从红细胞中提取超氧化物歧化酶的方法技术

本发明专利技术公开的从红细胞中提取超氧化物歧化酶的方法，步骤包括动物新鲜血液抗凝处理后，离心收集红细胞，经溶血，热变性，丙酮分级沉淀，冻干得ＳＯＤ粗品。粗品经离子交换层析和／或分子筛层析得ＳＯＤ精品。本发明专利技术彻底摒弃了氯仿乙醇，只采用热变性和丙酮分级沉淀的方法，简便的分离出具有较高活力的粗品ＳＯＤ。本发明专利技术的从红细胞中提取超氧化物歧化酶的方法，能最大限度的保持原有的ＳＯＤ活力，得率比传统的氯仿乙醇法更高。本发明专利技术操作简单，适合于工业化生产。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
从红细胞中提取超氧化物歧化酶的方法，其步骤如下：１）取动物新鲜血液，搅拌下加入柠檬酸钠溶液抗凝，离心收集红细胞；２）向步骤１）收集的红细胞中加入１～５倍体积的蒸馏水，搅拌，使红细胞破碎，得红细胞溶血液；３）向红细胞溶 血液中加入单价中性金属盐，至单价中性金属盐终浓度为０．０１Ｍ～３Ｍ，再加入过渡金属盐，至过渡金属盐终浓度为０．１ｍＭ～１０ｍＭ；４）加热至５０～８５℃，保温２０～１２０ｍｉｎ后，过滤或离心去渣，得到ＳＯＤ粗提液；５）搅拌下， 向ＳＯＤ粗提液加入０．７～１．１倍体积的经预冷的丙酮，离心取上清；６）搅拌下，向步骤５）所得的上清中加入１．３～１．６倍体积的经预冷的丙酮，离心取沉淀，用缓冲液溶解，脱盐后冷冻干燥，获得ＳＯＤ粗品；或者将沉淀经缓冲液溶解脱盐后，经过 阴离子交换层析和／或分子筛柱层析，冷冻干燥，获得ＳＯＤ精品。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：郦剑勇，龚兴国，曾冬云，叶跃国，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]