本发明专利技术公开丙戊酸钠在制备预防和治疗移植物抗宿主病药物中的应用，将丙戊酸钠单独或与移植物抗宿主病的标准方案联合，用于临床实践中骨髓移植(造血干细胞移植)受者移植物抗宿主病的预防和治疗，其效果相比标准方案更有效的降低移植物抗宿主病的发生率，并减轻移植物抗宿主病的严重性，尤其减少Ⅲ-Ⅳ度移植物抗宿主病的比例。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医药领域，更具体地讲，涉及丙戊酸钠在制备预防和治疗骨髓移植 (造血干细胞移植）后移植物抗宿主病药物中的应用。
技术介绍
目前预防急性移植物抗宿主病的标准方案是钙调磷酸酶抑制剂如环孢素或者他 克莫司与甲氨喋呤或者霉酚酸酯联用的方案，其中钙调磷酸酶抑制剂主要通过抑制T淋巴 细胞受体下游的钙依赖性的信号转导通路来抑制供体T淋巴细胞的增殖，而甲氨喋呤或者 霉酚酸酯则通过阻断鸟苷酸的从头合成途径来发挥抑制淋巴细胞增殖的作用。但是在接受 该方案处理后仍然有一半以上的骨髓移植（造血干细胞移植）受者会发生急性移植物抗宿 主病。移植物抗宿主病的发生极大限制了骨髓移植（造血干细胞移植）的临床应用，并且 是导致移植后病人死亡或者移植失败的主要原因，据统计，移植排异所致的死亡率达15%。 此外，急性移植物抗宿主病所致病人体内系统性的炎症状态和免疫紊乱又可诱发并促进慢 性移植物抗宿主病。激素（泼尼松）是治疗急慢性移植物抗宿主病的一线方案，对于急性 移植物抗宿主病，通常根据病人的体重每天给予2mg/kg的剂量，而发生慢性移植物抗宿主 病的病人则给予每天lmg/kg的剂量。但既往的临床实践表明激素治疗的反应率较低，有一 半以上的病人仍需要二线治疗方案。并且对激素依赖或抵抗的移植物抗宿主病患者（又称 为激素难治性移植物抗宿主病患者）的预后极差，其长期死亡率可达90%。因此，需要探索 新的药物或药物联合方案，以更好的控制或治疗移植物抗宿主病。 丙戊酸钠是一种已经被用于临床的药物，具有广谱的抗癫痫作用，对人的各型癫 痫均有效。临床上治疗癫痫的常用剂量是每天10_20mg/kg，并可根据病情的控制情况逐渐 增加剂量。近来的研究发现，丙戊酸钠是一类组蛋白去乙酰化酶抑制剂。大量的实验室研 究均已表明组蛋白去乙酰化酶抑制剂具有很强的抗炎和免疫调控效应，如实验室研究及1/ II期临床试验均表明伏立诺他能够有效的降低严重急性移植物抗宿主病的发生率。此外， 小鼠实验性自身免疫性脑炎模型及小鼠肠炎模型的实验室研究显示丙戊酸钠具有良好的 抗炎效应。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的在于提供丙戊酸钠在制备预防移植物抗宿主病药物中的应 用。 本专利技术的第二个目的在于提供丙戊酸钠与钙调磷酸酶抑制剂和甲氨喋呤或者霉 酚酸酯联合用药在制备预防移植物抗宿主病药物中的应用。 本专利技术的第三个目的在于提供丙戊酸钠在制备治疗移植物抗宿主病药物中的应 用。 本专利技术的第四个目的在于提供丙戊酸钠与泼尼松联合用药在制备治疗移植物抗 宿主病药物中的应用。 为实现以上目的，本专利技术公开以下技术方案：丙戊酸钠在制备预防移植物抗宿主 病药物中的应用。 为实现本专利技术第二个目的，本专利技术公开以下技术方案：丙戊酸钠与钙调磷酸酶抑 制剂和甲氨喋呤或者霉酚酸酯联合用药在制备预防移植物抗宿主病药物中的应用。 为实现本专利技术第三个目的，本专利技术公开以下技术方案：丙戊酸钠在制备治疗移植 物抗宿主病药物中的应用。 为实现本专利技术第四个目的，本专利技术公开以下技术方案：丙戊酸钠与泼尼松联合用 药在制备治疗移植物抗宿主病药物中的应用。 本专利技术的优点在于：本专利技术将丙戊酸钠单独或与移植物抗宿主病的标准方案联 合，用于临床实践中骨髓移植（造血干细胞移植）受者移植物抗宿主病的预防和治疗，其 效果相比标准方案更有效的降低移植物抗宿主病的发生率，并减轻移植物抗宿主病的严重 性，尤其减少III-IV度移植物抗宿主病的比例。【附图说明】 图1是本专利技术所涉及实验研究的流程图。 图2是不同处理组移植受体小鼠的生存曲线。 图3是不同处理组移植受体小鼠的体重变化曲线。 图4是不同处理组移植受体小鼠移植物抗宿主病的临床评分。 图5是不同处理组移植受体小鼠移植物抗宿主病靶器官的组织病理学检查。 图6是不同处理组移植受体小鼠移植物抗宿主病靶器官的病理学评分。【具体实施方式】 下面结合具体实施例，进一步阐述本专利技术。下述实施例中所使用的实验方法如无 特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途 径得到。应理解，这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。下列实施例中 未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，例如J.萨姆布鲁克（JosephSambrook) 等编写的《分子克隆实验指南》中所述的条件，或按照制造厂商所推荐的条件进行实验。 实施例1. 在图1中，移植前一周开始给予受体小鼠酸水喂养。移植前一天（Day-I)将BALB/c(图1所示白色小鼠）由137Cs放射源进行全身辐照，共2次，每次剂量为4Gy，间隔3小 时。移植当天（Day0)，将C57BL/6小鼠（图1所示黑色小鼠）引颈处死，然后分离两侧股 骨和胫骨，并分离脾脏。将股骨和胫骨置于培养皿中，用注射器吸取含1%胎牛血清的磷酸 盐缓冲液将骨髓吹出，并反复吹打数次，得到单个骨髓细胞悬液，然后用70微米滤网滤过 细胞悬液。将分离得到的脾脏置于70微米滤网中，轻柔碾磨粉碎后用注射器吸取含1%胎 牛血清的磷酸盐缓冲液反复吹打数次，得到单个脾脏细胞悬液，然后用70微米滤网滤过细 胞悬液。将骨髓细胞悬液和脾脏细胞悬液离心，收集沉淀，其中将脾脏细胞悬液用红细胞 裂解液裂解红细胞5分钟，然后再次离心收集沉淀。将所得到的骨髓细胞和脾脏细胞沉淀 分别用磁珠分选缓冲液重悬，计数细胞量，然后加入适量的抗⑶90. 2磁珠，于冰上孵育20 分钟，每5分钟震荡混匀。然后加入30毫升磁珠分选缓冲液清洗，离心得到细胞沉淀。用 0. 5-1毫升磁珠分选缓冲液重悬细胞，进行磁珠分选，分别得到去除T细胞的骨髓细胞悬液 和脾脏细胞中富集得到的T细胞。离心并用PBS重悬，计数细胞，并调整至合适的浓度。每 只BALB/c小鼠的移植细胞量为：去T骨髓细胞5X106和（或）T细胞1X106。细胞悬液由 尾静脉注入。 移植受体小鼠一共分为3组，分别为去T移植组（只移植5XIO6去T骨髓细胞）， 溶剂对照组（移植5XIO6去T骨髓细胞和IX10 6T细胞，并给予溶剂处理）和丙戊酸钠处 理组（移植5XIO6去T骨髓细胞和IX10 6T细胞，并给予丙戊酸钠处理）。丙戊酸钠粉末 溶于磷酸盐缓冲液中，浓度为30mg/ml。从移植当天开始，每天在给药前称量小鼠体重，按 300mg/kg体重经腹腔给药。 图2,移植后每天观察移植受体小鼠的生存情况。如图所示，去T移植组BALB/c小病的严重程度，在整个观察期结束时有40 %的小鼠仍然存活，并且无严重的移植物抗宿主 病症状。 图3,移植后每两天称量各组小鼠的体重，计算各组小鼠的平均体重。如图所示，丙 图4,移植后每周对各组小鼠的移植物抗宿主病发生情况进行临床评分，评分包括 5个指标--体重减轻、姿势、活动度、毛发稀疏度和皮肤完整度。具体如下： 图5,移植4周以后对对照组和处理组小鼠的移植物抗宿主病靶器官进行病理学 检查（图中从左至右分别为舌、肝、肺、小肠和结肠，上下两行分别是对照组和处理组）。组 织病理学检查发现丙戊酸钠处理组小鼠各靶器官的炎症浸润程度较溶剂对照组明显减轻。 图6,对图5中的病理学检查进行病理评分，可见丙戊酸钠处理组小鼠的病理评分 显著低于对照组小鼠。 病理学检查方法如下：取小鼠的左肺，肝脏，小肠，结肠和舌（用于本文档来自技高网...
【技术保护点】
丙戊酸钠在制备预防移植物抗宿主病药物中的应用。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：龙俊，胡炯，常莉，吴越女，
申请(专利权)人：上海交通大学医学院附属瑞金医院，
类型：发明
国别省市：上海;31
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。