一种烟曲霉蛋白单克隆抗体及其制备方法和用途技术

技术编号:10174648 阅读:206 留言:0更新日期:2014-07-02 15:02
本发明专利技术公开了一种烟曲霉蛋白单克隆抗体及其制备方法和用途。该单克隆抗体是由保藏于CGMCC保藏号为CGMCC No.6606的杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体;该制备方法通过克隆烟曲霉蛋白的基因;将克隆的基因插入表达载体,构建重组表达载体;用重组表达载体转化感受态大肠杆菌,诱导表达,亲和层析,得到纯化的该烟曲霉蛋白的重组蛋白;用该重组蛋白接种小鼠,取其脾淋巴细胞与小鼠Sp2/0骨髓瘤细胞融合,建立杂交瘤细胞系,从中筛选出分泌该烟曲霉蛋白抗体最稳定、抗体活性最高的杂交瘤细胞株,它们所产生的抗体即为所需的单克隆抗体;该单克隆抗体可制备曲霉病诊断试剂。该单克隆抗体的具有高度特异性和强亲和力,制备方法简单高效。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了。该单克隆抗体是由保藏于CGMCC保藏号为CGMCC?No.6606的杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体;该制备方法通过克隆烟曲霉蛋白的基因;将克隆的基因插入表达载体,构建重组表达载体;用重组表达载体转化感受态大肠杆菌,诱导表达,亲和层析,得到纯化的该烟曲霉蛋白的重组蛋白;用该重组蛋白接种小鼠,取其脾淋巴细胞与小鼠Sp2/0骨髓瘤细胞融合,建立杂交瘤细胞系,从中筛选出分泌该烟曲霉蛋白抗体最稳定、抗体活性最高的杂交瘤细胞株,它们所产生的抗体即为所需的单克隆抗体;该单克隆抗体可制备曲霉病诊断试剂。该单克隆抗体的具有高度特异性和强亲和力,制备方法简单高效。【专利说明】
本专利技术涉及基因工程、细胞工程和曲霉病的免疫诊断领域,涉及。
技术介绍
近期研究证明,以测定真菌抗原、抗体和循环代谢产物为基础的血清学诊断方法潜力较大。曲霉在体内发生侵袭性感染时,由孢子状态延伸生长成菌丝,此时向体液中释放菌丝蛋白,并刺激机体产生抗体。鉴于曲霉感染的这个特征,一般认为,血循环中抗原或特异抗体水平上升,预示着菌丝体延伸和/或曲霉感染的发展。由于曲霉蛋白质成分复杂,而且基础疾病、前期本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种烟曲霉蛋白单克隆抗体,该单克隆抗体是由保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.6606的杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:史利宁李芳秋
申请(专利权)人:中国人民解放军南京军区南京总医院
类型:发明
国别省市:江苏;32

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