一种定量快速筛选抑制黄曲霉毒素产生的活性物质的方法技术

本发明专利技术涉及一种定量快速筛选抑制黄曲霉毒素的活性物质的方法，将一定质量或浓度的微生物发酵产物、植物提取物、天然产物、或化学合成产物加入到液体培养基，取200-500微升加到微量液体培养器，以空白培养液为对照，接种5-10微升寄生曲霉DM菌株的孢子液，28度培养3-6天，目测DM菌株菌丝生长和橘红色降散盘衣酸的产生，将目测有抑制效果的微量液体培养器于1000rpm离心1分钟，称量菌丝体鲜重，将菌丝体置入甲醇/氢氧化钠溶液中，提取其中的降散盘衣酸30-40分钟，于560nm处测量处理和对照提取液的吸光值，计算抑毒率和抑菌率，选择抑制率在90-100%的处理为抑制黄曲霉毒素产生的活性物质。本发明专利技术可实现微量、直观、快速、安全、低成本筛选高效抑制黄曲霉毒素的活性物质。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种定量快速筛选抑制黄曲霉毒素产生的活性物质的方法，其特征在于包括如下步骤：（1）所使用的黄曲霉毒素指示菌株为寄生曲霉DM菌株；（2）所使用的液体培养基配方组成为酵母粉10g，蔗糖50g，去离子水1000mL；（3）将一定质量或浓度的微生物发酵产物、植物提取物、天然产物、或化学合成产物，加入上述液体培养基中，混匀后取200‑500微升加入到微量液体培养器中作为处理组，同时取200‑500微升空白培养液加入到另一微量液体培养器中作为对照组；（4）向微量液体培养器中无菌操作接入5‑10微升寄生曲霉DM菌株的分生孢子悬液，在28度恒温培养箱中培养3‑6天后，观测培养结果；（5）目测处理组和对照组的寄生曲霉DM菌株的菌丝生长和橘红色降散盘衣酸的产生状况，凡是能抑制DM菌株菌丝中橘红色降散盘衣酸的产生和/或菌丝生长的处理组，即含有能抑制黄曲霉毒素产生的活性物质；（6）定量测定抑毒率和抑菌率，将目测有抑制效果的微量液体培养器置入离心机中，在1000转/分下离心1分钟后，称量处理组和对照组的菌丝体鲜重，计算抑菌率；然后，将菌丝体置入甲醇/氢氧化钠（体积重量比为9：1）溶液中，提取菌丝体中的橘红色降散盘衣酸30‑40分钟，在分光光度计中于560nm处测量处理组和对照组的提取液的吸光值，计算抑毒率；（7）根据抑毒率和/或抑菌率的计算结果，选择抑制率在90‑100%的处理组为具有显著抑制黄曲霉毒素产生的活性物质。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：闫培生，王凯，曹立新，高秀君，吴晗琪，
申请(专利权)人：哈尔滨工业大学威海，
类型：发明
国别省市：山东;37