糖链加成连接子、含有糖链加成连接子与生理活性物质的化合物或其盐、以及其制造方法技术

本发明专利技术的目的是提供载体连接子，所述载体连接子能够使生理活性物质的水溶性提高，而且，能够在不依赖于光或酶的切断下，于特定条件下使生理活性物质更快速地释放。本发明专利技术提供新颖的糖链加成连接子，其加成有糖链作为载体。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】糖链加成连接子、含有糖链加成连接子与生理活性物质的化合物或其盐、以及其制造方法
本专利技术关于糖链加成连接子(linker)、含有糖链加成连接子及生理活性物质的化合物或其盐、及其制造方法。
技术介绍
近年，进行使用生理活性物质的各种疫苗的开发。然而，在这些生理活性物质中，由于水溶性低，存在着例如无法进行(充分)过滤器灭菌的问题。而且，使生理活性物质溶解于水溶液或由水溶液所制备的乳液，而施用至人体等生物体存在着困难。为了使生理活性物质等药物的水溶性提高，正尝试各种方法。已知，例如，将水溶性高的载体(carrier)以人工方式直接加成于药物的载体-药物偶联物(conjugate)(即所谓的药物衍生物)。就载体而言，已知有亲水性氨基酸序列或聚乙二醇(PEG)等。然而，在使载体与药物直接键合的药物衍生物时，该药物衍生物的立体结构与原来药物的立体结构不同。结果，药物衍生物与原来药物分子相比，显示不同的药代动力学的特性、免疫原性(immunogenicity)的特性、毒物学或药理学的特性等。已熟知，例如，在将药物衍生物作为疫苗时，与原有的药物分子相比，其药物衍生物的抗原性通常降低。而且，加成有作为载体的PEG(PEG化)的药物具有抗生物分解性。因此，若将PEG化药物持续施用至生物体内，则其会蓄积于生物体内，而有对生物体产生药害的危险性，其生物适应性仍然是不充分的(专利文献1)。此外，PEG具有分子量分布(多分散的性质(polydispersenature))。若将药物PEG化，由于所加成的PEG的结合位置或分子量不同，则生成多种活性不同的单体异构体(manydifferentmonomericisoforms：结构不同但功能相同的蛋白质)。所生成的这些异构体在与药物的受体分子的结合方面，有可能彼此竞争(非专利文献1)。亦正开发将药物与载体经由连接子部分键合而成的载体连接子-药物偶联物。这些偶联物可被设计成在目标部位(血中等)作用时，载体-连接子部分与药物的间的键会被切断，而释放药物本身。在利用此种载体连接子-药物偶联物时，在载体连接子部分与药物间的键的切断上，使用光或酶作为触发物(trigger)。然而，在使用光的情况，难以对目标部位照射光，亦担心光对生物体造成损伤。而且，在酶性切断的情况，已知酶量在个体间、施用部位均有很大差异。所以，会有药物治疗的效果在患者间发生差异的问题。对于这些问题，就载体连接子-药物的偶联物而言，报告指出载体连接子部分经由酰胺基与生理活性物质部分键合(专利文献2)。专利文献2所公开的技术为了可控制载体-连接子部分与药物之间键的切断，利用通过载体连接子内的分子内催化作用而自动水解(autohydrolysis)。载体连接子部分与生理活性物质部分之间键的切断机制基于：通过形成环状酰亚胺的环化-活化而切断酰胺键。[现有技术文献][专利文献][专利文献1]日本特表第2007-530569号公报[专利文献2]国际公开第2009/095479号小册子[非专利文献][非专利文献1]BarryByrne等,DrugDiscoveryToday,(2007),Vol.12,319-326页
技术实现思路
[专利技术所要解决的问题]鉴于如上所述的课题，本专利技术提供可使生理活性物质的水溶性提高，而且，于特定条件下能够更迅速释放生理活性物质的载体连接子。[用于解决问题的手段]专利文献2不过是确认大量的具有各种结构的载体连接子-药物偶联物通过切断酰胺键而释放药物本身。由于专利文献1的多数实施例系使用PEG作为载体，其并未着眼于载体的生物分解性。此外，由于专利文献1的多数实施例使用难以溶于水的高级脂肪酸作为载体，其亦未言及有关载体连接子-药物的偶联物、或载体连接子本身的溶解性。本专利技术人等专心研究的结果，发现了载体连接子，所述载体连接子使生理活性物质的水溶性提高，并且不依存于光或酶的切断，于特定条件下，能够释放生理活性物质。亦即，本专利技术在其一方面中，提供与至少具有1个羧基的生理活性物质键合用的糖链加成连接子，该糖链加成连接子以下述式(A)表示：X-R1-Y-R2(A)[式(A)中，X意指具有离去基团的氧原子(O)或具有离去基团的硫原子(S)；R1意指经取代或未经取代的C1至C5烷基、经取代或未经取代的C5至C16芳基、经取代或未经取代的C5至C16杂芳基、经取代或未经取代的C2至C5烯基、或经取代或未经取代的C2至C5炔基，或者R1意指-R3-R4-、-R4-R5-、或-R3-R4-R5-，其中，R3及R5各自为经取代或未经取代的C1至C5烷基、经取代或未经取代的C2至C5烯基、或经取代或未经取代的C2至C5炔基，R4为经取代或未经取代的C5至C16芳基、经取代或未经取代的C5至C16杂芳基、或硫原子(S)；Y可存在或不存在，Y存在时，Y意指-CO-、或-CONH-(但是，C与R1键合，N与R2键合)；R2意指糖链、糖链加成的氨基酸、或糖链加成的多肽，或者R2意指-R6-R7，其中，R6为糖链、糖链加成的氨基酸、或糖链加成的多肽，R7为氢原子(H)、-NH2、经取代或未经取代的C1至C5烷基、经取代或未经取代的C5至C16芳基、经取代或未经取代的C5至C16杂芳基、核酸、或PEG]。该糖链加成连接子的特征为，通过位于该氧原子(O)或硫原子(S)处的离去基团的脱离，可与该生理活性物质的羧基键合。而且，在本专利技术的糖链加成连接子的一实施方案中，该糖链加成连接子的特征为，其是以下述式(A)表示的糖链加成连接子：X-R1-Y-R2(A)[式(A)中，X意指具有离去基团的硫原子(S)，R1意指-R3-R4-、-R4-R5-、或-R3-R4-R5-，其中，R3及R5为经取代或未经取代的C1至C5烷基、经取代或未经取代的C2至C5烯基、或经取代或未经取代的C2至C5炔基，R4为经取代或未经取代的C5至C16芳基、经取代或未经取代的C5至C16杂芳基、或硫原子(S)；Y可存在或不存在，Y存在时，Y意指-CO-、或-CONH-(但是，C与R1键合，N与R2键合)；R2为糖链、糖链加成的氨基酸、或糖链加成的多肽]。而且，于本专利技术的糖链加成连接子的一实施方案中，该糖链加成连接子的特征为，其是以下述式(A)表示的糖链加成连接子：X-R1-Y-R2(A)[式(A)中，X意指具有离去基团的氧原子(O)或具有离去基团的硫原子(S)；R1意指-R3-R4-、或-R4-R5-，其中，R3及R5为经取代或未经取代的C1至C5烷基、经取代或未经取代的C2至C5烯基、或经取代或未经取代的C2至C5炔基，R4为经取代或未经取代的C5至C16芳基、或经取代或未经取代的C5至C16杂芳基；Y可存在或不存在，Y存在时，Y意指-CO-、或-CONH-(但是，C与R1键合，N与R2键合)；R2为糖链、糖链加成的氨基酸、或糖链加成的多肽]。而且，于本专利技术的糖链加成连接子的一实施方案中，该糖链加成连接子的特征为，在该R2或R6的「糖链加成的氨基酸、或糖链加成的多肽」中，糖链与氨基酸或多肽中的Asn或Cys键合。而且，于本专利技术的糖链加成连接子的一实施方案中，该糖链加成连接子的特征为，该R2或R6的「糖链、糖链加成的氨基酸、或糖链加成的多肽」中的糖链由4个以上的糖残基组成。而且本文档来自技高网...

【技术保护点】
糖链加成连接子，所述糖链加成连接子用于与至少具有1个羧基的生理活性物质键合，所述糖链加成连接子以下述式(A)表示：X‑R1‑Y‑R2  (A)式(A)中，X表示具有离去基团的氧原子(O)或具有离去基团的硫原子(S)；R1是经取代或未经取代的C1至C5烷基、经取代或未经取代的C5至C16芳基、经取代或未经取代的C5至C16杂芳基、经取代或未经取代的C2至C5烯基、或者经取代或未经取代的C2至C5炔基，或者，R1表示‑R3‑R4‑、‑R4‑R5‑、或‑R3‑R4‑R5‑，其中R3及R5各自表示经取代或未经取代的C1至C5烷基、经取代或未经取代的C2至C5烯基、或经取代或未经取代的C2至C5炔基，R4表示经取代或未经取代的C5至C16芳基、经取代或未经取代的C5至C16杂芳基、或硫原子(S)；Y可以存在或不存在，Y存在时，Y表示‑CO‑、或‑CONH‑(但是，C与R1键合，N与R2键合)；R2是糖链、糖链加成的氨基酸、或糖链加成的多肽，或者R2表示‑R6‑R7，其中，R6表示糖链、糖链加成的氨基酸、或糖链加成的多肽，R7表示氢原子(H)、‑NH2、经取代或未经取代的C1至C5烷基、经取代或未经取代的C5至C16芳基、经取代或未经取代的C5至C16杂芳基、核酸、或PEG；所述糖链加成连接子通过位于所述氧原子(O)或硫原子(S)处的离去基团的脱离，而能够与所述生理活性物质的羧基结合。...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.11.30 JP 2012-2637521.糖链加成连接子，所述糖链加成连接子用于与至少具有1个羧基的生理活性物质键合，其中，所述糖链加成连接子是以下述式(A)表示的糖链加成连接子：X-R1-Y-R2(A)式(A)中，X表示具有离去基团的氧原子(O)，离去基团选自氢原子和锂、钠、钾、铷、铯、钫以及银的一价阳离子；或具有离去基团的硫原子(S)，离去基团选自氢原子和锂、钠、钾、铷、铯、钫以及银的一价阳离子；R1表示芳基，或-CH2CH2SCH2-；Y表示-CO-；以及R2表示NH-糖链、糖链加成的Asn、糖链加成的Cys、或其中于C末端加成1个或多个氨基酸的糖链加成的Asn或糖链加成的Cys。2.如权利要求1所述的糖链加成连接子，其中，所述R2所表示的“NH-糖链”、“糖链加成的Asn”、“糖链加成的Cys”、或“其中于C末端加成1个或多个氨基酸的糖链加成的Asn或糖链加成的Cys”中的糖链由4个以上的糖残基构成。3.如权利要求1所述的糖链加成连接子，其中，所述R2所表示的“NH-糖链”、“糖链加成的Asn”、“糖链加成的Cys”、或“其中于C末端加成1个或多个氨基酸的糖链加成的Asn或糖链加成的Cys”中的糖链是双触角复合型糖链、3触角复合型糖链、或4触角复合型糖链。4.如权利要求3所述的糖链加成连接子，其中，所述糖链是双触角复合型糖链，所述双触角复合型糖链选自由二唾液酸糖链、单唾液酸糖链、无唾液酸糖链、二(N-乙酰葡糖胺)糖链及二甘露糖糖链所构成的组。5.如权利要求1所述的糖链加成连接子，其中所述R2所表示的“NH-糖链”、“糖链加成的Asn”、“糖链加成的Cys”、或“其中于C末端加成1个或多个氨基酸的糖链加成的Asn或糖链加成的Cys”中的糖链是以下述式表示的糖链：式中，R10及R11是相同或不同的，各自表示Ac表示乙酰基。6.如权利要求1所述的糖链加成连接子，其中，在所述“糖链加成的Asn”、“糖链加成的Cys”、或“其中于C末端加成1个或多个氨基酸的糖链加成的Asn或糖链加成的Cys”中的糖链不经由连接子而与Asn或Cys键合。7.化合物或其盐，所述化合物含有来自权利要求1至6中任一项所述的糖链加成连接子的糖链加成连接子部分以及生理活性物质部分；其中，所述生理活性物质至少具有1个羧基；所述糖链加成连接子部分通过位于所述氧原子(O)或硫原子(S)处的离去基团的脱离，并通过与所述生理活性物质部分的羧基形成酯键或硫酯键，而与所述生理活性物质部分键合。8.如权利要求7所述的化合物或其盐，其中，所述生理活性物质是生物高分子。9.如权利要求7所述的化合物或其盐，其中，所述生物高分子选自由蛋白质、多肽、多核苷酸、及肽核酸所构成的组。10.如权利要求7所述的化合物或其盐，其中，所述化合物或其盐与未修饰的生理活性物质相比，具有提高的水溶性。11.如权利要求10所述的化合物或其盐，其中，所述提高的水溶性，在摩尔浓度方面，是所述未修饰的生理活性物质的10至1,000,000倍。12.如权利要求7所述的化合物或其盐，其中，在所述糖链加成连接...

【专利技术属性】
技术研发人员：落合洋文，吉田健太，
申请(专利权)人：株式会社糖锁工学研究所，
类型：发明
国别省市：日本;JP