本发明专利技术涉及一种人IgG4抗体的吸附柱及其制备方法和用途，包括柱体，其特征在于：柱体的两端封闭，在柱体的两端封闭处各设有一连接管，在柱体的内腔设有吸附剂，所述吸附剂由配基与载体结合构成，配基为抗人IgG4抗体，载体为琼脂糖微球、聚苯乙烯微球或磁珠。所述柱体为圆柱体形状、椭圆柱形状或多边柱形状；先将柱体的一端封闭并在封闭处设置连接管，然后将吸附剂装入柱体的内腔，再将柱体的另一端封闭并在封闭处设置连接管，即制备成人IgG4抗体吸附柱。本发明专利技术通过利用人IgG4抗体吸附柱从人血中纯化人IgG4，或者人IgG4抗体吸附柱的再利用。具有高效、特异的纯化人IgG4抗体的特点，为IgG4的研究和应用奠定基础。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种人IgG4抗体的吸附柱及其制备方法和用途。属于医疗器械
技术介绍
免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)是血清中免疫球蛋白的主要部分(约占Ig的75％)，分为四个亚型：IgG1(60％-70％)、IgG2(15％-20％)、IgG3(5％-10％)、IgG4(4％-6％)，而各亚型的免疫学特性和功能存在差异(Shakib F.The human IgG subclasses:molecular analysis of structure,function and regulation.4th ed.Elsevier,2013)。IgG4是IgG抗体的四个亚型之一，含量虽少(成人：0.08-1.40g/L)，但最具生物学独特性：①IgG4铰链区(hinge region)的独特结构(Arch Biochem Biophys,2012,526(2):159-66)，决定了其显著缺乏激活补体C1q和结合FcγRs的能力(J Exp Med,1991,173(4):1025-8)，不能诱导显著的免疫应答；②IgG4可通过Fc-Fc结合其它IgG亚型，如IgG1、IgG2、IgG3(PloS one,2008,3(2):e1637)；以及通过与另一IgG4的Fab段交换形成新的Hybrid(杂合)IgG4，导致其单价有效，可阻止抗体形成免疫复合物(Science,2007,317(5844):1554-7)，推测这种作用模式有助于负调控炎症；③IgG4可竞争性抑制相同抗原特异性的IgE介导的嗜碱性粒细胞和肥大细胞活化，发挥抗过敏作用；④IgG4结合靶抗原的能力与其它亚型抗体无差异，因B淋巴细胞克隆在分化过程中，通过恒定区CH基因节段的重排，仅可引起免疫球蛋白类别转换，即识别抗原特异性不变(周光炎.免疫学原理.第三版.上海:科学出版社,2013)。最近研究发现，IgG4抗体作为一种“非致炎(non-inflammatory)”分子(Clin ExpImmunol,2015,181:191-206)，近年数个IgG4亚型的治疗性抗体已获FDA批准。但是如何纯化人IgG4抗体，尚未见相关专利。为此，需要设计一种人IgG4抗体的吸附柱，并具有高效、特异的纯化人IgG4抗体的特点。
技术实现思路
本专利技术的目的之一，是为解决现有技术中不能高效纯化人IgG4抗体的问题，提供一种人IgG4抗体吸的附柱。具有高效、特异的纯化人IgG4抗体的特点。具有高效纯化人IgG4抗体的特点。本专利技术的目的之二，是为了提供一种人IgG4抗体吸的附柱的制备方法。本专利技术的目的之三，是为了提供一种人IgG4抗体吸的附柱的用途。本专利技术的目的之一可以通过如下技术方案达到：一种人IgG4抗体的吸附柱，包括柱体，其特征在于：柱体的两端封闭，在柱体的两端封闭处各设有一连接管，在柱体的内腔设有吸附剂，所述吸附剂由配基与载体结合构成，配基为抗人IgG4抗体，载体为琼脂糖微球、聚苯乙烯微球或磁珠。本专利技术的目的之一还可以通过如下技术方案达到：作为一种优选方案，所述柱体呈圆柱体形状、椭圆柱形状或多边柱形状。作为一种优选方案，所述抗人IgG4抗体，可以为人抗人IgG4抗体、小鼠抗人IgG4抗体、兔抗人IgG4抗体、驴抗人IgG4抗体或羊抗人IgG4抗体中的一种或二种以上组合。作为一种优选方案，所述载体为氨基化或羧基化的琼脂糖微球，或者所述载体为氨基或羧基化的聚苯乙烯微球。作为一种优选方案，所述载体为氨基化或羧基化的磁珠。本专利技术的目的之二可以通过如下技术方案达到：一种人IgG4抗体的吸附柱的制备方法，其特征在于：包括以下步骤，1)制作形成柱体，使所述柱体为圆柱体形状、椭圆柱形状或多边柱形状；2)制作吸附剂，将抗人IgG4抗体偶联在琼脂糖微球或聚苯乙烯微球或磁珠上，形成吸附剂；3)制作人IgG4抗体吸附柱，首先将柱体的一端封闭并在封闭处设置连接管，然后将吸附剂装入柱体的内腔，再将柱体的另一端封闭并在封闭处设置连接管，即制备成人IgG4抗体吸附柱。本专利技术的目的之二还可以通过如下技术方案达到：进一步地，步骤2)中所述的制作吸附剂，具体方法如下：称适量溴化氢活化的琼脂糖微球置于1mmol/L的Hcl中悬浮溶胀，用pH值为8.3，含有0.5mol/L NaCl的0.1mol/L NaHCO3溶液洗涤，并于漏斗抽干，加入抗人IgG4抗体(1ml的微球加入5mg抗体)，发生偶联反应；再以pH值为8.0、浓度为0.1mol/L的Tris-Hcl封闭琼脂糖微球，形成吸附剂。进一步地，步骤3)中所述的制作吸附剂，具体方法如下：将吸附剂装入二端封闭的柱体的内腔，并在二端封闭处设置连接管，制备成基本吸附柱；依次用pH值为4.0,含0.5mol/l Nacl的0.1mol/L醋酸盐溶液和pH值为8.0,含有0.5mol/L Nacl的0.1mol/L Tris-Hcl交替洗吸附柱，最后，用pH值为7.4的0.05mol/L的PBS平衡液洗涤吸附柱，得到偶联了吸附剂为抗人IgG4抗体的琼脂糖微球的人IgG4抗体吸附柱。本专利技术的目的之三可以通过如下技术方案达到：一种人IgG4抗体的吸附柱的用途，其特征在于：利用人IgG4抗体吸附柱从人血中纯化人IgG4；或者所述人IgG4抗体吸附柱的再利用，先用酸性缓冲液洗涤吸附柱，再用中性缓冲液平衡，最后于4度保存备用。本专利技术具有如下突出的有益效果：1、本专利技术由于设置了柱体，柱体的两端封闭，在柱体的两端封闭处各设有一连接管，在柱体的内腔设有吸附剂，所述吸附剂由配基与载体结合构成，配基为抗人IgG4抗体，载体为琼脂糖微球、聚苯乙烯微球或磁珠，构成人IgG4抗体吸附柱；通过使用人IgG4抗体吸附柱，能够高效、特异的纯化人IgG4抗体，因此能够解决现有技术中不能高效纯化人IgG4抗体的问题，具有高效、特异的纯化人IgG4抗体的特点，为IgG4的研究和应用奠定基础。2、本专利技术通过人IgG4抗体吸附柱的再利用，先用酸性缓冲液洗涤吸附柱，再用中性缓冲液平衡，最后于4度保存备用，因此，具有节约成本、经济效益高的有益效果。附图说明图1为本专利技术具体实施例中人IgG4抗体吸附柱的结构示意图。具体实施方式具体实施例1参照附图1，本实施例涉及的人IgG4抗体的吸附柱，包括柱体1，柱体1的两端封闭，在柱体1的两端封闭处各设有一连接管2，在柱体1的内腔设有吸附剂，所述吸附剂由配基与载体结合构成，配基为抗人IgG4抗体，载体为琼脂糖微球、聚苯乙烯微球或磁珠。本实施例中：所述柱体1呈圆柱体形状。所述抗人IgG4抗体为小鼠抗人IgG4抗体。所述载体为氨基化的琼脂糖微球。本实施例涉及的一种人IgG4抗体的吸附柱的制备方法，其特征在于：包括以下步骤，1)制作形成柱体1，使所述柱体1为圆柱体形状；2)制作吸附剂，将抗人IgG4抗体偶联在氨基化的琼脂糖微球上，形成吸附剂；3)制作人IgG4抗体吸附柱，首先将柱体1的一端封闭并在封闭处设置连接管2，然后将吸附剂装入柱体1的内腔，再将柱体1的另一端封闭并在封闭处设置连接管2，即制备成人IgG4抗体吸附柱。本实施例中：步骤2)中所述的制作吸附剂，具体方法如下：称适量溴化氢活化的琼脂糖微球置于1本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种人IgG4抗体的吸附柱，包括柱体(1)，其特征在于：柱体(1)的两端封闭，在柱体(1)的两端封闭处各设有一连接管(2)，在柱体(1)的内腔设有吸附剂，所述吸附剂由配基与载体结合构成，配基为抗人IgG4抗体，载体为琼脂糖微球、聚苯乙烯微球或磁珠。
【技术特征摘要】
1.一种人IgG4抗体的吸附柱，包括柱体(1)，其特征在于：柱体(1)的两端封闭，在柱体(1)的两端封闭处各设有一连接管(2)，在柱体(1)的内腔设有吸附剂，所述吸附剂由配基与载体结合构成，配基为抗人IgG4抗体，载体为琼脂糖微球、聚苯乙烯微球或磁珠。2.根据权利要求1所述的一种人IgG4抗体的吸附柱，其特征在于：所述柱体(1)呈圆柱体形状、椭圆柱形状或多边柱形状。3.根据权利要求1所述的一种人IgG4抗体的吸附柱，其特征在于：所述抗人IgG4抗体，可以为人抗人IgG4抗体、小鼠抗人IgG4抗体、兔抗人IgG4抗体、驴抗人IgG4抗体或羊抗人IgG4抗体中的一种或二种以上组合。4.根据权利要求1所述的一种人IgG4抗体的吸附柱，其特征在于：所述载体为氨基化或羧基化的琼脂糖微球，或者所述载体为氨基或羧基化的聚苯乙烯微球。5.根据权利要求1所述的一种人IgG4抗体的吸附柱，其特征在于：所述载体为氨基化或羧基化的磁珠。6.一种人IgG4抗体的吸附柱的制备方法，其特征在于：包括以下步骤，1)制作形成柱体1，使所述柱体1为圆柱体形状、椭圆柱形状或多边柱形状；2)制作吸附剂，将抗人IgG4抗体偶联在琼脂糖微球或聚苯乙烯微球或磁珠上，形成吸附剂；3)制作人IgG4抗体吸附柱，首先将柱体1的一端封闭并在封闭处设置连接管2，然后将吸附剂装入柱体1的内腔，再将柱体1的另一端封闭并在封闭处设置连接管2...
【专利技术属性】
技术研发人员：潘庆军，刘华锋，郭林杰，吴平，廖焕金，吴静，蔡珺，彭艳霞，张莉芳，
申请(专利权)人：广东医学院附属医院，
类型：发明
国别省市：广东;44
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