疯草内生真菌的一对特异性分子检测引物及检测方法技术

本发明专利技术公开了疯草内生真菌的一对特异性分子检测引物以及利用疯草内生真菌的一对特异性分子检测引物对疯草是否被疯草内生真菌感染进行检测的方法，一对特异性分子检测引物包括具有碱基序列的上游引物OmtssuF和下游引物OmtssuR，上游引物OmtssuF和下游引物OmtssuR是在被疯草内生真菌感染的疯草中特异性地扩增出164bp的产物。本发明专利技术根据疯草内生真菌的mtSSU编码序列，设计出了一对分子特异性检测引物，该检测引物特异性强、灵敏度好；本发明专利技术的检测方法通过对待检疯草的DNA进行扩增，可以得到164bp 的条带，对疯草上其他真菌DNA和疯草本身DNA不能扩增出任何产物，能用来快速、准确、便捷地检测疯草样品中是否被疯草内生真菌感染，特异型强、实用性好，对疯草的防治具有重要的意义。

【技术实现步骤摘要】
疯草内生真菌的一对特异性分子检测引物及检测方法
本专利技术属于分子生物学领域，具体涉及疯草内生真菌的一对特异性分子检测引物及检测方法。
技术介绍
疯草（locoweed）是豆科黄芪属（Astragalus）和棘豆属（Oxytropis）有毒植物的总称，是危害草原畜牧业发展最严重的毒草之一。世界范围内疯草主要分布在美国、加拿大、墨西哥、俄罗斯、西班牙等国；在我国，疯草主要分布在西部各省区，具体包括甘肃、内蒙古、宁夏、陕西、四川、青海、西藏和新疆等省区的草原、荒漠和山地。疯草不仅降低草场利用率，造成家畜疯草中毒，而且会加速草场退化，打破草地生态平衡。研究发现由感染并共生于疯草体内的疯草内生真菌（Undifilumoxytropis）产生的苦马豆素（swainsonine）是疯草毒性的主要活性物质。因此，加强疯草内生真菌的检测是防控疯草的基础工作。而传统通过分离和鉴定来检测疯草是否被疯草内生真菌感染的方法，存在时间长、操作繁琐的缺点，因此亟需开发出一种能够准确、快速检测疯草是否被疯草内生真菌感染的分子生物学方法，Cook等2009年利用ITS序列设计了一对引物ITS5和OR1检测疯草内生真本文档来自技高网...

【技术保护点】
疯草内生真菌的一对特异性分子检测引物，其特征在于：包括具有碱基序列的上游引物OmtssuF和下游引物OmtssuR，其核苷酸序列为：SEQ ID NO:1（OmtssuF）：5’‑ CATAGAAAAAAAAATAAACAAACTG ‑3’SEQ ID NO:2（OmtssuR）：5’‑ TGTCTGCCCAGGTTACGG ‑3’；所述上游引物OmtssuF和下游引物OmtssuR是在被疯草内生真菌感染的疯草中特异性地扩增出164bp的产物。

【技术特征摘要】
1.疯草内生真菌的一对特异性分子检测引物，其特征在于：包括具有碱基序列的上游引物OmtssuF和下游引物OmtssuR，其核苷酸序列为：SEQIDNO:1（OmtssuF）：5’-CATAGAAAAAAAAATAAACAAACTG-3’SEQIDNO:2（OmtssuR）：5’-TGTCTGCCCAGGTTACGG-3’；所述上游引物OmtssuF和下游引物OmtssuR是在被疯草内生真菌感染的疯草中特异性地扩增出164bp的产物。2.根据权利要求1所述的疯草内生真菌的一对特异性分子检测引物，其特征在于：所述疯草内生真菌的一对特异性分子检测引物的获得方法为：通过比对疯草内生真菌和近缘真菌的线粒体核糖体小亚基编码序列（mtSSU），在获得疯草内生真菌特异mtSSU序列区段的基础上设计引物，获得疯草内生真菌一对特异性分子检测引物序列。3.利用权利要求1所述疯...

【专利技术属性】
技术研发人员：李彦忠，刘建利，南志标，崔振，
申请(专利权)人：兰州大学，
类型：发明
国别省市：甘肃;62