从海参内脏中提取肽、多糖、皂苷和脂类的方法技术

从海参内脏中提取肽、多糖、皂苷和脂类的方法，本发明专利技术涉及海参内脏提取技术领域，从海参体内取出的内脏立即放入沸水中煮制10min以上灭酶；将海参内脏粉碎；内脏碎粒放入20-60目网框内，将网框放入合适容器内的水中，向一个方向搅拌，经一定时间后放出泥沙脏水，收集网框中的净肠供下一步酶解用；称取一定量洗净的肠碎，离心或板框过滤得清液；将清液经孔径1-8nm膜过滤；将膜透过液经处理好的大孔树脂柱；将树脂柱上的流出液经电渗析脱去无机离子；将树脂柱用纯水、10％-50％乙醇液洗涤，60％-90％乙醇液洗脱，回收得脂类，得皂苷。充分利用海参肠这种宝贵资源，同时也减少排放海参内脏对滩涂和近海环境造成的污染。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及海参内脏提取
，具体涉及。
技术介绍
刺参(ApostichopusjaponicasSelenka)，也称仿刺参，属棘皮动物门，盾手目(Aspidochirotida)，刺参科(Stichopodidae Haeckel)。全世界约有海参 1100 余种，其中可食用者有40余种。我国海域有100多种，北起渤海湾，南到围洲岛都有出产。在我国，海参不仅一向被视为具有显著滋补作用的美食佳肴，被列为“八珍之一”，在明代就被作为补益药收入《食物本草》。为了适应我国城乡居民对海参日益增长的需求和海参育苗、养殖技术的突破，我国海参养殖近年迅速发展，据不完全统计2013年海参的捕捞量超过20万吨，加工过程中，海参内脏(肠)超过4万吨。由于海参内脏(肠)清洗泥沙较困难，因此极大部分未被利用，作为废物排放。候英雪等(2008年)研究净海参肠含水分82.03%，干基粗蛋白含量73.6%。内脏中泥沙的含量约为80%左右。【食品研究与开发，2008，29 (10):61_63】以此计算我国沿海年加工海参过程中废弃的净海参肠达8000吨左右，其中的蛋白质超过1000吨，当然还有多糖和脂类，同样具有海参的功效。据报道海参肠蛋白质中必须氨基酸比例比海参体壁更高，EAA/TAA达40 %以上，超过WH0/FA0推荐的优质蛋白质比例。有报道海参内脏(肠)中含的留醇量较多，特别是繁殖季节，内脏含量比平时高80-200倍。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对现有技术的缺陷和不足，提供一种工艺简单、设计合理的，充分利用海参这种宝贵资源，同时也减少排放海参内脏对滩涂和近海环境造成的污染。为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案是:它的工艺流程如下:步骤一、从海参体内取出的内脏立即放入沸水中煮制1min以上灭酶，杀死肠道中微生物，取出冷却；步骤二、将海参内脏(肠)粉碎；步骤三、内脏碎粒放入20-60目网框内，将网框放入合适容器内的水中，向一个方向搅拌，使肠中的泥沙随着水流的离心力流向网框外，经一定时间后放出泥沙脏水，再放清水洗涤，如此重复3-4次即可将肠内泥沙洗净，收集网框中的净肠供下一步酶解用，也可以用自动洗肠机连续洗涤海参肠碎，获得海参净肠；步骤四、称取一定量洗净的肠碎，按1: 1-10加纯水，用胶体磨磨浆，调整体系温度 40°C-55°C，PH7.0-9.0，加复合蛋白酶(其中 10 万 u/g Asl398 20 %-80%、20 万 u/g 2709碱性蛋白酶10% -50%、胰酶10% -70%,60万u/g木瓜蛋白酶2% -30%、风味酶0.5%-10%) 1.0-5.0% (蛋白总量)，搅拌酶解 3-6h，升温 80°C _95°C灭酶 10_25min，离心或板框过滤得清液；步骤五、将步骤四中的清液经孔径1-Snm膜过滤，其中过滤下来的截留液加纯水3-5次稀释后再过滤，合并透过液，最终截留液含多糖，经脱色树脂脱色，活性炭精制、脱炭得精制液，加辅料，经含量测定可以直接调配海参多糖口服液，或精制液经浓缩干燥得多糖粉；步骤六、将步骤五中的膜透过液经处理好的大孔树脂柱，流速为l_5BV/h，吸附在树脂柱上的是皂苷和脂类，流出液为肽类和无机离子；步骤七、将步骤六中的树脂柱上的流出液经电渗析脱去无机离子，活性炭精制、脱炭，得精制液，经含量测定后加辅料、调配得海参肽口服液，或精制液经蒸发浓缩、干燥得海参肽粉；步骤八、将步骤六中的树脂柱用纯水、10% -50%乙醇液洗涤，60% -90%乙醇液洗脱，流速l_4BV/h，收集洗脱液4-8Bv，回收乙醇得浸膏物，用适量纯水分散，用石油醚脱月旨，回收石油醚得脂类，脱脂液用纯水饱和的正丁醇液萃取，回收正丁醇后的残渣真空干燥得阜苷。采用上述结构后，本专利技术有益效果为:1、虽然海参肠是优质蛋白质源，但由于海参肠中有自溶酶和泥沙、粪便，从海参体内取出超过2h会自溶、发臭，加上海参肠较细，只有2mm左右粗，清洗其中泥沙非常费时费力，效率低、费用高，是海参肠一直未被大量利用的主要原因，文献中报导的数据只是为了撰写论文在实验室少量实验的结果，至今尚未有海参肠产业化利用，本专利技术将海参肠经煮制杀灭自溶酶和微生物后粉碎，然后在自动清洗机中洗净泥沙获得净肠，为海参肠的工业化综合利用成为可能；2、海参肠中蛋白质、多糖含量较高，在繁殖期间皂苷的含量是平时的80-200倍，要从海参肠中提取海参蛋白、多糖和皂苷，首先要将海参肠酶解成液体，将蛋白质酶解成小肽，打开蛋白质与多糖的糖肽键，本专利技术酶解海参肠的复合蛋白酶(其中10万u/g Asl39820% -80%、20万u/g 2709碱性蛋白酶10% -50%、胰酶10% -70%、60万u/g木瓜蛋白酶2% -30%、风味酶0.5% -10% )对海参肠的酶解收率达90%以上，分子量< 2000Da的小肽含量占90%以上，产品没有苦味，这是目前文献上均未达到的指标；3、肠中高含量的皂苷分离，本专利技术采用大孔树脂从酶解液中吸附工艺将其分离，具有工艺简单、吸附完全、收率高等特点；4、大孔树脂柱流出液中小肽和多糖的分离采用膜分离，改变文献中用酒精沉淀多糖与小肽分离的工艺，可以大幅度降低生产成本；5、膜分离透过液中含有小肽和无机离子，本专利技术采用电渗析法将小肽中的无机离子去除，可以将可能受污染的重金属离子去除，确保产品安全。【具体实施方式】本【具体实施方式】采用的技术方案是:它的工艺流程如下:步骤一、从海参体内取出的内脏立即放入沸水中煮制1min以上灭酶，杀死肠道中微生物，取出冷却；步骤二、将海参内脏(肠)粉碎；步骤三、内脏碎粒放入20-60目网框内，将网框放入合适容器内的水中，向一个方向搅拌，使肠中的泥沙随着水流的离心力流向网框外，经一定时间后放出泥沙脏水，再放清水洗涤，如此重复3-4次即可将肠内泥沙洗净，收集网框中的净肠供下一步酶解用，也可以用自动洗肠机连续清洗肠碎，获得净肠；步骤四、称取一定量洗净的肠碎，按1: 1-10加纯水，用胶体磨磨浆，调整体系温度 40°C-55°C，PH7.0-9.0，加复合蛋白酶(其中 10 万 u/g Asl398 20 %-80%、20 万 u/g 2709碱性蛋白酶10% -50%、胰酶10% -70%,60万u/g木瓜蛋白酶2% -30%、风味酶0.5%-10%) 1.0-5.0% (蛋白总量)，搅拌酶解 3-6h，升温 80°C _95°C灭酶 10_25min，离心或板框过滤得清液；步骤五、将步骤四中的清液经孔径1-Snm膜过滤，其中过滤下来的截留液加纯水3-5次稀释后再过滤，合并透过液，最终截留液含多糖，经2号脱色树脂脱色，活性炭精制、脱炭得精制液，加辅料，经含量测定可以直接调配海参多糖口服液，或精制液经浓缩干燥得多糖粉；步骤六、将步骤五中的膜透过液经处理好的HPD-200A大孔树脂柱，流速为1-5BV/h，吸附在树脂柱上的是皂苷和脂类，流出液为肽类和无机离子；步骤七、将步骤六中的树脂柱上的流出液经电渗析脱去无机离子，活性炭精制、脱炭，得精制液，经含量测定后加辅料、调配得海参肽口服液，或精制液经蒸发浓缩、干燥得海参肽粉；步骤八、将步骤六中的树脂柱用纯水、10 % -50 %乙醇液洗涤，60 % -90 %本文档来自技高网...

【技术保护点】
从海参内脏中提取肽、多糖、皂苷和脂类的方法，其特征在于：它的工艺流程如下：步骤(一)、从海参体内取出的内脏立即放入沸水中煮制10min以上灭酶，杀死肠道中微生物，取出冷却；步骤(二)、将海参内脏粉碎；步骤(三)、内脏碎粒放入20‑60目网框内，将网框放入合适容器内的水中，向一个方向搅拌，使肠中的泥沙随着水流的离心力流向网框外，经一定时间后放出泥沙脏水，再放清水洗涤，如此重复3‑4次即可将肠内泥沙洗净，收集网框中的净肠供下一步酶解用，也可以用自动洗肠机连续清洗获得海参净肠；步骤(四)、称取一定量洗净的肠碎，按1∶1‑10加纯水，用胶体磨磨浆，调整体系温度40℃‑55℃，PH7.0‑9.0，加复合蛋白酶1.0‑5.0％，搅拌酶解3‑6h，升温80℃‑95℃灭酶10‑25min，离心或板框过滤得清液；步骤(五)、将步骤(四)中的清液经孔径1‑8nm膜过滤，其中过滤下来的截留液加纯水3‑5次稀释后再过滤，合并透过液，最终截留液含多糖，经脱色树脂脱色，活性炭精制、脱炭得精制液，加辅料，经含量测定可以直接调配海参多糖口服液，或精制液经浓缩干燥得多糖粉；步骤(六)、将步骤(五)中的膜透过液经处理好的大孔树脂柱，流速为1‑5BV/h，吸附在树脂柱上的是皂苷和脂类，流出液为肽类和无机离子；步骤(七)、将步骤(六)中的树脂柱上的流出液经电渗析脱去无机离子，活性炭精制、脱炭，得精制液，经含量测定后加辅料、调配得海参肽口服液，或精制液经蒸发浓缩、干燥得海参肽粉；步骤(八)、将步骤(六)中的树脂柱用纯水、10％‑50％乙醇液洗涤，60％‑90％乙醇液洗脱，流速1‑4BV/h，收集洗脱液4‑8Bv，回收乙醇得浸膏物，用适量纯水分散，用石油醚脱脂，回收石油醚得脂类，脱脂液用纯水饱和的正丁醇液萃取，回收正丁醇后的残渣真空干燥得皂苷。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：包卫洋，黄磊，候英雪，杨美圆，
申请(专利权)人：大连润伟海参研发科技有限公司，
类型：发明
国别省市：辽宁;21