基于超声分散、差速离心和光谱技术测定蛋白质溶解度的方法技术

本发明专利技术公开了基于超声分散、差速离心和光谱技术测定蛋白质溶解度的方法。该方法建立蛋白质浓度标准曲线；然后制备蛋白质分散样品：每个蛋白质样本分别置于体积为V溶剂中，得到相应质量添加浓度为的样品；再进行差速离心以及样品蛋白质浓度的光谱测定；最后进行蛋白质溶解度的计算：将蛋白质样品质量添加浓度按由小到大的顺序纵行排列，离心速度j按由小到大的顺序横向排列，求出每行的标准方差si，标准方差si随蛋白质样品质量添加浓度小到大呈一次指数增加趋势，计算出曲率最大点对应的浓度为蛋白质的溶解度。该方法测定蛋白质的溶解度，稳定、快速、准确。

【技术实现步骤摘要】
基于超声分散、差速离心和光谱技术测定蛋白质溶解度的方法
本专利技术涉及一种测定蛋白质溶解度的方法，特别是涉及一种基于超声分散、差速离心和光谱技术的蛋白质溶解度快速测定方法。
技术介绍
蛋白质作为有机大分子化合物，在水中以分散态(胶体态)存在，因此，蛋白质在水中无严格意义上的溶解度，只是将蛋白质在水中的分散量或分散水平相应的称为蛋白质的溶解度。蛋白质溶解度的大小在实际应用中非常重要，因为溶解度特性数据在确定天然蛋白质的提取、分离和纯化时是非常有用的，蛋白质变性的程度也可以通过蛋白质的溶解行为的变化作为评价指标。此外，蛋白质在饮料中的应用也与其溶解性能有直接的关系。蛋白质在溶液中的溶解情况，可以将其分为两种：无丁达尔现象和具有明显丁达尔现象的蛋白质分散体。前者说明蛋白质在该溶液中的分散很好，分子基本上完全舒展开；后者则是由于蛋白质分子在溶液体系中无法分散伸展开，以颗粒状或团聚体状存在，结果其光散射性较好，出现明显的丁达尔现象。蛋白质溶解度的常用表示方法为蛋白质分散指数(proteindispersibilityindex，PDI)、氮溶解指数(nitrogensolubilityinde本文档来自技高网...

【技术保护点】
基于超声分散、差速离心和光谱技术测定蛋白质溶解度的方法，其特征在于包括如下步骤：(1)建立蛋白质浓度标准曲线：将蛋白质溶入溶剂体系中，采用光谱技术测量其浓度，建立蛋白质浓度的标准曲线y＝ax+b，其中y代表特征吸收峰值，x代表蛋白质浓度；a、b分别为标准曲线的斜率和截距，由标准曲线待定系数法确定；(2)蛋白质分散样品的制备：根据分散过程蛋白质在所述溶剂体系中的溶解情况，从小到大等质量间隔称取蛋白质样品7～10个，样品质量分别记为m1、m2、…mi，其中i＝7～10，每个蛋白质样本分别置于体积为V溶剂中，得到相应质量添加浓度为的样品；将i个样品置于超声场中，在温度为10～60℃，搅拌速度为100...

【技术特征摘要】
1.基于超声分散、差速离心和光谱技术测定蛋白质溶解度的方法，其特征在于包括如下步骤：(1)建立蛋白质浓度标准曲线：将蛋白质溶入溶剂体系中，采用光谱技术测量其浓度，建立蛋白质浓度的标准曲线y＝ax+b，其中y代表特征吸收峰值，x代表蛋白质浓度；a、b分别为标准曲线的斜率和截距，由标准曲线待定系数法确定；(2)蛋白质分散样品的制备：将蛋白质在所选溶剂体系进行超声辅助搅拌预分散，根据分散过程蛋白质在所述溶剂体系中的溶解情况，从小到大等质量间隔称取蛋白质样品7～10个，样品质量分别记为m1、m2、...mi，其中i＝7～10，每个蛋白质样本分别置于体积为V溶剂中，得到相应质量添加浓度为的样品；将i个样品置于超声场中，在温度为10～60℃，搅拌速度为100～500r/min的条件下搅拌分散，形成均一的胶体分散体系；(3)差速离心：离心速度0～3000r/min之间等转速间隔取j个点，j＝6～10，将步骤(2)得到的各样品在选定的j个速度下离心，得到(7～10)×(6～10)个样品；(4)样品蛋白质浓度的光谱测定：分别取步骤(3)离心后得到的上清液，稀释到步骤(1)标准曲线的蛋白质浓度范围内，采用光谱技术测量其特征吸收峰值，代入步骤(1)中标准曲线方程，计算离心后分散体系中各样品对应的质量浓度(5)蛋白质溶解度的计算：将蛋白质样品质量添加浓度按由小到大的顺序纵行排列，离心速度j按由小到大的顺序横向排列，根据步骤(4)中在不同离心速度下离心后每个样品对应的质量浓度求出每行的标...

【专利技术属性】
技术研发人员：江燕斌，魏东伟，刘贵金，霍伟智，范嘉棋，李炳辉，
申请(专利权)人：华南理工大学，
类型：发明
国别省市：广东;44