妥布赖森化合物、制备和使用方法技术

式(I)的妥布赖森(tubulysin)化合物(其中R1、R2、R3a、R3b、R4、R5、W和n如本文中所定义)是抗有丝分裂剂，其可用于治疗癌症，尤其当缀合至靶向部分时。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】妥布赖森化合物、制备和使用方法专利技术背景本专利技术涉及在结构上与妥布赖森(tubulysins)类似的化合物、其与配体的缀合物、制备和使用此类化合物和缀合物的方法和包含此类化合物和缀合物的组合物。妥布赖森是最初从粘细菌：过渡型原囊粘细菌(Archangiumgephyra)或碟形囊球粘细菌(Angiococcusdisciformis)的培养物分离的细胞毒素，其中各生物体产生妥布赖森的不同混合物(Sasse等人，2000；Reichenbach等人，1998)。已阐明其晶体结构和生物合成途径(Steinmetz等人，2004)且已对其生物合成基因进行测序(Hoefle等人，2006b)。前妥布赖森(pretubulysin)，妥布赖森的生物合成前体，也已显示拥有一些活性(Ullrich等人，2009)。(本文通过第一作者或专利技术人和年份引用的文献的全部引文都列于本说明书结尾处)。妥布赖森属于天然存在的抗有丝分裂多肽和缩肽的组群，该组群包括拟茎点霉毒素(phomopsin)、尾海兔素(dolastatin)和念珠藻素(cryptophycin)(Hamel2002)。还存在除多肽或缩肽外的抗有丝分裂剂，例如紫杉醇(paclitaxel)、美坦辛(maytansine)和埃博霉素(epothilone)。在有丝分裂期间，细胞的微管重新组织以形成有丝分裂纺锤体，这是需要微管组成蛋白α-微管蛋白和β-微管蛋白的快速装配和去装配(disassembly)的过程。抗有丝分裂剂阻断该过程并阻止细胞发生有丝分裂。在分子水平上，一种抗有丝分裂剂的确切阻断机制可以与另一种不同。妥布赖森防止微管蛋白装配成微管，从而使得所影响细胞累积于G2/M期中并发生细胞凋亡(Khalil等人，2006)。紫杉醇通过结合至微管并防止其去装配来实现相同最终结果。妥布赖森具有从如式(A)中所显示的一个蛋白氨基酸亚单元和三个非蛋白氨基酸亚单元构成的四肽基支架：N-甲基哌啶酸(Mep)、异亮氨酸(Ile)、管式缬氨酸(Tuv，tubuvaline)和管式苯丙氨酸(Tup，tubuphenylalanine，R'等于H)或管式酪氨酸(Tut，tubutyrosine，R'等于OH)。在更为熟知的天然存在的妥布赖森(称为A、B等)中，结构变化的位点位于式(A)的残基R'、R''和R'''处，如表1中所显示：此外，已鉴定出其它天然存在的妥布赖森(Chai等人，2010)。Kaur等人，2006研究了妥布赖森A的抗增殖性质且发现，其比其它抗有丝分裂剂(例如紫杉醇和长春碱(vinblastine))更有效且在针对各种癌细胞系的异种移植物测定中具有活性。此外，妥布赖森A诱导癌细胞但非正常细胞中的细胞凋亡且在体外测定中显示显著潜在抗血管生成性质。也已评估其它妥布赖森的抗有丝分裂性质且通常发现可有利地与非妥布赖森抗有丝分裂剂的性质进行比较(参见例如Balasubramanian等人，2009；Steinmetz等人，2004；Wipf等人，2004)。出于这些原因，极为关注使用妥布赖森作为抗癌剂(参见例如Domling等人，2005c；Hamel2002)。许多出版物描述了针对合成妥布赖森的成果，包括：Balasubramanian等人，2009；Domling等人，2006；Hoefle等人，2003；Neri等人，2006；Peltier等人，2006；Sani等人，2007；Sasse等人，2007；Shankar等人，2009；Shibue等人，2009和2010；和Wipf等人，2004。其它出版物描述了经由制备和评估妥布赖森类似物或衍生物的结构-活性关系(SAR)研究：Balasubramanian等人，2008和2009；Chai等人，2011；Domling2006；Domling等人，2005a；Ellman等人，2013；Hoefle等人，2001和2006a；Pando等人，2011；Patterson等人，2007和2008；Richter，2012a、2012b和2012c；Shankar等人，2013；Shibue等人，2011；Sreejith等人，2011；Vlahov等人，2010a；Wang等人，2007；Wipf等人，2007和2010；和Zanda等人，2013。SAR研究主要探究Mep环、Tuv亚单元的残基R''和R'''和Tup/Tut亚单元的芳族环或脂族碳链中的结构变化。Domling等人，2005公开妥布赖森与配偶体分子的缀合物，配偶体分子一般描述为聚合物或生物分子，但实例限于聚乙二醇(PEG)作为配偶体分子。Cheng等人，2011也公开适用于缀合物中的妥布赖森类似物。其它公开妥布赖森缀合物的文献是Boyd等人，2008和2010；Jackson等人，2013；Vlahov等人，2008a、2008b和2010b；Leamon等人，2008和2010；Reddy等人，2009；和Low等人，2010。Leung等人2002公开可缀合至药物(包括妥布赖森)以改善其生物活性和水溶性的多阴离子多肽。Davis等人2008和Schluep等人2009公开了基于环糊精的制剂，其中妥布赖森经由键合至Tup/Tut羧基的酰肼-二硫化物接头部分共价连接至环糊精。据报导，Tuv亚单元的去乙酰化(即式(A)中的R''是羟基而非乙酰基)导致生物活性的损失(Domling等人，2006)。在妥布赖森U和V(其不同之处在于前者被乙酰化而后者被去乙酰化)的研究中，取决于测定，妥布赖森V被报导为效力低约1/600至1/200(Balasubramanian等人，2009)。因为乙酸酯基团易于水解，所以关注R''位置处的去乙酰化作为导致损失活性的潜在不稳定中心以用于开发用于药物应用的妥布赖森类似物。专利技术概述本专利技术人已发现，可通过用氨基甲酸酯基团代替R''位置处的乙酸酯来预防如上文讨论与去乙酰化有关的生物活性损失。如本文所述的氨基甲酸酯基团不导致生物活性的显著损失，但仍是更稳定的。因此，在一方面，本专利技术提供具有由式(I)代表的结构的化合物：其中R1是H、未取代或取代的C1-C10烷基、未取代或取代的C2-C10烯基、未取代或取代的C2-C10炔基、未取代或取代的芳基、未取代或取代的杂芳基、未取代或取代的(CH2)1-2O(C1-C10烷基)、未取代或取代的(CH2)1-2O(C2-C10烯基)、未取代或取代的(CH2)1-2O(C2-C10炔基)、(CH2)1-2OC(=O)(C1-C10烷基)、未取代或取代的(CH2)1-2OC(=O)(C2-C10烯基)、未取代或取代的(CH2)1-2OC(=O)(C2-C10炔基)、未取代或取代的C(=O)(C1-C10烷基)、未取代或取代的C(=O)(C2-C10烯基)、未取代或取代的C(=O)(C2-C10炔基)、未取代或取代的环脂族基团、未取代或取代的杂环脂族基团、未取代或取代的芳基烷基或未取代或取代的烷基芳基；R2是H、未取代或取代的C1-C10烷基、未取代或取代的C2-C10烯基、未取代或取代的C2-C10炔基、未取代或取代的芳基、未取代或取代的杂芳基、未取代或取代的(CH2)1-2O(C本文档来自技高网...

【技术保护点】
化合物，其具有由式(I)代表的结构：其中R1是H、未取代或取代的C1‑C10烷基、未取代或取代的C2‑C10烯基、未取代或取代的C2‑C10炔基、未取代或取代的芳基、未取代或取代的杂芳基、未取代或取代的(CH2)1‑2O(C1‑C10烷基)、未取代或取代的(CH2)1‑2O (C2‑C10烯基)、未取代或取代的(CH2)1‑2O(C2‑C10炔基)、(CH2)1‑2OC(=O)(C1‑C10烷基)、未取代或取代的(CH2)1‑2OC(=O)(C2‑C10烯基)、未取代或取代的(CH2)1‑2OC(=O)(C2‑C10炔基)、未取代或取代的C(=O)(C1‑C10烷基)、未取代或取代的C(=O)(C2‑C10烯基)、未取代或取代的C(=O)(C2‑C10炔基)、未取代或取代的环脂族基团、未取代或取代的杂环脂族基团、未取代或取代的芳基烷基或未取代或取代的烷基芳基；R2是H、未取代或取代的C1‑C10烷基、未取代或取代的C2‑C10烯基、未取代或取代的C2‑C10炔基、未取代或取代的芳基、未取代或取代的杂芳基、未取代或取代的(CH2)1‑2O(C1‑C10烷基)、未取代或取代的(CH2)1‑2O(C2‑C10烯基)、未取代或取代的(CH2)1‑2O(C2‑C10炔基)、(CH2)1‑2OC(=O)(C1‑C10烷基)、未取代或取代的(CH2)1‑2OC(=O)(C2‑C10烯基)、未取代或取代的(CH2)1‑2OC(=O)(C2‑C10炔基)、未取代或取代的C(=O)(C1‑C10烷基)、未取代或取代的C(=O)(C2‑C10烯基)、未取代或取代的C(=O)(C2‑C10炔基)、未取代或取代的环脂族基团、未取代或取代的杂环脂族基团、未取代或取代的芳基烷基、未取代或取代的烷基芳基或；其中每一R2a独立地是H、NH2、NHMe、Cl、F、Me、Et或CN；R3a和R3b独立地是H、C1‑C5烷基、CH2(C5‑C6环烷基)、CH2C6H5、C6H5或CH2CH2OH；R4是,,，或；其中R4a是H或C1‑C3烷基；且Y是H、OH、Cl、F、CN、Me、Et、NO2或NH2；R5是H、C1‑C5烷基、C2‑C5烯基、C2‑C5炔基、CO(C1‑C5烷基)、CO(C2‑C5烯基)或CO(C2‑C5炔基)；W是O或S；且n是0、1或2；或其药学上可接受的盐。...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.02.14 US 61/7648251.化合物，其具有由式(I)代表的结构：其中R1是未取代的C1-C10烷基；R2是未取代的C1-C10烷基或；其中每一R2a独立地是H、NH2、NHMe、Cl、F、Me、Et或CN；R3a和R3b独立地是H、C1-C5烷基或C6H5；R4是；其中R4a是H或C1-C3烷基；且Y是H、NO2或NH2；R5是C1-C5烷基；W是O；且n是1；或其药学上可接受的盐。2.根据权利要求1的化合物，其具有由式(Ia)代表的结构：，其中Y是H或NO2；R4a是H、Me或Et；且R3a和R3b独立地是H、Me或Et。3.根据权利要求1的化合物，其具有由式(Ib)代表的结构：，其中R4a是H、Me或Et；R3a和R3b独立地是H、Me和Et；且R6是C1-C5烷基或(CH2)1-2C6H5。4.根据权利要求3的化合物，其具有由式(Ib')代表的结构：，其中R4a是H、Me或Et，且R6是Me或n-Pr。5.根据权利要求4的化合物，其具有由式(I-2)代表的结构：。6.根据权利要求4的化合物，其具有由式(I-9)代表的结构：。7.缀合物，其包含共价连接至靶向部分的根据权利要求1的化合物，所述靶向部分特异性或优先结合至肿瘤相关性抗原。8.根据权利要求7的缀合物，其具有由式(II-1')代表的结构：其中R6是Me或n-Pr且Ab是抗体。9.根据权利要求8的缀合物，其中所述抗体是抗CD70、抗间皮素或抗磷脂酰肌醇蛋白聚糖3抗体。10.根据权利要求7的缀合物，其具有由式(II)代表的结构[D(XD)aC(XZ)b]mZ(II)其中Z是靶向部分；XD是第一间隔基部分；XZ是第二间隔基部分；C是可裂解基团；下标a和b独立地是0或1；下标m是1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；且D根据式(D-a)或式(D-b)其中Y是H或NO2；R4a是H、Me或Et；R3a和R3b独立地是H、Me或Et；且R6是C1-C5烷基或(CH2)1-2C6H5；或其药学上可接受的盐。11.根据权利要求10的缀合物，其中Z是抗体。12.根据权利要求10的缀合物，其中D是：。1...

【专利技术属性】
技术研发人员：程恒，丛强，S冈瓦，
申请(专利权)人：百时美施贵宝公司，
类型：发明
国别省市：美国;US