【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种制备交联NAMPT及筛选NAMPT抑制剂的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、制备NAMPT重组蛋白;S2、按照摩尔份,将1份NAMPT重组蛋白加入20~100份还原剂中;在温度为20℃~25℃的条件下孵育0.5h~1.5h,得到粗蛋白;采用脱盐柱除去粗蛋白中的还原剂,得到预处理蛋白;S3、按照摩尔份,将1份预处理蛋白与2~5份1,4‑双(马来酰亚胺基)丁烷混合均匀,在温度为20℃~25℃的条件下静置反应1h~5h,采用脱盐柱除去未反应的1,4‑双(马来酰亚胺基)丁烷,得到交联NAMPT;S4、预置PBS缓冲溶液,将PBS缓冲溶液分为3份:第一PBS缓冲溶液、第二PBS缓冲溶液、第三PBS缓冲溶液,所述第一PBS缓冲溶液和第二PBS缓冲溶液的体积相同;向第一PBS缓冲溶液中加入NAMPT重组蛋白,形成浓度小于50μM的第一蛋白溶液;将第一蛋白溶液平均装入偶数支容积为500μL~2mL的第一石英管中,将所述第一石英管平均分为2组:A组、B组;向第二PBS缓冲溶液中加入交联NAMPT,配置浓度与第一蛋白溶液相同的第二蛋白溶液;将第二蛋白溶液平均装入偶数支容积为500μL~2mL的第二 ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:董旭,唐淳,
申请(专利权)人:中国科学院武汉物理与数学研究所,
类型:发明
国别省市:湖北;42
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