一种板蓝根多糖MPEG-PLA聚合物微球制备方法技术

本发明专利技术公开了一种板蓝根多糖MPEG-PLA聚合物微球制备方法，采用复乳法来制备板蓝根多糖MPEG-PLA嵌段共聚物微球，具体步骤为：将多糖溶液加入到MPEG-PLA二氯甲烷溶液的油相中，在高速搅拌下得到乳白色初乳液，将初乳液加入到PVA水溶液中，高速搅拌2-5min，随后将复乳液放在磁力搅拌器上以50-200rpm的速度搅拌直至有机溶剂挥发完，最后，将所剩乳白液以3000-5000rpm的速度离心15min，弃上清，取沉淀，沉淀经三蒸水反复洗涤3次后，冷冻干燥即得板蓝根多糖MPEG-PLA微球。该方法得到的载药微球电镜扫描结果外形圆滑，颗粒大小均匀，平均粒径874.3nm，分散系数为0.749，包封率高达86%，释放率高达79.1%，释放时间较长，为26天，且缓释平缓，突释率较低。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种制备载药微球的方法，特别涉及一种板蓝根多糖MPEG-PLA聚合物微球制备方法。
技术介绍
板蓝根为十字花植物菘蓝(Isatisindigoticafort)的干燥根,是板蓝根的主要来源。临床常用中药,始载于《神农本草经》,味苦,性寒,有清热解毒,凉血利咽功能。用于温毒发斑、舌绛紫暗、痄腮、烂喉丹痧、大头瘟疫、丹毒、痈肿等症。近年来研究证明板蓝根多糖是板蓝根提取物中含量较多、生物活性较强的一类物质。板蓝根多糖具有免疫调节功能，对特异性免疫和非特异性免疫、体液免疫或细胞免疫具有一定的促进作用。许益民等已经证实腹腔注射板蓝根多糖可显著促进小鼠的免疫功能。同时有报道称，板蓝根多糖可促进小鼠胸腺的发育和胸腺细胞的增殖，间接的维持胸腺的微环境，促进T淋巴细胞、胸腺上皮细胞分泌胸腺素和细胞因子，从而提高机体的免疫力。但板蓝根多糖在动物免疫等实际应用方面表现出一定的困难，例如给药次数多，费力耗时，多次免疫对机体造成不良应激，免疫增强效果不好等问题，因此迫切需要对多糖的延缓释放机制进行研究。靶向给药系统(targetingdrugsystem，TDS)，是载体将药物通过局部给药或全身血液循环而选择性地使药物浓集于靶器官、靶组织、靶细胞，且疗效高、毒副作用小的给药系统，为第四代药物剂型，被认为是抗癌药的适宜剂型。该系统所用载体通常是一些高分子材料，有的是天然的，有的是人工合成的。聚乳酸-聚乙二醇共聚物（MPEG-PLA，或PELA）即是常用高分子材料中的一种，它是由聚乳酸（PLA）或其单体经一系列反应后与聚乙二醇（PEG）反应得到的产物。聚乳酸（PLA）具有生物无毒、生物可降解性及生物相容性等特点，是近40年来药物载体研究的热点之一，已经得到美国FDA批准用于人体，并广泛地用于组织工程等其他行业。体内代谢研究发现，PLA在体内的中间降解产物为乳酸，经三羧酸循环后降解的终产物为CO2和H2O，这些产物是人体及动物的正常代谢产物，经肺脏和肾脏处理后可以排出到体外。但是，由于PLA是含有大量酯键的聚合物，而酯键是疏水性基团，因此对于亲水性药物的包埋具有很大的难度。为了改变PLA的疏水性性质，一方面可以通过改变聚合物表面的电荷来增加其亲水性；另一方面也可以通过采用亲水性物质（如聚乙二醇）对PLA进行结构修饰，能够较好的改善PLA的疏水性，增加其对疏水性药物的负载。聚乙二醇（PEG）是一种聚醚高分子物质除了刚提到的亲水性好外，还具有良好的生物相容性。微球(microsphere)系指药物溶解或分散在辅料中形成的微小球状实体，亦即基质骨架微粒。微球的粒径通常在1-250μm之间，常混悬于油中。药物制成微球后主要特点是缓释长效和起靶向作用。一般微球是被动靶向，小于7μm时一般被肝、脾中巨噬细胞摄取，大于7-10μm的微球通常被肺的最小毛细管床以机械滤过的方式截留，被巨噬细胞摄取进入肺组织或肺气泡中。微球在胃肠道、单核-吞噬细胞系统或其它管道的运动过程中，可能发生不均匀分布，包括①不均匀转动；②不均匀释放。这就是造成一般的微球载药体系突释的原因，而在使用MPEG-PLA共聚物作为药物载体时，可以有效地减少药物的突释现象。综上所述，MPEG-PLA嵌段共聚物以其良好的可生物降解性、生物相容性及两亲性特点，在靶向给药系统和药物缓释系统中有着独特的优势。我们可以通过改变共聚物中PEG的分子量、含量及共聚物的分子量来调节聚合物粒径大小和分布，从而进一步调节疏水性药物或难溶性药物的释放速率。再者，对于一些对脏器有毒性的药物，研究制备出新剂型，在降低其对脏器的毒副作用方面必能起到一定的效果。另外，国内外还有学者将核酸疫苗等包载到MPEG-PLA共聚物内，使一些原来因极易被破坏的水溶药物能够经口腔给药，而减少药物对机体刺激作用。然而要使MPEG-PLA嵌段共聚物得到广泛应用，还必须克服此聚合物制备过程中的难题，目前主要采用的制备方法为开环聚合法，但此方法步骤中的例如纯化过程、催化剂的选用等等都是亟待解决的问题。
技术实现思路
为解决上述现有技术存在的问题，本专利技术提出一种板蓝根多糖MPEG-PLA聚合物微球制备方法。为达到上述目的，本专利技术的技术方案为：一种板蓝根多糖MPEG-PLA聚合物微球制备方法，采用复乳法来制备板蓝根多糖MPEG-PLA嵌段共聚物微球，其特征在于，具体步骤为：将多糖溶液加入到MPEG-PLA二氯甲烷溶液的油相中，在高速搅拌下得到乳白色初乳液，将初乳液加入到PVA水溶液中，高速搅拌2--5min，随后将复乳液放在磁力搅拌器上以50--200rpm的速度搅拌直至有机溶剂挥发完，最后，将所剩乳白液以3000--5000rpm的速度离心15min，弃上清，取沉淀，沉淀经三蒸水反复洗涤3次后，冷冻干燥即得板蓝根多糖MPEG-PLA微球。所述MPEG-PLA嵌段聚合物采用分子量为1000—5000的MPEG-PLA，MPEG-PLA二氯甲烷溶液中MPEG-PLA嵌段共聚物浓度为100ug/ml。所述板蓝根多糖体水溶液浓度为0.06g/ml；所述PVA水溶液浓度为0.5%。所述MPEG-PLA二氯甲烷溶液：板蓝根多糖水溶液：PVA水溶液体积比为1-10:1-10:1-10。所述高速搅拌速度为10000--30000rpm。相对于现有技术，本专利技术的有益效果为:采用复乳法制备微球：将聚合物溶于与水互不溶的有机溶剂中，将药物水溶液（即内水相）分散在其中形成水溶性药物的W/O型乳液，配置含有稳定剂和保护胶的水溶液作为外部水相，将制得W/O型乳液在搅拌的条件下分散到外部水相中形成W/O/W型乳液。经蒸发、过滤、干燥得到载药微球。该方法得到的载药微球电镜扫描结果外形圆滑，颗粒大小均匀，平均粒径874.3nm，分散系数为0.749，包封率高达86%，释放率高达79.1%，释放时间较长，为26天，且缓释平缓，突释率较低。附图说明图1为板蓝根多糖MPEG-PLA微球累积释放曲线。图2a为实施例中MS2-3微球电镜。图2b为实施例中MS2-3空白微球电镜。图2c为实施例中MS2-5微球电镜。图2d为实施例中MS2-5空白微球电镜。图2e为实施例中MS6-3微球电镜。图2f为实施例中MS6-3空白微球电镜。图2g为实施例中MS6-5微球电镜。图2h为实本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种板蓝根多糖MPEG‑PLA聚合物微球制备方法，采用复乳法来制备板蓝根多糖MPEG‑PLA嵌段共聚物微球，其特征在于，具体步骤为：将多糖溶液加入到MPEG‑PLA二氯甲烷溶液的油相中，在高速搅拌下得到乳白色初乳液，将初乳液加入到PVA水溶液中，高速搅拌2‑‑5min，随后将复乳液放在磁力搅拌器上以50‑‑200rpm的速度搅拌直至有机溶剂挥发完，最后，将所剩乳白液以3000‑‑5000rpm的速度离心15min，弃上清，取沉淀，沉淀经三蒸水反复洗涤3次后，冷冻干燥即得板蓝根多糖MPEG‑PLA微球。

【技术特征摘要】
1.一种板蓝根多糖MPEG-PLA聚合物微球制备方法，采用复
乳法来制备板蓝根多糖MPEG-PLA嵌段共聚物微球，其特征在于，
具体步骤为：将多糖溶液加入到MPEG-PLA二氯甲烷溶液的油相
中，在高速搅拌下得到乳白色初乳液，将初乳液加入到PVA水溶液
中，高速搅拌2--5min，随后将复乳液放在磁力搅拌器上以
50--200rpm的速度搅拌直至有机溶剂挥发完，最后，将所剩乳白液
以3000--5000rpm的速度离心15min，弃上清，取沉淀，沉淀经三
蒸水反复洗涤3次后，冷冻干燥即得板蓝根多糖MPEG-PLA微球。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述MPEG-PLA

【专利技术属性】
技术研发人员：张红英，王学兵，邹政耀，姜涛，杜芳芳，
申请(专利权)人：河南农业大学，
类型：发明
国别省市：河南;41