包含支原体抗原的免疫原性组合物制造技术

本发明专利技术涉及一种免疫原性组合物，其包含：a)一或多种猪鼻支原体(M.hyorhinis)抗原及一或多种猪滑液支原体(M.hyosynoviae)抗原；及b)医药上可接受的载剂。进一步，本发明专利技术涉及一种免疫原性组合物，其包含：a)一或多种选自以下组的支原体菌的支原体抗原：猪鼻支原体、猪肺炎支原体及猪滑液支原体；及b)真核细胞系统的一或多种组份。而且，本发明专利技术还提供了一种免疫原性组合物，其通过包含以下的方法获得：a)在低血清真核细胞系统中培养选自以下组的支原体菌：猪鼻支原体、猪肺炎支原体、猪滑液支原体及其任一组合；b)获得所述支原体菌的抗原；及c)添加医药上可接受的载剂。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利说明】包含支原体抗原的免疫原性组合物
技术介绍
支原体（Mycoplasma)属菌属于柔膜菌纲（Mollicutes)且代表一组源自厚壁菌门 (Firmicutes)谱系之生物体。柔膜菌纲系最小自主复制生物体，其在结构上与其它真细菌 之不同之处在于其缺少细胞壁。业内认为其单膜表面系在复杂免疫活性宿主环境中介导适 应及存活之关键界面。此外，柔膜菌纲具有小基因组及数目有限之代谢路径。因此，亦将支 原体属成员描述为"最小自我复制生物体"。然而，尽管其非常简单，多种支原体菌系人类及 多种动物之病原体。与其它毒力主要取决于毒素、侵袭素及细胞溶素之病原性细菌相比，病 原性支原体菌似乎不具有该等典型主要毒力因子（Chambaud，I.等人，2001，Nucleic Acids Res. 29:2145-2153, Fraser 等人，1995, Science 270:397-403)。目前可获得之对容许病原 性支原体引起宿主细胞损伤、发炎及疾病之分子机制及效应物之了解极少。 病原性支原体主要引起人类及动物之非典型肺炎、泌尿生殖道感染及 关节炎（Blanchard, A?及 G.F.Browning(编辑）.2005.Mycoplasmas:Molecular biology, pathogenicity and strategies for control. Horizon Bioscience, Wymondham U. K. ；Kobisch M.及 Friis N. F. 1996, Swine mycoplasmoses, Rev. Sci. Tech. Off. Int. Epiz. 15, 1569-1605)。已知该等症状之再活化或加重会反复并逐渐转变成慢性疾病， 且因此藉由早期诊断及早期治疗预防或治疗加重或再活化非常重要。猪肺炎支原体 (M. hyopneumoniae)系地方性肺炎之病因。在猪中，其因体重增长降低及饲料效率低而系 最常见且经济上最重要之疾病之一。该疾病引起肺损害、慢性咳嗽、毛色无光、生长迟滞及 持续数周之不兴旺外观。肺损害、尤其在腹侧顶叶及心叶中之损害之特征在于上皮细胞增 生及单核细胞之血管周及细支气管周累积增加。猪呼吸道之另一常见支原体猪鼻支原体 (M. hyorhinis)可引起仔猪之多发性衆膜炎及关节炎。猪滑液支原体（M. hyosynoviae) - 般位于扁桃体中且可引起关节炎疾病，从而导致经济损失。猪滑液支原体系自关节及咽/ 扁桃体样品分离且可在血液及关节液中诱导抗体。牛支原体（Mbovis)被认为系致病性更 强之支原体物种中之一者且在世界上造成显著经济损失。支原体引起所有年龄之牛之严重 临床病征。牛支原体系发现引起牛之肺炎、乳腺炎及关节炎之最常见支原体病原体，且其病 因学作用与母牛及公牛之耳炎、角膜结膜炎、滑膜炎及生殖障碍有关。 由于支原体缺少细胞壁，许多靶向细胞壁合成之常见抗生素（例如青霉素或其它 0 _内酰胺抗生素）对其无影响。实际使用之支原体感染之治疗剂系一些抗生素，例如基于 大环内酯或基于新喹诺酮或基于四环素之抗生素，但该等抗生素具有严重不良效应，例如 抗药性菌株之出现，其导致支原体感染变严重同时预期治疗效应不足，且成为转变成慢性 疾病的病因。 此外，疫苗接种系控制支原体感染之有效方法。先前文献中已阐述有效抵抗若干 种支原体菌之疫苗。W02009058833 (A2)例示性地阐述用于疫苗接种之减毒无毒力牛支原体 菌菌株。此外，W02009126356(A2)阐述抵抗猪肺炎支原体（Mycoplasma hyopneumoniae)之 免疫原性组合物。然而，业内需要针对多种病原体提供保护之有效组合疫苗。业内非常需 要该等组合疫苗来使针对多种病原体提供保护所需之免疫数目降至最低，降低施用成本， 并提高接受率及覆盖率。然而，抗原干扰问题使多组份疫苗之研发更加复杂。特定而言，抗 原干扰系指观察到施用多种抗原经常导致对某些抗原之反应相对于在个别施用该等抗原 时观察到之免疫反应有所减小。 因此，业内需要针对多种病原体提供保护之有效组合疫苗。 专利技术详沐 在阐述本专利技术各方面之前，必须注意，除非上下文明确指示其它含义，否则如在本 文中及在随附申请专利范围中使用之单数形式"一（a) "、"一（an)"及"该（the)"包括复 数。因此，例如，在提及"一抗原"时包括复数种抗原，在提及"细胞"时系指一或多个细胞 及本领域技术人员已知之其等效物，等等。除非另有定义，否则本文中所使用之所有技术及 科学术语皆具有熟习本专利技术所属领域技术者一般理解之相同意义。尽管在本专利技术之实践或 测试中可使用任何与本文所述之方法及材料类似或等效之彼等，但现在阐述较佳方法、装 置及材料。本文所提及之所有出版物皆系以引用方式并入本文中，用于阐述及揭示该等出 版物中所报导可结合本专利技术使用之细胞系、载体及方法之目的。本文中所有内容皆不应视 为承认该揭示内容由于先前专利技术而有资格先于本专利技术。 本专利技术解决先前技术中固有之问题并提供技术现况之独特进步。概言之，本专利技术 提供免疫原性组合物，其包含：a) -或多种猪滑液支原体抗原及一或多种选自由猪肺炎支 原体及猪鼻支原体组成之群之抗原及其组合；以及b)医药上可接受之载剂。 此外，本专利技术提供免疫原性组合物，其包含：a) -或多种猪鼻支原体抗原及一或 多种猪滑液支原体抗原；以及b)医药上可接受之载剂。 有利地，本专利技术所提供之实验数据揭示本文所提供免疫原性组合物之功效及没有 抗原干扰。特定而言，在施用包含猪鼻支原体、猪肺炎支原体及猪滑液支原体抗原之免疫原 性组合物后，已显示关于猪鼻支原体及猪肺炎支原体之功效没有干扰。 因此，根据一方面，本申请提供免疫原性组合物，其包含a) -或多种猪鼻支原体 抗原；一或多种猪滑液支原体抗原；b) -或多种猪肺炎支原体抗原；以及c)医药上可接受 之载剂。 术语"免疫原性组合物"系指包含至少一种抗原之组合物，其引发被施用该免疫原 性组合物之宿主之免疫反应。该免疫反应可为细胞和/或抗体介导之针对本专利技术免疫原性 组合物之免疫反应。该宿主亦被称为"对象"。较佳地，本文所阐述或提及之任一宿主或对 象系动物。 通常，"免疫反应"包括（但不限于）以下效应中之一或多者：特异性指向本专利技术 免疫原性组合物中所包括抗原之抗体、B细胞、辅助性T细胞、抑制性T细胞和/或细胞毒 性T细胞和/或y - S T细胞之产生或活化。较佳地，宿主将展示保护性免疫反应或治疗反 应。 "保护性免疫反应"将显示为受感染宿主通常展示之临床病征之减少或缺少、较短 恢复时间和/或缩短之感染性持续时间或组织或体液中降低之病原体效价或受感染宿主 之排泄。 若宿主展示保护性免疫反应而使得对新感染之抗性将增强和/或疾病之临床严 重度降低，则将免疫原性组合物称为"疫苗"。 术语"感染"或"受感染的"系指对象被病原体（即猪鼻支原体或猪鼻支原体及猪 滑液支原体或猪鼻支原体、猪肺炎支原体及猪滑液支原体）感染。 "治疗反应"将显示为在宿主已被通常引起临床病征之病原体（例如支原体）感染 时该宿主通常展示之该（等）临床病征之减少和/或治愈。 术语"支原体"为本领域技术人员已知。"支原体"系指一细菌属，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种免疫原性组合物，其包含：a)一或多种猪鼻支原体(M.hyorhinis)抗原及一或多种猪滑液支原体(M.hyosynoviae)抗原；及b)医药上可接受的载剂。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：D·M·M·乔丹，B·T·马丁森，C·M·米伦塞勒，A·纽鲍尔，A·V·耶尔，
申请(专利权)人：勃林格殷格翰动物保健有限公司，
类型：发明
国别省市：德国;DE