本发明专利技术公开了一种新型蛋白激酶Lck的小分子抑制剂，用于抑制同种异体嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）所引起的移植物抗宿主病（GVHD）。所述的Lck激酶小分子抑制剂为FL-2501，其分子式为：本发明专利技术用高通量筛选法从化合物库中筛选到对TCR信号具有高强度选择性抑制作用的小分子化合物，包括其药学上可接受的盐和前体药。该化合物是蛋白激酶Lck的选择性抑制剂，在体外试验中能抑制CAR-T细胞内TCR的信号传递，但不影响CAR-T的增殖和肿瘤杀伤功能。此类化合物可以有效地抑制同种异体CAR-T治疗过程中所产生的GVHD，促进同种异体CAR-T的临床应用。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药领域的一种抑制移植物抗宿主病（GVHD)的新型Lck的小分 子抑制剂，尤其涉及一种对体细胞抗原受体（TCR)的信号传递具有强烈抑制作用的小分子 化合物，用于预防同种异体CAR-T治疗过程中所产生的可能致命的GVHD。该化合物也适用 于同种异体骨髓移植所产生的GVHD。
技术介绍
嵌合抗原受体T细胞免疫疗法（CAR-T疗法）代表当今肿瘤免疫细胞治疗技术的 最前沿，在急性淋巴细胞白血病的临床试验中获得极大的成功。它的基本原理就是利用病 人自身的T细胞，嵌合抗原受体修饰后，可以特异性地识别肿瘤相关抗原，使效应T细胞的 靶向性、杀伤活性和持久性均较常规应用的免疫细胞高，并可克服肿瘤局部免疫抑制微环 境并打破宿主免疫耐受状态。CAR-T治疗分以下五步：1)从癌症病人身上分离免疫T细胞。 2)利用基因工程技术给T细胞加入一个能识别肿瘤细胞，并且同时激活T细胞杀死肿瘤细 胞的嵌合抗体（CAR)，使T细胞变成CAR-T细胞。它不再是一个普通的T细胞，它是一个带 着GPS导航，随时准备找到癌细胞，并发动自杀性袭击。3)体外培养，大量扩增CAR-T细。 4)把扩增好的CAR-T细胞输回病人体内。5)严密监护病人，尤其是控制前几天身体的剧烈 反应。 目前的CAR-T疗法是一种"个性化"的疗法，细胞制品来自于患者自身，无法"现货 供应"，只能"现做现用"，不仅操作复杂，不可控因素多，关键问题在于90%的患者由于自身 T细胞缺陷，尤其是在CAR-T治疗前往往接受过化疗和免疫抑制剂治疗，T细胞数量和质量 达不到CAR-T制备的要求，因而无法接受CAR-T治疗。鉴于这一问题，多个中心尝试开发通 用型CAR-T，即采用正常异体来源的T细胞制备CAR-T，用于肿瘤患者的治疗。这种策略显 著拓宽了CAR-T的细胞来源，避免因患者自体T细胞因数量低、功能不足、扩增能力差等限 制应用。第三方细胞来源的CAR-T还具备易于操作、重复性好等优势，更有利于大批量临床 应用。同种异体CAR-T治疗的主要风险是移植物抗宿主病（GVHD)。鉴于T细胞受体（TCR) 及其介导的信号通路是产生GVHD的关键因素，目前普遍采用的技术是通过敲除内源性TCR 基因以排除同种异体TCR导致的GVHD。但是，通过敲除TCR制备同种异体CAR-T目前遇到 敲除效率低等技术瓶颈，预计在若干年内都不能用于临床。 TCR的信号传递需要关键的蛋白激酶，包括蛋白激酶Lck和ZAP-70。 Lck是T淋巴细胞所特异表达的一种蛋白激酶。它与辅助性T细胞和细胞毒性T 细胞的CD4和CD8共受体的细胞内段结合，从而协助TCR的信号转导。当TCR被MHC所递呈 的抗原激活后，Lck首先使CD3及TCR复合物的z链发生磷酸化，从而使细胞内的络氨酸激 酶ZAP-70与之结合。然后，Lck使ZAP-70发生磷酸化，后者进一步使信号分子LAT(Linker ofActivatedTcells)发生磷酸化，参照图1所示。 另外，近年的研究发现，抑制Lck能增强CAR-T的抗肿瘤功能，尤其是对实体肿瘤 的杀伤作用。在实体肿瘤中常常有大量的调节性T细胞（Treg)浸润，在这种情况下，CAR-T 的肿瘤细胞杀伤效果显著降低。研究发现，抑制Lck能解除Treg对CAR-T的抑制作用。 络氨酸激酶Lck介导的信号转导首先体现在细胞内Ca2+的移动以及一系列信号 分子的激活。这些信号分子包括Ras-MEK-ERK通路，后者激活一系列转录因子，包括NFAT、 NF-kB和AP-1，从而调节IL-2等基因的表达，促进T细胞的增殖和分化。因此，Lck抑制剂 不仅能有效地阻断TCR介导的GVHD，同时能增强CAR-T的肿瘤杀伤效果，在同种异体CAR-T 治疗以及骨髓移植方面具有良好的应用价值。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术存在的以上问题，提供一种抑制移植物抗宿主病 的新型Lck的小分子抑制剂，旨在开发Lck的小分子抑制剂，抑制TCR的信号传递而不影响 T细胞的抗肿瘤功能，从而克服同源异体CAR-T治疗过程中所引起的致命的GVHD。 为实现上述技术目的，达到上述技术效果，本专利技术通过以下技术方案实现： 一种新型Lck小分子抑制剂，所述的Lck小分子抑制剂为FL-2501，其分子式为： 进一步的，所述的新型Lck小分子抑制剂，用于抑制同种异体CAR-T治疗过程中所 引起的移植物抗宿主病。 进一步的，所述的Lck特异性小分子抑制剂为FL-2501的衍生物。 进一步的，所述的Lck的特异性小分子抑制剂抑制TCR信号及T细胞活化，用于制 备同种异体CAR-T，避免其产生移植物抗宿主病。 进一步的，所述的Lck的特异性小分子抑制剂抑制TCR信号及T细胞活化，用于预 防同种异体骨髓抑制所产生的移植物抗宿主病。 本专利技术的有益效果是： 本专利技术的Lck的特异性小分子抑制剂通过抑制Lck使T细胞上的TCR受体信号转导抑 制，进而抑制TCR介导的GBHD的产生。所专利技术的Lck的特异性小分子抑制剂可抑制同源异 体CAR-T治疗所引起的GVHD，促进同源异体CAR-T的推广和产业化。同时，这类化合物也可 用于预防同种异体骨髓抑制所引起的GVHD。 本专利技术用高通量筛选法从化合物库中筛选到对TCR信号具有高强度选择性抑制 作用的小分子化合物，包括其药学上可接受的盐和前体药。该化合物是蛋白激酶Lck的选 择性抑制剂，在体外试验中能抑制CAR-T细胞内TCR的信号传递，但不影响CAR-T的增殖和 肿瘤杀伤功能。此类化合物可以有效地抑制同种异体CAR-T治疗过程中所产生的GVHD，促 进同种异体CAR-T的临床应用。 上述说明仅是本专利技术技术方案的概述，为了能够更清楚了解本专利技术的技术手段， 并可依照说明书的内容予以实施，以下以本专利技术的较佳实施例并配合附图详细说明如后。 本专利技术的【具体实施方式】由以下实施例及其附图详细给出。【附图说明】 此处所说明的附图用来提供对本专利技术的进一步理解，构成本申请的一部分，本发 明的示意性实施例及其说明用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的不当限定。在附图中： 图1是Lck参与TCR信号转导的示意图。当TCR被MHC所递呈的抗原激活后，Lck首 先使CD3及TCR复合物的G链发生磷酸化，从而使细胞内的络氨酸激酶ZAP-70与之结合。 然后，Lck使ZAP-70发生磷酸化，后者进一步使信号分子LAT(LinkerofActivatedT cells)当前第1页1 2 本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种新型Lck小分子抑制剂，其特征在于：所述的Lck小分子抑制剂为FL‑2501，其分子式为：。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：范国煌，
申请(专利权)人：范国煌，
类型：发明
国别省市：上海;31
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