【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种采用单链构象多态性技术分析微生物群落结构组成的方法,其特征在于采用单链构象多态性技术分析微生物群落结构组成的方法按以下步骤进行:一、采用周冀中等人的DNA提取方法提取微生物群落DNA;二、PCR扩增:PCR扩增正向引物序列为AGAGTTTGATCCTGGCTCAG,PCR扩增反向引物序列为TTACCGCGGCTGCTGGCA,反向引物5’端采用磷酸标记;三、酶切去除反意义链:酶切反应体系为50μL由5μL10×buffer缓冲溶液、40μLPCR扩增产物和5μL浓度为5U/μL的λ核酸外切酶组成,酶切反应体系在37℃的环境中反应3~4h,然后纯化酶切产物,再溶解于20μL重蒸馏水中;四、将溶解于重蒸馏水中的酶切产物与等体积的变性剂混合置于95℃的环境中热变性处理10min,然后立即冰浴5min,之后凝胶电泳上样、在4~20℃、电压为250~300V的条件下电泳12~18h;五、将凝胶浸泡于重蒸馏水中10min,然后用灭菌的刀片将DNA条带分别切下放入离心管中并研碎,再向每支离心管中加入50μL裂解液在37℃的环境中处理3h,然后离心、分离上清液,并向上清液中加入上清液体积2倍的无水 ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:王爱杰,于振国,任南琪,阚洪晶,刘春爽,张运晴,赵阳国,
申请(专利权)人:哈尔滨工业大学,
类型:发明
国别省市:93[]
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