一种固体脂质桃仁多肽亚铁螯合物纳米颗粒及其制备方法技术

一种固体脂质桃仁多肽亚铁螯合物纳米颗粒及其制备方法，所述制备方法为：（1）桃仁蛋白酶解；（2）膜分离；（3）微波固相螯合；（4）醇析；（5）真空干燥；（6）多相混合；（7）膜接触法制备固体脂质纳米颗粒；（8）离心分离；（9）微波真空干燥。本发明专利技术的制备方法采用微波固相合成技术、膜接触法、固体脂质纳米颗粒包埋等方式显著提高了多肽与亚铁盐的螯合率、螯合物的化学稳定性和生物利用率。所制备的固体脂质桃仁多肽亚铁螯合物纳米颗粒是一种铁营养强化剂，不仅口感好，无铁腥味，对肠道无刺激作用，而且吸收性能好，具有良好的市场前景。

A solid lipid peach kernel polypeptide of ferrous chelate nanoparticles and its preparation method

A kind of solid lipid nanoparticles peachseed ferrous polypeptide chelate and its preparation method, the preparation method is as follows: (1) peach protease solution; membrane separation; (2) (3) (4) microwave solid chelate; alcohol precipitation; vacuum drying; (5) (6) (7 multiphase mixture;) membrane contact preparation of solid lipid nanoparticles (8); centrifugal separation; (9) microwave vacuum drying. The preparation method of the invention adopts microwave solid-phase synthesis technology, membrane contact method and solid lipid nanoparticles embedding to improve the chelating rate of polypeptide and ferrous salt, the chemical stability and bioavailability of chelates. The prepared solid lipid peach seed polypeptide ferrous chelate nanoparticle is an iron nutrition fortifier. It has good taste and no iron smell. It has no irritation to intestinal tract, and has good absorptive performance. It has good market prospect.

【技术实现步骤摘要】
一种固体脂质桃仁多肽亚铁螯合物纳米颗粒及其制备方法
本专利技术涉及一种食用铁营养补充剂，具体涉及一种固体脂质桃仁多肽亚铁螯合物纳米颗粒及其制备方法。
技术介绍
铁元素是人体必需的微量元素之一，人体缺铁或铁利用不良时会影响血红蛋白的合成，引起缺铁性贫血。缺铁性贫血对人体有很大的危害，会显著降低儿童的智力和生长发育，使人的免疫功能、体力、耐力下降。目前，预防和治疗缺铁性贫血的主要手段是摄入铁营养补充剂。当前我国市面上销售的多种铁营养补充剂，普遍存在生物利用率低、带有金属异味、对胃肠道有刺激作用等缺点，影响补铁效果，消费者接受度低。十二指肠和空肠上段肠粘膜是人体吸收铁的主要部位，食物中的铁只有还原成亚铁离子才能被肠道细胞吸收。多肽亚铁螯合物通过多肽的官能团与亚铁离子配位螯合，LuciadelaHoz等人指出，多肽亚铁螯合物可直接被肠道细胞吸收且对肠道没有副作用，吸收利用率比游离的亚铁离子高出3倍以上，相对于其它类型的铁营养强化剂，具有更高的配合率和稳定性，更高的生物利用率和更快的吸收速度等优势（LuciadelaHozL,PoneziAN,MilaniRF.Iron-bindingPropertiesofSugarCaneYeastPeptides[J].FoodChemistry,2014第142期第166-169页）。因此，多肽亚铁螯合物成为国内外研究铁营养补充剂的热点。CN105852135A公开了一种食药用菌蛋白肽-亚铁螯合物的制备方法，利用碱溶酸沉法或硫酸铵沉降法提取食药用菌中的蛋白质；采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶或复合蛋白酶对食药用菌蛋白进行限制性酶解后，灭酶，制备食药用菌蛋白酶解液；利用无机物氯化亚铁或硫酸亚铁中的亚铁与食药用菌蛋白肽螯合获得食药用菌蛋白肽-亚铁螯合物。该方法中，螯合反应温度要求300～500℃，操作复杂，制得的食药用菌蛋白肽-亚铁螯合物属于多肽衍生物，易被胃液、肠液中的胃蛋白酶、胰蛋白酶等水解为游离的亚铁离子，对肠道有刺激作用，降低其在肠道中的吸收利用率，且具有铁腥味。CN102860512B公开了一种乌鸡肽铁螯合物生物补铁剂的制备方法，具体制备方法为：在乌鸡肽溶液中加入抗坏血酸，并且在pH3～6的条件下，将乌鸡肽溶液与亚铁盐恒温下融合。该方法存在的缺陷是，所得补铁剂属于多肽衍生物，易被胃液、肠液中的胃蛋白酶、胰蛋白酶等水解为游离的亚铁离子，对肠道有刺激作用，降低其在肠道中的吸收利用率，且具有铁腥味。CN105561286A公开了一种含肽和铁螯合肽的红枣补铁饮品及制备方法，具体制备步骤如下：第一步、猪血多肽及铁螯合肽的混合溶液的制备；第二步、红枣浆的制备；第三歩、混合熬煮。该方法通过增加红枣浆和甜味剂降低产品铁腥味，但其有效成分属于多肽衍生物，易被胃液、肠液中的胃蛋白酶、胰蛋白酶等水解为游离的亚铁离子，对肠道有刺激作用，降低其在肠道中的吸收利用率。现有多肽与亚铁离子螯合的方法均是采用液相振荡螯合法，反应速度慢，螯合率低，工艺复杂，产生的废液较多，生产成本高，产品质量也较差。桃仁为蔷薇科植物桃或山桃的干燥成熟种子，脱油后的蛋白质含量高达95%以上。但目前桃仁除部分用于中医药外，绝大部分被丢弃，造成资源浪费。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是，克服现有技术存在的上述缺陷，提供一种制备方法简单、螯合率高，产品化学性质稳定、生物利用率高、对肠道无刺激、无铁腥味的固体脂质桃仁多肽亚铁螯合物纳米颗粒及制备方法。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案如下：一种固体脂质桃仁多肽亚铁螯合物纳米颗粒，其特征在于，由以下方法制备而成：（1）桃仁蛋白酶解：将桃仁脱脂后得蛋白粉，加入去离子水配制成分散液，用碱性蛋白酶对其进行酶解，再将其置于沸水浴中灭酶，离心，得上清液；（2）膜分离：将步骤（1）所得上清液先用超滤装置过滤，滤液再用纳滤装置过滤，得到滤渣，即桃仁多肽液，冷冻干燥后得到多肽粉末；（3）微波固相螯合：将步骤（2）所得多肽粉末与亚铁盐粉末混合于反应容器中，加入去离子水作为微波固相螯合的引发剂，置于微波合成仪内，进行微波固相反应，同时向微波腔内通入气流，最后得到桃仁亚铁螯合肽和亚铁盐混合粉末；（4）醇析：在步骤（3）所得桃仁亚铁螯合肽和亚铁盐混合粉末中加入无水乙醇，混匀静置，离心，去除上清液，得醇析物；（5）真空干燥：将步骤（4）所得醇析物置于真空浓缩器中干燥，得桃仁多肽亚铁螯合物粉末；（6）多相混合：将步骤（5）所得桃仁多肽亚铁螯合物粉末与硬脂酸混合，然后加入乙醇，配制成桃仁多肽亚铁螯合物粉末和硬脂酸混合溶液；（7）膜接触法制备固体脂质纳米颗粒：将步骤（6）所得桃仁多肽亚铁螯合物粉末和硬脂酸混合溶液加入管式陶瓷膜过滤机内，溶液通过陶瓷膜，与陶瓷膜外流动的大豆卵磷脂乳化液相遇，冷却凝结成颗粒，此即为固体脂质桃仁多肽亚铁螯合物纳米颗粒混悬液；（8）离心分离：将步骤（7）所得的混悬液用离心机离心，收集沉淀，得到多肽亚铁螯合物固体脂质纳米颗粒；（9）微波真空干燥：将步骤（8）收集的固体脂质多肽亚铁螯合物纳米颗粒置于微波真空干燥机中干燥，即成。进一步，步骤（3）中，所述多肽粉末与亚铁盐粉末的质量比为0.5～5∶1（优选0.8～3∶1，更优选1～2∶1）。进一步，步骤（3）中，所述去离子水的加入量为多肽粉末与亚铁盐粉末混合物质量的3%～15%（优选5%～12%；更优选6%～10%；进一步优选7%～9%）。进一步，步骤（3）中，所述亚铁盐粉末是由四水氯化亚铁与异构抗坏血酸按质量百分比80～110∶1（优选83～105∶1，更优选85～102∶1，进一步优选95～100：1）混合而成。进一步，步骤（3）中，所述微波固相反应的微波功率为460～610W（优选480～600W；更优选500～580W；进一步优选520～550W）；微波固相反应的时间≧1分钟，优选1.5～3.0分钟。进一步，步骤（3）中，所述向微波腔内通入气流的温度为60～120℃（优选65～110℃；更优选70～100℃；进一步优选80～90℃）。进一步，步骤（6）中，所述桃仁多肽亚铁螯合物粉末与所述硬脂酸质量比为8～12∶1，优选9～10∶1；所述硬脂酸的温度为55～70℃，优选58～65℃；所述乙醇的质量浓度≧75%（优选≧85%，更优选≧90%，进一步优选95%）；所述溶液的溶质浓度为100～120g/L（优选110g/L）。进一步，步骤（7）中，所述陶瓷膜的工作压力为0.2～0.6Mpa（优选0.3～0.5Mpa；更优选0.4Mpa），陶瓷膜的孔径为0.05～0.20μm（优选0.08～0.18μm；更优选0.10～0.16μm；进一步优选0.12～0.15μm）。进一步，步骤（7）中，所述大豆卵磷脂乳化液制备方法为：将大豆卵磷脂与泊洛沙姆188按1～6∶1（优选2～5∶1；更优选3～4∶1）的质量比混合，用温度为55～70℃（优选58～65℃）的去离子水溶解，配制成溶质浓度为50～60g/L（优选55g/L）的乳化液。进一步，步骤（1）中，所述分散液的溶质浓度为3～4%；所述沸水浴的时间为15～20分钟；所述离心的条件为6000～8000r/分钟条件下离心10～15分钟；所述酶解的条件为：碱性蛋白酶的酶活为2×105U/g，加本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种固体脂质桃仁多肽亚铁螯合物纳米颗粒，其特征在于，由以下方法制备而成：（1）桃仁蛋白酶解：将桃仁脱脂后得蛋白粉，加入去离子水配制成分散液，用碱性蛋白酶对其进行酶解，再将其置于沸水浴中灭酶，离心，得上清液；（2）膜分离：将步骤（1）所得上清液先用超滤装置过滤，滤液再用纳滤装置过滤，得到滤渣，即桃仁多肽液，冷冻干燥后得到多肽粉末；（3）微波固相螯合：将步骤（2）所得多肽粉末与亚铁盐粉末混合于反应容器中，加入去离子水作为微波固相螯合的引发剂，置于微波合成仪内，进行微波固相反应，同时向微波腔内通入气流，最后得到桃仁亚铁螯合肽和亚铁盐混合粉末；（4）醇析：在步骤（3）所得桃仁亚铁螯合肽和亚铁盐混合粉末中加入无水乙醇，混匀静置，离心，去除上清液，得醇析物；（5）真空干燥：将步骤（4）所得醇析物置于真空浓缩器中干燥，得桃仁多肽亚铁螯合物粉末；（6）多相混合：将步骤（5）所得桃仁多肽亚铁螯合物粉末与硬脂酸混合，然后加入乙醇，配制成桃仁多肽亚铁螯合物粉末和硬脂酸混合溶液；（7）膜接触法制备固体脂质纳米颗粒：将步骤（6）所得桃仁多肽亚铁螯合物粉末和硬脂酸混合溶液加入管式陶瓷膜过滤机内，溶液通过陶瓷膜，与陶瓷膜外流动的大豆卵磷脂乳化液相遇，冷却凝结成颗粒，此即为固体脂质桃仁多肽亚铁螯合物纳米颗粒混悬液；（8）离心分离：将步骤（7）所得的混悬液用离心机离心，收集沉淀，得到多肽亚铁螯合物固体脂质纳米颗粒；（9）微波真空干燥：将步骤（8）收集的固体脂质多肽亚铁螯合物纳米颗粒置于微波真空干燥机中干燥，即成。...

【技术特征摘要】
1.一种固体脂质桃仁多肽亚铁螯合物纳米颗粒，其特征在于，由以下方法制备而成：（1）桃仁蛋白酶解：将桃仁脱脂后得蛋白粉，加入去离子水配制成分散液，用碱性蛋白酶对其进行酶解，再将其置于沸水浴中灭酶，离心，得上清液；（2）膜分离：将步骤（1）所得上清液先用超滤装置过滤，滤液再用纳滤装置过滤，得到滤渣，即桃仁多肽液，冷冻干燥后得到多肽粉末；（3）微波固相螯合：将步骤（2）所得多肽粉末与亚铁盐粉末混合于反应容器中，加入去离子水作为微波固相螯合的引发剂，置于微波合成仪内，进行微波固相反应，同时向微波腔内通入气流，最后得到桃仁亚铁螯合肽和亚铁盐混合粉末；（4）醇析：在步骤（3）所得桃仁亚铁螯合肽和亚铁盐混合粉末中加入无水乙醇，混匀静置，离心，去除上清液，得醇析物；（5）真空干燥：将步骤（4）所得醇析物置于真空浓缩器中干燥，得桃仁多肽亚铁螯合物粉末；（6）多相混合：将步骤（5）所得桃仁多肽亚铁螯合物粉末与硬脂酸混合，然后加入乙醇，配制成桃仁多肽亚铁螯合物粉末和硬脂酸混合溶液；（7）膜接触法制备固体脂质纳米颗粒：将步骤（6）所得桃仁多肽亚铁螯合物粉末和硬脂酸混合溶液加入管式陶瓷膜过滤机内，溶液通过陶瓷膜，与陶瓷膜外流动的大豆卵磷脂乳化液相遇，冷却凝结成颗粒，此即为固体脂质桃仁多肽亚铁螯合物纳米颗粒混悬液；（8）离心分离：将步骤（7）所得的混悬液用离心机离心，收集沉淀，得到多肽亚铁螯合物固体脂质纳米颗粒；（9）微波真空干燥：将步骤（8）收集的固体脂质多肽亚铁螯合物纳米颗粒置于微波真空干燥机中干燥，即成。2.根据权利要求1所述的固体脂质桃仁多肽亚铁螯合物纳米颗粒，其特征在于，步骤（3）中，所述多肽粉末与亚铁盐粉末的质量比为0.5～5∶1。3.根据权利要求1或2所述的固体脂质桃仁多肽亚铁螯合物纳米颗粒，其特征在于，步骤（3）中，所述去离子水的加入量为多肽粉末与亚铁盐粉末混合物质量的3%～15%。4.根据权利要求1～3之一所述的固体脂质桃仁多肽亚铁螯合物纳米颗粒，其特征在于，步骤（3）中，所述亚铁盐粉末是由四水氯化亚铁与异构抗坏血酸按质量百分比80～110∶1混合而成。5.根据权利要求1～4之一所述的固体脂质桃仁多肽亚铁螯合物纳米颗粒，其特征在于，步骤（3）中，所述微波固相反应的微波功率为460～610W...

【专利技术属性】
技术研发人员：李安平，杨玉蓉，钟政昌，李刚，
申请(专利权)人：中南林业科技大学，西藏农牧学院，
类型：发明
国别省市：湖南,43