一种产生四氢嘧啶的基因工程菌及其构建方法与应用技术

本发明专利技术涉及一种产生四氢嘧啶的基因工程菌及其构建方法与应用，所述基因工程菌为具有特定基因型的大肠杆菌，包含来源于伸长盐单胞菌ectABC基因；lysA、thrA、iclR三个基因缺陷型；具有lac启动子控制的谷氨酸棒状杆菌lysC基因；trc启动子控制的ppc基因；使用该菌利用葡萄糖发酵生产四氢嘧啶能够克服化学合成法反应条件苛刻、能耗大等不足；能够克服伸长盐单胞菌发酵或酶催化法存在的工艺复杂、生产成本高等不足。发酵20-28h后，四氢嘧啶产量达到了12-18g/L，具有较好的工业应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及化合物生物技术生产领域，尤其是一种产生四氢嘧啶的基因工程菌及 其构建方法与应用。
技术介绍
目前四氢嘧啶的生产方法包括发酵法和酶催化法。其中， 嗜盐微生物中具有四氢嘧啶的合成途径，因此广泛应用于四氢嘧啶的发酵法生产 中。Sauer T等采用"细菌挤奶法"高密度发酵获得了较高产量的四氢嘧啶，即高渗透压下 培养细菌、然后低渗冲击释放溶质、再将菌体重新高渗培养、低渗冲击释放溶质，依次循环 多至8-9次，获得产物。朱皖宜（201310416404. 4)等公开了一种可用于生产四氢嘧啶的新 的盐单胞菌Halomonas sp. HS-2255及其突变株，保藏号为CGMCCNo. 6248。该菌株在含有可 同化的碳源和氮源且较低的NaCl含量的培养基中具有较高的四氢嘧啶产量，并且副产物 羟基四氢嘧啶的含量较低。 酶催化法是通过在大肠杆菌中表达四氢嘧啶合成基因簇ectABC以获得具有相 应酶活性的全细胞或粗酶液，以天冬氨酸为前体物催化合成四氢嘧啶的过程。董志扬 等（201310518176. 1,201310534045. 2)采用利用 E.coli BW-pBAD-e本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种产生四氢嘧啶的基因工程菌，其特征在于：为具有特定基因型的大肠杆菌，包含来源于伸长盐单胞菌ectABC基因；lysA、thrA、iclR三个基因缺陷型；具有lac启动子控制的谷氨酸棒状杆菌lysC基因；trc启动子控制的ppc基因，其中，所述编码基因ectA的核苷酸序列为序列表400<1>所示序列；所述编码基因ectB的核苷酸序列为序列表400<2>所示序列；所述编码基因ectC的核苷酸序列为序列表400<3>所示序列；所述编码基因thrA的核苷酸序列为序列表400<4>所示序列；所述编码基因lysA的核苷酸序列为序列表400<5>...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：谢希贤，陈宁，宁义科，范晓光，吴雪娇，徐庆阳，张成林，
申请(专利权)人：天津科技大学，
类型：发明
国别省市：天津;12