【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及,属于分子生物学领域。本专利技术该方法通过设计的可检测猪瘟病毒的通用引物，并将PT-PCR技术与核酸胶体金免疫层析技术相结合，建立的适用于猪瘟病毒的快速检测方法。本专利技术设计和优化了一种检测猪瘟病毒的通用引物，并与核酸胶体金层析试纸条技术联用在短时间内即可完成不同种锦紫苏类病毒的PCR产物的检测，不需要电泳和溴化乙锭的染色，更为快速实用，简单，灵敏，且安全无污染。【专利说明】
本专利技术属于分子生物学领域，具体涉及。
技术介绍
猪痕病毒是ssRNA病毒,黄病毒科痕病毒属，其RNA为单股正链。病毒粒子呈圆形，大小为38~44nm,核衣壳是立体对称二十面体,氯化铯中浮密度1.15~1.17g/ml,有包膜。猪瘟病毒在细胞质内复制，不能凝集红血球，与牛腹泻病毒有相关抗原。该病毒对乙醚敏感，对温度、紫外线、化学消毒剂等抵抗力较强。 利用RT-PCR检测病毒是一种非常灵敏的方法。通常RT-PCR灵敏度比cRNA探针的斑点杂交灵敏度高10-100倍(Nakahara et al, 1999)。RT-PCR对模板的纯度要求高，如果检测样品中...
【技术保护点】
一种猪瘟病毒检测方法，主要包括以下步骤：将患病仔猪组织病料充分研磨制成悬浮溶液，反复冻溶3次，离心取上清，按现有市场上的RNA提取试剂盒说明书要求，抽提RNA作为模板进行RT‑PCR扩增待检测液；取一定量待检测液，加入10×One step RNA PCR buffer，MgCl2，DNTP Mixture，RNase Inhibitor，AMV‑Optimized Taq，AMV RTase，正向引物，反向引物,用灭菌DEPC水补足，所述正向引物，反向引物分别标记了地高辛、荧光素；采用常规方法制备胶体金溶液、胶体金‑兔抗地高辛多克隆抗体结合物、层析试纸条，在检测点加入荧光...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：李永锋，陈国勇，傅汝毅，陶玲云，蓝文苑，
申请(专利权)人：广西博士海意信息科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广西;45
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