用于治疗眼部疾病的蛋白质SLURP-1制造技术

本发明专利技术涉及一种含有SEQ ID NO:1的蛋白质(SLURP-1的成熟形式)以及包含该蛋白质的组合物，用于在受试者眼部诱导或加速瘢痕形成和/或预防感染。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术设及一种含有SEQIDNO: 1的蛋白质W及包含该蛋白质的组合物，用于诱 导或加速受试者眼部癒痕形成（cicatrisation)和/或预防受试者眼部感染。
技术介绍
眼部，特别是角膜和结膜处的损伤是病人就诊时最常见的疾病，也是视力受损最 主要的原因之一。造成损伤的原因很多，主要是由于：过敏、感染（细菌、病毒和真菌性的）、 干眼综合症、手术及其他外伤。运些损伤有害且疼痛感严重。运些损伤的症状可W是眼干、 灼烧感和沙质性眼部刺激。有些症状还表现为发痒、摩擦感、刺痛感或眼部疲劳。其他症状 包括眼部疼痛、发红、拉拽感W及眼后压迫。眼表面的损伤增加了对强光的不适感和敏感 性。 眼表面损伤需要快速治疗和愈合，W避免伤情恶化W及溃瘍等并发症，运些有可 能导致视觉敏锐度下降，在一些最为严重的病例中还会导致失明。在干眼综合症引起的损 伤的治疗中，存在着多种润滑溶液和水凝胶。但是运些产品只能缓解症状，却不能加速损伤 愈合过程。 对于较深的损伤，会用到某些维生素A溶液和促进粘蛋白分泌的组合物，它们虽 然可能有助于愈合，但功效却有限。 阳0化]虽然有些化学化合物和生物分子被发现参与了其他组织的伤口愈合，但具体针对 眼部应用的选择（范围）仍然很有限，而且目前没有有效的分子可W使用。 人体成分B (Human component B)(下文称为SLURP-1)是Ly-6/uPAR超家族中的 成员，运由氨基酸序列比较所证明。运个超家族包含C末端的共有序列CCXXXXCN和不同数 量的Ly-6/uPAR结构域重复。整个序列含有多个可产生蛋白质特异性二硫键的半脫氨酸残 基（从8到10个）U气 取决于GPI错定信号序列的存在，Ly-6/uPAR超家族可W分成两个亚家族W。 SLURP-I属于Ly-6/uPAR超家族的第一亚家族，不具有GPI错定信号序列。SLURP-2 也属于同一亚家族的成员4'5^。先天性掌巧角化病（MaldeMeleda,MdM)患者常常与 SLURP-I突变有关，并且MdM基因位于染色体8q24. 3上Ly-6基因簇上WW。 第二亚家族包含带有GPI错定信号的蛋白质并且包括几种蛋白质：视黄酸诱导基 因E巧IG-E)、E48抗原（人LY-6D)、LY細、前列腺干细胞抗原（PSCA)、CD59或保护素、Lynxl 和UPAR(尿激酶受体）MW。 WO94/14959中描述了SLURP-1。简单说，在透析的浓缩尿液中首次发现并提纯 了该蛋白质，上述的浓缩尿液经过了吸附剂和特定纯化过程处理。其是一种在其成熟形式 (103氨基酸-SEQIDNO:2-带有N-末端信号肤）中的81氨基酸（SEQIDNO: 1)蛋白，其 分子量约为8.9kD。它的序列位于人染色体8的长臂上（如很多Ly6/uPAR超家族的成员一 样），运说明经过染色体复制事件之后存在潜在的协同进化（共进化，co-evolution)W。 SLURP-I有两种不同的存在形式，运取决于在39位置酪氨酸上是否存在着硫酸基 (sul化tegroup) :I型为硫酸化，2型则没有硫酸化。SLURP-1在多种器官W及诸如血液 和尿液的体液中检测到。它主要由角化细胞和上皮细胞生成，因此广泛分布于上皮组织中 。 阳01引此外，系统发育分析表明SLURP-I和Ly-6/uPAR超家族成员的关系密切，与蛇神经 毒素的关系也密切W。蛇神经毒素对乙酷胆碱受体具有抑制作用，因此抑制细胞与胞外介 质之间的离子交换，进而阻止细胞信号传递M'ln。蛇神经毒素与SLURP-I的S维结构相似 性：SLURP-I很可能具有指"型表观，运正是蛇（神经毒素）蛋白的特异性特征，运说明 两者之间具有重要的序列同源性w'w。两种蛋白质的相似性和蛇神经毒素的抑制活性指 明了：SLURP-I可能像烟碱乙酷胆碱受体一样能与离子通道结合并与之相互作用。[001引非神经元细胞中的nA化R活化可W改变参与W下进程的蛋白质的基因表达，所述 进程诸如细胞周期调控、细胞调亡、细胞与细胞间W及细胞与基质间的相互作用。研究较多 的同聚受体是由a7亚基组成；该特异性受体活化由不同的初始信号转换（转导），但都导 向一个共同的结束点。转换信号同时参与了离子活动和蛋白质激酶信号传递。化ernyavsky 等人的结论是上述双活化（离子活动和蛋白质激酶信号传递）可带来基因表达和细胞形 态（W及随后的角质形成细胞移动）的同时改变EW。抑制离子或蛋白质信号会导致部 分抑制，而抑制两种机制则导致它们效应的完全抑制，运些清楚地证实了同时和互补性 (complementary)信号传递。 SLURP-I和烟碱受体之间的相互作用已经被多种出版物所证实，基于乙酷胆碱的 存在，在使用SLURP-I的同时在人类角质形成细胞中发现了激动剂活性（与蛇神经毒素相 反）?。运种相互作用通过胆碱途径控制细胞功能，也可能产生上皮细胞粘附、移动和伤口 愈合然而一个团体得到了不一致的结果，其导致结论为：SLURP-I正在减缓愈合过程 而SLURP-2加速愈合过程?。上述结果还与同组的第S实验进行对比，表明：SLURP-1和 SLURP-2的组合，无论是与SLURP-I自身的抑制活性还是与SLURP-2自身的加速活性相比， 在皮肤愈合过程中都带来了附加的（additive)积极效果。 还需要进一步研究来确定SLURP-I或SLURP-2是否对伤口愈合具有普遍适用性。 另外，在眼科领域，亟需开发药物和相关组合物W促进眼部疾病的高效、无副作用 的愈合和完全恢复角膜透明性。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供生物分子和/或组合物用于治疗眼部疾病，特别是诱导或加 速癒痕形成，减少炎症，和预防受试者眼部感染。[001引通过本专利技术实现了上述目的，本专利技术设及权利要求1中限定的蛋白质。 除非另有说明，本文中使用的所有科技术语的含义等同于本专利技术所属领域普通技 术人员所一般理解的含义。虽然与本文所描述的相似或相同的多种方法和材料可应用于本 专利技术设及的实践或试验中，但是下文中会提供优选的方法和材料。除非另有说明，文中描述 的本专利技术应用的技术是本领域普通技术人员所公知的标准技术。【附图说明】 图1示出了氨基酸全长序列SEQIDNO:2和成熟SLURP-I蛋白SEQIDNO: 1之间 的序列比较，（分别为氨基酸1-103和氨基酸23-103)。 图2示出了对照组和SLURP-I治疗组在乙醇诱导的完全去上皮后在特定时间点的 角膜上皮伤口的巧光染色图像。对照组包括没有接受治疗（对照）的组，W及接受结膜下 注射赋形剂（PB巧（SCJ赋形剂）治疗的组。粗体百分数指明角膜伤口表面的组平均值，括 号内的百分数表示针对所考虑的组的代表性角膜的值。 图3A是示出对照组和SLURP-I治疗组中完全去上皮后角膜伤口愈合的时间进程 的曲线图。经过计算的愈合率平均值±SEM。 图3B示出了对照组和SLURP-I治疗组完全去上皮后第二天的愈合率曲线图巧化g 的SLURP结膜下给药和滴注（instillation))。 图3C示出了对照组和SLURP-I治疗组中完全去上皮后第S天的愈合率曲线图 (50ng的SLURP结膜下给药和滴注）。 图4示出了PBS治疗组和SLURP-I治疗组在校准的乙醇诱导本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种包含SEQ ID NO:1的蛋白质，用于诱导或加速受试者眼部瘢痕形成。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：让马克·孔贝特，凯瑟琳·德洛什，克莱尔·阿巴迪，塞巴斯蒂安·穆兹，朱利安·佩里诺，
申请(专利权)人：博瑞特普勒斯股份有限公司，
类型：发明
国别省市：塞浦路斯;CY