一种猪源解淀粉芽孢杆菌喷雾干燥工艺，涉及猪源解淀粉芽孢杆菌制备工艺领域。第一步，制备猪源解淀粉芽孢杆菌菌体发酵液；第二步，向第一步制备得到的猪源解淀粉芽孢杆菌菌体发酵液中加入浓度为20％(W/V)的保护剂；第三步，通过喷雾干燥机进行喷雾干燥，设定参数为：入料速度为1200mL/h，入口温度为150℃，出口温度为90℃。本发明专利技术用于猪源解淀粉芽孢杆菌喷雾干燥。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及猪源解淀粉芽孢杆菌制备工艺，尤其是一种猪源解淀粉芽孢杆菌喷雾 干燥工艺。
技术介绍
解淀粉芽孢杆菌能够高效分泌多种蛋白、消化酶、抗菌素以及其它益生代谢产物， 具有调节动物肠道菌群平衡，提高生长性能，增强免疫力等功能，因而解淀粉芽孢杆菌是一 种理想的益生菌。喷雾干燥法是将一定浓度的料液雾化后，与热空气均匀混合，并将料液加 工成粉状干燥制剂生产方法，该方法具有工艺简便、成本低廉、易于推广等特点。由于喷雾 干燥过程中料液需要接触高温空气，因此，生产用益生菌需具备一定的耐高温特性，而且喷 雾干燥工艺应当科学，以减少生态菌的死亡。在环境条件不利条件下，解淀粉芽孢杆菌能产 生内生芽孢，由于芽孢对高温、高压、干燥、氧化、酸、碱和毒物等不良因素抵抗力较强，因而 解淀粉芽孢杆菌具有耐高温、耐挤压及耐酸碱等特性，其在喷雾干燥、制粒及冻干等制剂的 生产过程中均能保持高度稳定性。因此，喷雾干燥法可以用于解淀粉芽孢杆菌制剂的生产。 但在现有技术中，猪源解淀粉芽孢杆菌喷雾干燥工艺存在一个问题：喷雾干燥后，菌体存活 率低，一般存活率在69%_72%之间。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种猪源解淀粉芽孢杆菌喷雾干燥工艺。该工艺简便、成本 低廉，且能保证较高的菌体存活率。 为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案是：一种猪源解淀粉芽孢杆菌喷雾干燥 工艺，第一步，制备猪源解淀粉芽孢杆菌菌体发酵液；第二步，向第一步制备得到的猪源解 淀粉芽孢杆菌菌体发酵液中加入浓度为20% (W/V)的保护剂；第三步，控制入料速度为 1200mL/h，入口温度为150°C，出口温度为90°C。 尤其是，100mL所述猪源解淀粉芽孢杆菌菌体发酵液中加入的保护剂为蔗糖3g， 脱脂奶粉l〇g，山梨醇2g，低聚果糖2g，甘油3g。 尤其是，100mL所述猪源解淀粉芽孢杆菌菌体发酵液中加入的保护剂为蔗糖4g， 脱脂奶粉5g，山梨醇4g，低聚果糖4g，甘油3g。 尤其是，100mL所述猪源解淀粉芽孢杆菌菌体发酵液中加入的保护剂为脱脂奶粉 12g，山梨醇2g，低聚果糖3g，甘油3g。 采用这种猪源解淀粉芽孢杆菌喷雾干燥工艺的效果是：通过对出口温度、入口温 度、保护剂浓度和入料速度的准确控制，使喷雾干燥后的菌体存活率保持在75%以上。【具体实施方式】【具体实施方式】一：一种猪源解淀粉芽孢杆菌喷雾干燥工艺，其特征在于：第一步， 制备猪源解淀粉芽孢杆菌菌体发酵液；第二步，向第一步制备得到的猪源解淀粉芽孢杆菌 菌体发酵液中加入浓度为20% (W/V)的保护剂；第三步，通过喷雾干燥机进行喷雾干燥，设 定参数为：入料速度为1200mL/h，入口温度为150°C，出口温度为90°C。【具体实施方式】 二是对一所述的猪源解淀粉芽孢杆菌喷雾干燥工艺 的进一步说明，在本实施方式中，l〇〇mL所述猪源解淀粉芽孢杆菌菌体发酵液中加入的保护 剂为鹿糖3g，脱脂奶粉10g，山梨醇2g，低聚果糖2g，甘油3g。【具体实施方式】 三是对一所述的猪源解淀粉芽孢杆菌喷雾干燥工艺 的进一步说明，在本实施方式中，l〇〇mL所述猪源解淀粉芽孢杆菌菌体发酵液中加入的保护 剂为鹿糖4g，脱脂奶粉5g，山梨醇4g，低聚果糖4g，甘油3g。【具体实施方式】 四是对一所述的猪源解淀粉芽孢杆菌喷雾干燥工艺 的进一步说明，在本实施方式中，l〇〇mL所述猪源解淀粉芽孢杆菌菌体发酵液中加入的保护 剂为脱脂奶粉12g，山梨醇2g，低聚果糖3g，甘油3g。 实验数据及分析： 第一步：选择菌株 解淀粉芽孢杆菌（Baci1lussubti1is)SY6，源自黑龙江省齐齐哈尔地区某猪场健康仔 猪肠道，由黑龙江省兽医科学研究所分离鉴定和保存。 第二步选择设备和试剂 喷雾干燥机(上海达程实验设备有限公司，型号DC-1500)，微生物发酵罐(上海联环生 物工程设备有限公司，型号：SGJ15/C)，营养肉汤(杭州天和微生物技术有限责任公司，批 号：090905)，营养琼脂(北京奥博星生物技术责任有限公司，批号：070113)，脱脂乳（黑龙 江省完达山乳业股份有限公司，批号20100412)。 第三步编制因素水平编码表(见表一） 采用SASV8. 0四因素二次正交旋转组合的试验设计方法，优化解淀粉芽孢杆菌喷雾干 燥工艺中的四个条件因素，即：出口温度、入口温度、保护剂浓度和入料速度。表一为因素水 平编码表。 表一因素水平编码表注：Xl、x2、x3、x4分别代表出口温度、入口温度、保护剂浓度、入料速度水平的编码值。 第四步解淀粉芽孢杆菌发酵培养及芽孢计数 取解淀粉芽孢杆菌菌种接种营养琼脂平板，挑取典型菌落，接种营养肉汤培养基，制备 一级种子液和二级种子液。二级种子液活菌数达108CFU/mL时，按2%接种量接种发酵罐培 养，在培养12h、24 h、36h、48h、60h、72h分别取发酵液100mL，80°C水浴15min杀死营养体， 参照国标GB/T26428-2010测定发酵液中菌体芽孢率。 第五步菌液喷雾干燥 取60h菌体发酵液100mL，分别加入不同量和不同种类的保护剂，制备料液。设定喷雾 干燥机各项喷雾干燥条件参数，进行喷雾干燥。测定干燥菌粉中的活菌数，并计算存活率。 菌体存活率（％)=喷雾干燥后菌粉活菌总数/喷雾干燥前菌液活菌总数X 100%〇 根据SASV8. 0中四因素二次正交旋转组合设计试验结果，见表3,以喷雾干燥后 解淀粉芽孢杆菌存活率作为Y值。 表三第六步对实验结果进行方差分析 应用SASV8. 0软件(数据库管理和数据分析的标准软件系统）对试验数据进行多项式 回归分析，建立二次回归模型，拟合得到二次回归方程： Y1 = 86. 91667+0. 083333\-0. 083333X2-0. 25X3+0. 333333X4-1. 708333X^+0. 125X4-0 .125父34-1. 333333X/+0. 625X2X3+0. 5X2X4-1. 458333X/+0. 375X3X4-1. 208333X/ 计算各类偏差平方与自由度，F检验结果（F1=4. 103〈FQ.Q1 (10, 11 )=4. 54 ;F2=3. 825>Faol (14, 21)=3. 07)表明，二次正交旋转组合设计的回归方程与实际情况拟合较好，具有极显著 意义（P〈0. 01)。应用SASV8.0软件对二次回归方程进行方差分析，结果见表4。方差分析 结果表明：因素&2、X22、X32、X42对Y值影响显著，而其他各因素影响不显著。 表4二次多项模型及其各项的方差分析表第七步优化分析 为了确定喷雾干燥工艺中各条件的最优水平，本研究应用SASV8. 0软件中数据优化程 序（NumericalOptimization)求得当Y值最大时，四个因素的水平取在中心点（0、0、0、0)， 即出口温度90°C、入口温度150°C、保护剂浓度20%、入料速度1200mL/h，此时，菌体喷雾 干燥存活率预测值为77%。 第八步验证试验 细菌60h发酵液(保护剂为：蔗糖3g，脱脂奶粉10g，山梨醇2g，低聚果糖2g，甘油3g)3次重复喷雾干燥后，菌体存活率分别为75%、76%和76%，其平均存活率为75本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种猪源解淀粉芽孢杆菌喷雾干燥工艺，其特征在于：第一步，制备猪源解淀粉芽孢杆菌菌体发酵液；第二步，向第一步制备得到的猪源解淀粉芽孢杆菌菌体发酵液中加入浓度为20％(W/V)的保护剂；第三步，通过喷雾干燥机进行喷雾干燥，设定参数为：入料速度为1200 mL /h，入口温度为150℃，出口温度为90℃。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：刘宇，李阳，王爽，张鹏宇，史同瑞，朱战波，
申请(专利权)人：黑龙江省兽医科学研究所，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23
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