要求1所述的酵母菌在筛选糖皮质激素受体激动剂或糖皮质激素受体拮抗剂中的应用。
3.一种筛选糖皮质激素受体激动剂的方法，其特征在于，包括：将如权利要求1所述的酵母菌的菌液与待筛选物质混合，得到混合体系；振荡孵育所述混合体系后，检测所述混合体系的发光信号强度；通过对比所述混合体系的发光信号强度与所述菌液的发光信号强度的大小关系，判断所述待筛选物质是否为糖皮质激素受体激动剂。
4.一种筛选糖皮质激素受体拮抗剂的方法，其特征在于，包括：将如权利要求1所述的酵母菌的菌液、已知的糖皮质激素受体激动剂以及待筛选物质混合，得到混合体系；振荡孵育所述混合体系后，检测所述混合体系的发光信号强度；通过对比所述混合体系的发光信号强度与所述已知的糖皮质激素受体激动剂的发...
【专利技术属性】
技术研发人员：黄苑，王瑞国，张维，
申请(专利权)人：中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所，
类型：发明
国别省市：
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