B族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡制造技术

技术编号:10517930 阅读:366 留言:0更新日期:2014-10-08 16:37
本实用新型专利技术公开了一种B族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡,旨在提供一种检测方法简便、灵敏度高且检测结果可靠的B族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡;该试剂卡包括带盒盖的盒体(6),盒体(6)内设有检测试纸,所述的检测试纸包括底板(1),底板(1)上依次衔接有样品垫(2)、抗B族链球菌抗体量子点标记垫(3)、包被膜(4)和吸水垫(5),所述的包被膜(4)上设有一条B族链球菌抗体检测区T线和一条羊抗兔多克隆抗体质控区C线,两条线平行排列;属于量子点荧光标记免疫检测领域。

【技术实现步骤摘要】
B族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡
[〇〇〇1] 本技术公开了一种检测试剂卡,具体的说,是一种测定孕妇宫颈或者阴道中B 族链球菌的检测试剂卡,属于量子点荧光标记免疫检测领域。
技术介绍
B族链球菌(Group B Streptococcus,简称GBS)可引起新生儿败血症、肺炎、脑膜 炎,甚至死亡。在感染后存活的新生儿,还有可能有严重的神经系统后遗症,包括脑积水、智 力障碍、小头畸形、耳聋等。同时,B族链球菌还可引起孕妇感染、引起早产、胎儿发育不良 (低体重儿)、胎膜早破及晚期流产。因此,对孕妇B族链球菌的检测非常重要和必须。目 前,B族链球菌的检测主要有以下三种方法: 1、传统的细菌培养检测法,该方法的检测结果较准确,但检测时间较长,一般需 2-3天才能出来结果,效率较低; 2、PCR检测法,该检测方法简便快速,灵敏度较高,但是,检测时,容易导致交叉扩 增反应,从而出现假阳性结果,所以,需要专业的技术人员和特殊的仪器设备,因此,该方法 的应用范围受到很大的限制; 3、胶体金检测法,该方法操作简单,但是灵敏度低,特别是感染量少的话,可能会 出现漏检、误检的情况,不利于胎儿的优生优育。
技术实现思路
针对上述不足,本技术的目的在于提供一种检测方法简单、快速,灵敏度高, 检测结果可靠的B族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡。 为解决上述技术问题,本技术提供的技术方案是这样的:该B族链球菌量子 点免疫层析检测试剂卡,包括带盒盖的盒体,盒体内设有检测试纸,所述的盒体的盒盖上设 有加样孔和结果观察窗口;所述的检测试纸包括底板,底板上依次衔接有样品垫、抗B族链 球菌抗体量子点标记垫、包被膜和吸水垫,所述的包被膜上设有一条B族链球菌抗体检测 区T线和一条羊抗兔多克隆抗体质控区C线,两条线平行排列。 进一步的,上述的B族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡,所述的包被膜两端分 别与吸水垫和抗B族链球菌抗体量子点标记垫相互交叠连接,在抗B族链球菌抗体量子点 标记垫上压贴有样品垫。 进一步的,上述的B族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡,所述的样品垫为玻璃 纤维样品垫。[〇〇1〇] 进一步的,上述的B族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡,所述的包被膜为硝酸 纤维素膜。 进一步的,上述的B族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡,所述的抗B族链球菌抗 体量子点标记垫为包被量子点标记B族链球菌抗体的聚酯纤维素膜。 更进一步的,上述的B族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡,所述的样品垫覆盖 在抗B族链球菌抗体量子点标记垫1mm处,抗B族链球菌抗体量子点标记垫覆盖在包被膜 1mm处,B族链球菌抗体检测区T线距离包被膜左端7mm,羊抗兔多克隆抗体质控区C线距 离包被膜右端8mm,C、T线间距5mm,吸水垫压在包被膜2mm处。 与现有技术相比,本技术所提供的B族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡具 有如下优点: 1、与传统的细菌培养检测法相比:传统的要2-3天,本技术只需要10-15min, 大大缩短了检测时间,提高了工作效率; 2、与PCR检测法相比:不需要大型仪器设备,无需专门技术人员操作,节约了检测 成本; 3、与胶体金法相比:提高了灵敏度和检出率,胶体金检测试剂的灵敏度为 105CFU/mL,本技术检测试剂的灵敏度为103CFU/mL,明显优于胶体金法。 【附图说明】 图1是本技术提供的检测试剂卡结构示意图; 图2是本技术提供的检测试剂卡的盒盖俯视图; 图3是本技术提供的检测试纸结构示意图; 图4是本技术提供的检测试纸俯视图; 图5是本技术提供的检测卡判定结果为阴性时示意图; 图6是本技术提供的检测卡判定结果为阳性时示意图。 其中:底板1,样品垫2,抗B族链球菌抗体量子点标记垫3,包被膜4,吸水垫5, B 族链球菌抗体检测区T线,羊抗兔多克隆抗体质控区C线,盒体6,盒盖61,加样孔71,结果 观察窗口 72。 【具体实施方式】 下面结合具体实施例的方式对本技术的权利要求做进一步的详细说明,但并 不构成对本技术的任何限制,任何人在本技术权利要求范围内所做的有限次的修 改,仍在本技术的权利要求范围之内。 实施例1 本技术提供的一种B族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡,参阅图1至图4, 包括带盒盖的盒体6,为了方便加样和观察检测结果,所述的盒体6的盒盖61上设有加样孔 71和结果观察窗口 72。 盒体6内设有检测试纸,所述的检测试纸包括底板1,底板1为PVC底板,在底板1 上依次衔接有样品垫2、抗B族链球菌抗体量子点标记垫3、包被膜4和吸水垫5,在包被膜 4上设有一条B族链球菌抗体检测区T线和一条羊羊抗兔多克隆抗体质控区C线,两条线平 行排列。为了达到快速、准确的检测结果,所述的样品垫2优选玻璃纤维样品垫;所述的包 被膜4优选硝酸纤维素膜;所述的抗B族链球菌抗体量子点标记垫为包被量子点标记B族 链球菌抗体聚酯纤维素膜。 更具体的说,所述的包被膜4压贴在底板1中间部位,包被膜4的两端分别与吸水 垫5和抗B族链球菌抗体量子点标记垫3相互交叠连接,在抗B族链球菌抗体量子点标记 垫3上压贴有样品垫2。 样品垫2覆盖在抗B族链球菌抗体量子点标记垫1mm左右,抗B族链球菌抗体量 子点标记垫3覆盖在包被膜4约1mm,B族链球菌抗体检测区T线距离包被膜4左端7_, 羊抗兔多克隆抗体质控区C线距离包被膜4右端8mm,C、T线间距5mm,吸水垫压在包被膜 2mm 处。 该B族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡的制备方法: 其中: 1)样品垫的制备方法是:将样品垫裁成20mmX300mm的大小,浸泡在样品垫缓冲 液中,1小时之后取出,于室温干燥16-18小时。 样品垫的缓冲液配方如下:2 % BSA、1 % PVP、0. 5 % Tween溶解于0. 01的 PBS(pH7.4)缓冲液中。 2)抗B族链球菌抗体量子点标记垫的制备方法是: ①用10mM pH8. 4的硼酸缓冲液(2. 5mM硼砂:10mM硼酸=4. 5:5. 5(V:V))将水 溶性羧基量子点8μΜ的QD525稀释至ΙμΜ;加入SOyLlOmg/mL的1-(3-二甲氨基丙 基)-3-乙基碳二亚胺盐酸溶液,室温反应1?2小时。用30kDa的超滤管超滤,除去未反 应的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸,吸取超滤管内剩余液体,加上述缓冲液 恢复为原体积。 ②将抗B族链球菌抗体加入lOOkDa的超滤管中,用0. 05M的pH8. 4的硼酸缓冲液 将抗体浓度调整为4mg/mL。 ③按200 μ g/lmL的量,将步骤②制备的抗体加入到步骤①量子点溶液中,室温反 应1?2小时。 ④按10 μ L/lmL的量,向步骤③中加入10mg/mL的甘氨酸,封闭未偶联抗体的活化 羧基位点,反应30?60min。 ⑤将偶联抗体的量子点溶液加入到30kDa的超滤管中,加入pH9.0浓度0.05M Tris-HCl溶液置换溶液缓冲体系。重复3?5次,恢复终体积为100 μ L。 ⑥将步骤⑤中的溶液在4°C离心18,00取g上清液。 ⑦在步骤⑥所得的上清液中加入100 μ L抗体保存液,所述的保存液为含lwt % BSA,20wt %鹿糖,10wt本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种B族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡,包括带盒盖的盒体(6),盒体(6)内设有检测试纸,其特征在于,所述的盒体(6)的盒盖(61)上设有加样孔(71)和结果观察窗口(72);所述的检测试纸包括底板(1),底板(1)上依次衔接有样品垫(2)、抗B族链球菌抗体量子点标记垫(3)、包被膜(4)和吸水垫(5),所述的包被膜(4)上设有一条B族链球菌抗体检测区T线和一条羊抗兔多克隆抗体质控区C线,两条线平行排列。

【技术特征摘要】
1. 一种B族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡,包括带盒盖的盒体¢),盒体¢)内设 有检测试纸,其特征在于,所述的盒体¢)的盒盖¢1)上设有加样孔(71)和结果观察窗口 (72);所述的检测试纸包括底板(1),底板(1)上依次衔接有样品垫(2)、抗B族链球菌抗体 量子点标记垫(3)、包被膜(4)和吸水垫(5),所述的包被膜(4)上设有一条B族链球菌抗 体检测区T线和一条羊抗兔多克隆抗体质控区C线,两条线平行排列。2. 根据权利要求1所述的B族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡,其特征在于,所述的 包被膜(4)两端分别与吸水垫(5)和抗B族链球菌抗体量子点标记垫(3)相互交叠连接, 在抗B族链球菌抗体量子点标记垫(3)上压贴有样品垫(2)。3. 根据权利要求1所述的B族链球菌量子点免疫层析检...

【专利技术属性】
技术研发人员:汤永平潘秀华张晓丽
申请(专利权)人:广州市微米生物科技有限公司
类型:新型
国别省市:广东;44

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