酰化胰高血糖素类似物制造技术

本发明专利技术涉及酰化胰高血糖素类似物。本发明专利技术提供了用于促进体重减轻或防止体重增加以及用于治疗糖尿病及相关代谢疾病的材料和方法。特别地，本发明专利技术提供了在这些方法中有效的新型酰化胰高血糖素类似物肽。所述肽可通过具有比人胰高血糖素更高的针对GLP-1受体的选择性来介导其作用。

【技术实现步骤摘要】
【专利说明】 本申请是申请日为2010年6月24日、申请号为"201080038110. 7"、专利技术名 称为"酰化胰高血糖素类似物"的中国专利申请的分案申请，原申请是国际申请PCT/ DK2010/000099的中国国家阶段申请。
本专利技术涉及酰化胰高血糖素类似物及其医疗用途，例如在治疗肥胖症和糖尿病中 的用途。
技术介绍
肥胖症和糖尿病是日益加重的全球性健康问题，而且它们与多种疾病相关，特别 是心血管疾病（cardiovascular disease，CVD)、阻塞性睡眠窒息、中风、外周动脉疾病、微 血管并发症和骨关节炎。 全球有2. 46亿人患有糖尿病，预计到2025年将会有3. 80亿人患糖尿病。许多人 有其他心血管风险因素，包括高/异常LDL和甘油三酯以及低HDL。 在患有糖尿病的人中，心血管疾病导致约50%的死亡，而且与肥胖症和糖尿病相 关的发病率和死亡率突显了对有效治疗选择的医疗需要。 前胰高血糖素原（preproglucagon)是158个氨基酸的前体多肽，其在组织中被差 异性加工而形成多种结构上相关的胰高血糖素原（proglucagon)衍生肽，包括胰高血糖素 (glucagon，Glu)、胰高血糖素样肽-I (GLP-I)、胰高血糖素样肽-2 (GLP-2)和胃泌酸调节素 (〇Xynt〇m〇dulin，0XM)。这些分子参与多种生理功能，包括葡萄糖体内平衡、胰岛素分泌、胃 排空和肠生长，以及食物摄取调节。 胰高血糖素是29个氨基酸的肽，其对应于前胰高血糖素原的53至81位氨基酸， 并具有序列 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Ar g-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr。胃泌酸调节素（OXM)是 37 个氨 基酸的肽，其包含胰高血糖素完整的29个氨基酸序列以及八肽羧基端延伸（前胰高血糖 素原的82至89位氨基酸，其序列为Lys-Arg-Asn-Arg-Asn-Asn-Ile-Ala，被称为"中间肽 IQntervening peptide 1)"或IP-I ;因此，人胃泌酸调节素的完整序列为His-Ser-Gln-G Iy-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Va I-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr-Lys-Arg-Asn-Arg-Asn-Asn-Ile-Ala)。GLP-1 的主要生物活 性片段作为30个氨基酸的C端酰胺化肽而产生，其对应于前胰高血糖素原的98至127位 氨基酸。 胰高血糖素帮助维持血液中的葡萄糖水平，这通过结合肝细胞上的胰高血糖素受 体并经由糖原分解使肝释放以糖原形式储存的葡萄糖来实现。随着这些储存的耗尽，胰高 血糖素刺激肝通过糖异生作用合成额外的葡萄糖。这些葡萄糖被释放入血流，防止低血糖 的发生。此外，已证明胰高血糖素增加脂类分解并减轻体重。 GLP-I通过增加葡萄糖刺激的胰岛素分泌来降低升高的血液葡萄糖水平，并主要 通过减少食物摄取来促进体重减轻。胃泌酸调节素响应于食物摄入而释放进血液中，并与食物卡路里含量成比例。胃 泌酸调节素的作用机制还不是很清楚。尤其是不清楚该激素的作用是否只通过胰高血糖素 受体和GLP-I受体介导，还是通过一种或更多种尚未鉴定出的受体介导。 已证明另一些肽结合并激活胰高血糖素和GLP-I受体（Hjort等，Journal of Biological Chemistry，269, 30121-30124,1994)，而且抑制体重增加并减少食物摄取（TO 2006/134340 ;W0 2007/100535 ;W0 2008/101017, WO 2008/152403, WO 2009/155257 和 WO 2009/155258)。 已证明肽的稳定化为几种药物提供更好的药代动力学特性。尤其已证明添加一个 或更多个聚乙二醇（PEG)或酰基能延长肽（例如，GLP-I和具有短血浆稳定性的其他肽）的 半衰期。 在TO 00/55184A1和TO 00/55119中公开了一系列肽（尤其是GLP-1)的 酰化方法。Madsen 等（J. Med. Chem. 2007, 50,6126-6132)描述 了在第 20 位酰化的 GLP-I (Liraglutide，利拉鲁肽）并提供了关于其稳定性的数据。 在 W02007/100535、W008/071972 和 Druce，M R 等，Endocrinology2009,150 (4)， 1712-1721中，也证明通过PEG化和C端酰化来使OXM稳定化能改善选定类似物的药代动力 学特性。 最近已证明，胰高血糖素类似物的PEG化对测试化合物的药代动力学特性有显著 作用（W02008/101017)，但也干扰这些化合物的效力。
技术实现思路
本专利技术提供具有下式的化合物： R1-Z-R2 其中R1是H、C η烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基； R2是 OH 或 NH2; 以及Z是具有式I的肽 His-X2-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-X12-Tyr-Leu-Asp-X16-X17-Al a-Ala-X20-X21-Phe-Val-X24-Trp-Leu-X27-X28-Ala-X30 ； (I) 其中 X2 选自 Aib 或 Ser; X12 选自 Lys、Arg 和 Leu ; X16 选自 Arg 和 X; X17 选自 Arg 和 X; X20 选自 Arg、His 和 X ; X21 选自 Asp 和 Glu ; X24 选自 Ala 和 X; X27 选自 Leu 和 X ; X28 选自 Arg 和 X; X30是X或不存在； 其中 X16、X17、X20、X24、X27、X28 和 X30 中的至少一个是 X ; 以及其中每个残基X独立地选自：Glu、Lys、Ser、Cys、Dbu、Dpr和Orn ; 其中至少一个残基X的侧链与具有下式的亲脂取代基缀合： (i)Z1，其中Z1是与所述X的侧链直接缀合的亲脂部分；或 (U)Z1Z2,其中Z1是亲脂部分，Z 2是间隔物（spacer)，以及Z1通过Z2与所述X的 侧链缀合； 前提是 Z 不是 HSQGTFTSDYSKYLDS-K (十六烷酰基-γ -Glu) -AAHDFVEWLLRA。 Χ30可以存在或不存在。在Χ30存在的那些实施方案中，可期望它是Lys。 在某些实施方案中，任何残基X (尤其是与亲脂取代基缀合的任何残基X)独立地 选自 Lys、Glu 或 Cys。 在某些实施方案中， X16 选自 Glu、Lys 和 Ser ; X17 选自 Lys 和 Cys ; X20 选自 Hi s、Lys、Arg 和 Cys ; X24 选自 Lys、Glu 和 Ala ; X27 选自 Leu 和 Lys ;和 / 或 X28 选自 Ser、Arg 和 Lys。 式I的肽中可存在的具体残基组合本文档来自技高网...

【技术保护点】
化合物，其具有式：R1‑Z‑R2其中R1是H、C1‑4烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基；R2是OH或NH2；以及Z是具有式I的肽His‑X2‑Gln‑Gly‑Thr‑Phe‑Thr‑Ser‑Asp‑Tyr‑Ser‑X12‑Tyr‑Leu‑Asp‑X16‑X17‑Ala‑Ala‑X20‑X21‑Phe‑Val‑X24‑Trp‑Leu‑X27‑X28‑Ala‑X30；(I)其中X2选自Aib和Ser；X12选自Lys、Arg或Leu；X16选自Arg和X；X17选自Arg和X；X20选自Arg、His和X；X21选自Asp和Glu；X24选自Ala和X；X27选自Leu和X；X28选自Arg和X；X30是X或不存在；其中X16、X17、X20、X24、X27、X28和X30中的至少一个是X；以及其中每个残基X独立地选自：Glu、Lys、Ser、Cys、Dbu、Dpr和Orn；其中至少一个残基X的侧链与具有下式的亲脂取代基缀合：(i)Z1，其中Z1是直接与所述X的侧链缀合的亲脂部分；或者(ii)Z1Z2，其中Z1是亲脂部分，Z2是间隔物，以及Z1通过Z2与所述X的侧链缀合；前提是Z不是HSQGTFTSDYSKYLDS‑K(十六烷酰基‑γ‑Glu)‑AAHDFVEWLLRA。...

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：迪特·里贝尔，埃迪·迈尔，延斯·罗森格伦·道高，马里耶·斯科夫高，雅各布·林德·托尔伯格，吉塔·坎彭，卡米拉·埃特贝里·贝克，
申请(专利权)人：西兰制药公司，
类型：发明
国别省市：丹麦;DK