一种 4,5 -二氨基-2,7-萘二磺酸的高效液相色谱分析方法技术

本发明专利技术涉及一种 4,5 -二氨基-2,7-萘二磺酸的高效液相色谱分析方法。包括以下分析步骤：（1）高效液相色谱的条件为：色谱柱：选用XDB-C18反相柱，规格为5μm，150×4.6mm；流动相组成体积比和梯度条件：0min10%甲醇-90%Li2SO4，流速为0.8mL·min-1；7min 10%甲醇-90%Li2SO4，流速为0.8mL·min-1；8min 20%甲醇-80%Li2SO4，流速为0.8mL·min-1；9min 40%甲醇-60%Li2SO4，流速为0.8mL·min-1；10min 20%甲醇-80%Li2SO4，流速为0.8mL·min-1；11min 5%甲醇-95%Li2SO4，流速为0.8mL·min-1；12min 1%甲醇-99%Li2SO4，流速为0.8mL·min-1；（2）配置样品溶液；（3）制作标准曲线；（4）样品含量的测定以及精密度的确定。本发明专利技术具有很强的实用价值和广发的市场前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及物质分析
，具体涉及一种4, 5 -二氨基-2, 7-萘二磺酸的高 效液相色谱分析方法。
技术介绍
H酸（1-氨基-8-萘酚-3,6-二磺酸)是染料工业的重要中间体，主要用于生产酸 性、直接和活性染料，如酸性品红6B、酸性大红G、酸性黑10B、直接黑、活性艳红K-2BP、活性 紫K-3R、活性深蓝K-R等90余种染料，这些染料用于毛纺，棉织物的染色，亦可用于生产药 物，全球年需求量达十五万吨以上。 传统的H酸生产方法是以精萘为原料，经过磺化、硝化、还原等步骤得到产品，其 中在还原步骤采用铁粉加酸还原，产生大量的铁泥，难以处理，为了解决传统制备工艺带来 的环保问题，提出了新的制备思路：利用4, 5-二硝基-2, 7-萘二磺酸进行还原生成4, 5 -二氨基-2, 7-萘二磺酸，其是合 成H酸的重要中间体之一，也是H酸绿色合成过程中的重要步骤之一，同时，其也是重要的 化工产品，目前准确测定4, 5 -二氨基-2, 7-萘二磺酸及其杂质含量的技术还不太成熟，在 药物分析领域中准确测定4, 5 -二氨基-2, 7-萘二磺酸及其杂质含量还属于空白区。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种4, 5 -二氨基-2, 7-萘二磺酸的高效液 相色谱分析方法。 为解决上述技术问题，本专利技术提供以下技术方案：一种4, 5 -二氨基-2, 7-萘二 磺酸的高效液相色谱分析方法，包括以下分析步骤：（1)采用反相高效液相色谱法，高效液 相色谱条件如下：色谱柱：XDB-C18反相柱，5 μπι，150X4. 6mm ;流动相组成（体积比）和 梯度条件：〇min 10% 甲醇-90%Li2S04，流速为 0· 8mL · min 1Jmin 10% 甲醇 _90%Li 2S04， 流速为 〇· 8mL · min SSmin 20% 甲醇-80%Li 2S04，流速为 0· 8mL · min 40% 甲 醇-60%Li2S04，流速为 0· 8mL · min SlOmin 20% 甲醇-80%Li 2S04，流速为 0· 8mL · min S llmin 5% 甲醇-95%Li2S04，流速为 0· 8mL · min S 12min 1% 甲醇-99%Li 2S04，流速为 0.8mL · min S (2) 配置样品溶液，分别配制4, 5 -二氨基-2, 7-萘二磺酸的标准溶液及样品溶液； (3) 制作标准曲线； (4) 样品含量的测定以及精密度的确定。 所述样品的进样量优选20 μ L。 所述样品的检测波长为233nm。 本专利技术中的4, 5 -二氨基-2, 7-萘二磺酸标准品为自制药品，其制备方法如下： 取一定量的4, 5 -二硝基-2, 7-萘二磺酸，在一定的温度和压力下，采用可回收还原剂 催化，保持反应一定时间，即得到粗产品，然后纯化，经液相色谱一质谱联用及核磁共振检 测方法检测证实，粗产品为4, 5 -二氨基-2, 7-萘二磺酸和4, 5-二硝基-2, 7-萘二磺酸及 少许4-硝基-2, 7-萘二磺酸的混合物，若原料的纯度不够，有可能混有少量的2, 7-萘二磺 酸，纯化后，4, 5 -二氨基-2, 7-萘二磺酸纯度可达98%，按照本专利技术高效液相色谱分析的色 谱条件，4, 5 -二氨基-2, 7-萘二磺酸的保留时间为5. 608min ;2, 7-萘二磺酸的保留时间 为8. 938min ;4_硝基-2, 7-萘二磺酸保留时间为14. 556min ;4, 5-二硝基-2, 7-萘二磺酸 保留时间为15. 408min，分离度好。 所述甲醇优选HPLC级，异丙醇优选HPLC级。 试验中流动相和溶液用水优选二次石英蒸馏水。 本专利技术与现有技术相比具有的有益效果是：本专利技术的分析方法可以准确测定4, 5 -二氨基-2, 7-萘二磺酸主体含量，同时准确测定原料4, 5-二硝基-2, 7-萘二磺酸及原料 杂质2, 7-萘二磺酸的含量，方法简单，分离度好，分析时间短，为监控H酸生产过程的质量 提供了可靠的保障。【附图说明】 图1为本专利技术中各标准品混合溶液的液相色谱图； 图2为产品4, 5 -二氨基-2, 7-萘二磺酸的标准曲线图； 图3为原料4, 5-二硝基-2, 7-萘二磺酸的标准曲线图； 图4为杂质2, 7-萘二磺酸的标准曲线图； 图5为实验室制备4, 5 -二氨基-2, 7-萘二磺酸的样品图。【具体实施方式】 为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对 本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并 不用于限定本专利技术。 本专利技术中的主要实验仪器及色谱条件为：Agilent 1100高效液相色谱仪DAD检测 器；XDB-C18反相柱，规格为5 μπι，150X4. 6mm ;流动相组成体积比和梯度条件：0minl0%甲 醇-90%Li2S04,流速为 0· 8mL · min 1Jmin 10% 甲醇-90%Li 2S04,流速为 0· 8mL · min SSmin 20% 甲醇-80%Li2S04,流速为 0· 8mL .min 1Wmin 40% 甲醇-60%Li 2S04,流速为 0· 8mL .min S IOmin 20% 甲醇-80%Li2S04,流速为 0· 8mL · min Sllmin 5% 甲醇-95%Li 2S04,流速为 0· 8mL .min SUmin 1%甲醇-99%Li 2S04，流速为0· 8mL .min \本专利技术中的进样量为20 yL ; 用紫外可见分光光度计在200-700nm进行连续扫描，2, 7-萘二磺酸、4-硝基-2, 7-萘二磺 酸、4, 5 -二硝基-2, 7-萘二磺酸及4, 5 -二氨基-2, 7-萘二磺酸均在233nm处有特征吸 收，故确定检测波长为233nm。 本法明中的试剂与药品为：4,5 -二硝基-2, 7-萘二磺酸，生产过程硝化步骤纯 化产品；4, 5 -二氨基-2, 7-萘二磺酸标准品，传统方法制备纯化，并经过液相色谱-质谱 鉴定；4-二硝基-2, 7-萘二磺酸标准品，传统方法制备纯化，并经过液相色谱-质谱鉴定； 2, 7-萘二磺酸，标准品，国药集团；甲醇：HPLC级；异丙醇：HPLC级；硫酸锂：分析纯，国药集 团；实验中流动相和溶液用水均为二次石英蒸馏水。 本专利技术中的4, 5 -二氨基-2, 7-萘二磺酸标准品的制备方法如下：取一定量的4, 5 -二硝基-2, 7-萘二磺酸，在一定的温度和压力下，采用可回收还原剂催化，保持反应一定 时间，即得到粗产品，然后纯化，经液相色谱一质谱联用及核磁共振检测方法检测证实，粗 产品为4, 5 -二氨基-2, 7-萘二磺酸和4, 5-二硝基-2, 7-萘二磺酸及少许4-硝基-2, 7-萘 二磺酸的混合物，若原料的纯度不够，有可能混有少量的2, 7-萘二磺酸，纯化后，4, 5 -二 氨基-2, 7-萘二磺酸纯度可达98%，按照本专利技术高效液相色谱分析的色谱条件，4, 5 -二 氨基-2, 7-萘二磺酸的保留时间为5. 608min ; 2, 7-萘二磺酸的保留时间为8. 938min ; 4-硝基-2, 7-萘二磺本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种 4,5 ‑二氨基‑2,7‑萘二磺酸的高效液相色谱分析方法，其特征在于包括以下分析步骤：（1）采用反相高效液相色谱法，高效液相色谱的条件为：色谱柱：选用XDB‑C18反相柱，规格为5μm，150×4.6mm；流动相组成体积比和梯度条件：0min10%甲醇‑90%Li2SO4，流速为0.8mL·min‑1；7min 10%甲醇‑90%Li2SO4，流速为0.8mL·min‑1；8min 20%甲醇‑80%Li2SO4，流速为0.8mL·min‑1；9min 40%甲醇‑60%Li2SO4，流速为0.8mL·min‑1；10min 20%甲醇‑80%Li2SO4，流速为0.8mL·min‑1；11min 5%甲醇‑95%Li2SO4，流速为0.8mL·min‑1；12min 1%甲醇‑99%Li2SO4，流速为0.8mL·min‑1；（2）配置样品溶液，分别配制4,5 ‑二氨基‑2,7‑萘二磺酸的标准溶液及样品溶液；（3）制作标准曲线；（4）样品含量的测定以及精密度的确定。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：吴鸿伟，刘雪静，曹晗，韩迎，
申请(专利权)人：山东省鲁南煤化工工程技术研究院，
类型：发明
国别省市：山东;37