一种高芽孢率高抗逆性饲用枯草芽孢杆菌固态发酵方法技术

本发明专利技术公开了一种高芽孢率高抗逆性饲用枯草芽孢杆菌固态发酵方法，选用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis CICC 10453)，采用分段温度控制法利用以麸皮为主的固态培养基发酵培养，发酵后无需烘干，直接收集粉碎过筛，即得枯草芽孢杆菌固体成品。本发明专利技术所得菌剂成品中有效枯草芽孢杆菌达到1.0×1010CFU/g以上，芽孢率在95％以上，具有极好的耐酸、耐胆盐及耐高温性能。作为饲料添加剂，本产品能够很大程度上避免饲料加工过程中所造成的不必要损失，同时有利于菌剂通过动物胃部苛刻的强酸环境，在肠道内部发挥有利作用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及饲用微生物发酵工程
，特别涉及一种高芽孢率高抗逆性的饲用枯草芽孢杆菌固态发酵方法。
技术介绍
抗生素在中国具有较高的使用率，其中一半主要应用于医药行业，另一半则应用于养殖业。自20世纪50年代人们发现饲料中添加低浓度的抗生素可以预防动物细菌性疾病的发生并可促进动物生长后，抗生素的应用日益泛滥，继而导致了诸多食品安全及生物安全问题，如药物残留、耐药细菌产生等。 鉴于抗生素滥用引发的一系列问题，人们逐渐将目光转移至微生态制剂。我国动物微生态制剂的研究起步相对较晚，但发展较快。目前国内已有一些科研单位、企业研发并生产出相关饲用微生物，并应用于动物养殖中。 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是一种产芽孢的G+细菌，其菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质，对致病菌或内源性感染的条件性致病菌有明显的抑制作用；能够迅速消耗环境中的游离氧，造成肠道低氧，促进厌氧菌的生长，继而降低肠道pH值，抑制病原微生物的生长；另外枯草芽孢杆菌能够合成维生素B1、B2、B6、烟酸等多种B族维生素，提高动物体内干扰素本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高芽孢率高抗逆性饲用枯草芽孢杆菌固态发酵方法，其特征在于，具体步骤是：(1)菌株：选用枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CICC10453；(2)种子培养：将步骤(1)所述菌株，在营养琼脂培养基上活化培养；之后在无菌条件下挑取单菌落接种至20mL营养肉汤培养基中振荡培养获得一级种子液；将所述一级种子液接种于营养肉汤培养基中扩大培养得到二级种子液；(3)固态发酵培养：将所述二级种子液与营养盐溶液共同接种于固态培养基中，充分混合后将其平铺于浅盘中发酵，发酵完毕直接收集，粉碎过40目筛，即得枯草芽孢杆菌固态发酵成品。

【技术特征摘要】
1.一种高芽孢率高抗逆性饲用枯草芽孢杆菌固态发酵方法，其特征在于，具体步骤是: (1)菌株:选用枯草芽抱杆菌Bacillussubtilis CICC10453 ； (2)种子培养:将步骤(I)所述菌株,在营养琼脂培养基上活化培养；之后在无菌条件下挑取单菌落接种至20mL营养肉汤培养基中振荡培养获得一级种子液；将所述一级种子液接种于营养肉汤培养基中扩大培养得到二级种子液； (3)固态发酵培养:将所述二级种子液与营养盐溶液共同接种于固态培养基中，充分混合后将其平铺于浅盘中发酵，发酵完毕直接收集，粉碎过40目筛，即得枯草芽孢杆菌固态发酵成品。2.根据权利要求1所述的高芽孢率高抗逆性饲用枯草芽孢杆菌固态发酵方法，其特征在于，所述步骤(2)中营养琼脂培养基，组成为牛肉膏0.3%、蛋白胨1.0%、氯化钠0.5%，琼脂2.0 %，蒸馏水配制，pH7.2?7.4 ; 所述步骤(2)中营养肉汤培养基，组成为牛肉膏0.3%、蛋白胨1.0%、氯化钠0.5 %，蒸馏水配制，pH7.2?7.4。3.根据权利要求1所述的高芽孢率高抗逆性饲用枯草芽孢杆菌固态发酵方法，其特征在于，所述步骤(2)中营养琼脂培养基活化培养条件为37°C倒置培养16?24h 级种子培养条件为37°C，160?180rpm振荡培养4?8h ;二级种子培养条件为接种量I?5%，370C，160?180rpm振荡培养3?6h。4.根据权利要求1所述的高芽孢率高抗逆性饲用枯草芽孢杆菌固态发酵方法，其特征在于，所述步骤(2)中一级...

【专利技术属性】
技术研发人员：李卫娟，王计伟，王宇霄，
申请(专利权)人：安佑生物科技集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32