本发明专利技术涉及化学技术领域，提供了一种凝血酶直接抑制剂多肽盐及其合成、纯化方法及含有该多肽盐的药物组合物，以及药物组合物用于抗凝血药物的应用，所述多肽盐的分子式为C98H138‑mN24O33·0.5myX，X为钠离子、钾离子、铵离子、镁离子或钙离子，提供了一种更易于制备和使用，且具有更好稳定性和安全性的多肽药物。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及化学
，提供了一种凝血酶直接抑制剂多肽盐及其合成、纯化方法。
技术介绍
凝血酶直接抑制剂的多肽部分已有相关的报道(美国专利号为US5433940A)。中国专利CN102558305A提供了所述多肽的水合盐，通式为C98H138N24O33·mX·nH2O；X为醋酸、盐酸或三氟醋酸，m的取值范围为1≤m≤4，n的取值范围为2≤n≤12，所述水合盐具有良好的水溶性，利于制备多肽药物临床使用。然而此品作为一种注射制剂，其等渗、稳定性和安全性等性质需要严格控制。本专利技术预解决该技术难题。
技术实现思路
鉴于现有技术存在的技术难题，本专利技术的一个目的是为提供具有足够渗透性和安全性凝血酶直接抑制剂多肽盐。本专利技术通过大量实验提供了一种凝血酶直接抑制剂多肽盐，其通式为C98H138-mN24O33·0.5myX；所述C98H138N24O33是指以下氨基酸组成的多肽：D-Phe-Pro-Arg-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Asn-Gly-Asp-Phe-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-OH，X为钠离子(Na+)、钾离子(K+)、铵离子(NH4+)或者镁离子(Mg2+)、钙离子(Ca2+)，当X为钠离子、钾离子或铵离子时，y＝2；X为镁离子或钙离子时，y＝1，m的取值范围为1≤m≤5，m为自然数。本专利技术中，多肽的COOH和X通过阴阳离子形式结合。除特殊制定，与多肽结合的X均以上述离子形式存在。本专利技术中除了特殊限定，所述多肽盐中多肽的氨基酸组成详细构象及顺序如下：D-Phenylalanyl(1)-L-Prolyl(2)-L-Arginyl(3)-L-Prolyl(4)-Glycyl(5)-Glycyl(6)-Glycyl(7)-Glycyl(8)-L-Asparagyl(9)-Glycyl(10)-L-Aspartyl(11)-L-Phenylalanyl(12)-L-Glutamyl(13)-L-Glutamyl(14)-L-Isoleucyl(15)-L-Proly(16)L-L-Glutamyl(17)-L-Glutamyl(18)-L-Tyrosyl(19)-L-Leucine(20)。所述多肽分子中增加为Na+、K+、NH4+、Mg2+或者Ca2+的X，形成多肽盐，特别是钠盐、钾盐和铵盐，在保证足够水溶性的同时，提高多肽及其制剂的稳定性，保证注射使用的效果，降低不良反应，提高安全性。进一步地，X优选为Na+，相对于K+、NH4+、Mg2+或者Ca2+具有更好的稳定性，且易于制备。所述m的优选取值范围为1≤m≤3，特别是1、2和3，进一步保证多肽盐的水溶性和稳定性，具有更优异的稳定性效果。本专利技术的目的之一在于提供一种所述凝血酶直接抑制剂多肽盐含有一定水分的水合盐，通式C98H138-mN24O33·0.5myX·nH2O,其中，n优选取值范围为1≤n≤8，n的取值包括1、2、3、4、5、6、7和8等，以及各数值的中间任意值。n<1在制备过程中存在一定难度，如采用高温干燥可能会造成多肽杂质的产生，影响药物稳定性，如采用低温减压干燥，将大大增加生产时间，增加成本。而n>8时，多肽盐的稳定性明显变差。进一步优选n的优选取值范围为2≤n≤5，保证溶解性，易于产品作为注射制剂制备，同时，控制水分对多肽稳定性的影响。上述凝血酶直接抑制剂多肽盐分子式为C98H137N24O33·Na·nH2O时在红外衍射图中以波数cm-1表示，其红外光谱在703、1030、1134、1204、1246、1403、1451、1536、1658、2960(cm-1)处有特征吸收峰，误差±2，在3300cm-1左右有一宽峰(在红外光谱为宽峰时，可能误差较大，所以，所述“左右”可以理解为±10均为该物质可能的范围内)，应注意：特定物质的不同样品具有同样的主要红外衍射吸收峰，但可能存在一定操作误差，当由本领域普通技术人员，采用相应方法得到的同晶型样品采用相同的仪器和检测方法进行检测时，吸收峰误差通常在±2cm-1以内(同样地，各吸收峰误差通常在±2cm-1以内的含义指的是大部分吸收峰，如超过80％以上的吸收峰误差在此范围内，而偶然有个别少数的吸收峰的误差超出该范围，均应认为属于相同晶型的红外吸收峰谱图)。红外衍射检测条件：测试仪器：美国尼高力公司生产的Avatar 330型红外分光光度计，测试方法：KBr压片法。本专利技术的目的之一在于提供所述的凝血酶直接抑制剂多肽盐的制备方法，具体地，包括以下制备步骤：采用固相合成方法制备得到C98H138N24O33·2TFA(TFA为三氟乙酸)，将其溶解于水中，加入碱的水溶液至溶液的pH＝3.6，析出沉淀，离心，冷水洗涤，沉淀再与以C98H138N24O33摩尔数为1计的m摩尔的碱的水溶液反应，反应后水溶液冻干，采用经质谱测定多肽的分子量，X的含量测定用离子色谱法，利用卡尔-费休滴定仪测定水分。所述碱选自NaOH、Na2CO3、NaHCO3、KOH、K2CO3、KHCO3、氨水、Ca(OH)2、Mg(OH)2中的一种。采用上述方法，不仅可以提高制备收率，同时，相对于其他酸碱调节制备方案，更有益于保证产品的纯度和稳定性，最大程度的降低新的杂质的产生。其中，所述C98H138N24O33·2TFA的多肽盐可以通过CN102558305A公开的固相合成方法制备得到。本专利技术的目的之一在于提供一种注射使用药物组合物，其特征在于，所述药物组合物中含有所述的凝血酶直接抑制剂多肽盐和一种以上药学上可接受的载体，采用注射用水为溶媒。优选载体为甘露醇，由于本专利技术性能优异的多肽盐，使得注射安全性效果更为优异。且采用甘露醇优于与其他注射用载体组合的使用效果。再者，在对所述载体进行大量优选研究发现，当载体为甘露醇，所述凝血酶直接抑制剂多肽盐以C98H138N24O33计，与甘露醇的质量比优选为2：1。当质量比大于2：1，可能影响药物的澄明度效果。小于2：1，则不易控制药物和载体的浓度，增加控制凝血操作的复杂程度。且该方案优于相同比例与其他注射用载体组合的使用效果。本专利技术的一种优选方案为所述药物组合物以水制成每1ml含有1mg的C98H138N24O33的溶液，药物组合物的酸碱度为4-6，不论是酸碱度<4或者>6都影响药物组合物的长期保存稳定性。采用所述载体比例及药物酸碱度范围，所述药物组合物在近18个月以上的注射用制剂保存条件下，可控制杂质总量小于2％，其中特异性杂质Asp9杂质和D-Phe杂质的限量分别小于0.5％。大大的提高了产品的稳定性和安全性。可以理解的是，在含有本专利技术多肽盐的任何原料或者制剂，只要通过酸碱、等电点测定或者其他测定方法确定所述多肽的COOH部分或全部以COO-形式存在，且采用离子色谱确定所述确定含有Na、K、Mg或者Ca，即可辨认含有本专利技术的多肽盐。而且，所述多肽盐的确认不以制备方法及制备前后顺序的不同而进行区分，比如采用多肽的酸盐，如三氟醋酸盐、盐酸盐等，在制剂或者其他终产品的使用中加入足够量的碱，而最终形成了本专利技术的多肽盐，也可认为也属于本专利技术保护的范围内。本专利技术相对于现有技术的有益效果包括但不限于：(1)、本专利技术的多肽盐本文档来自技高网...
【技术保护点】
凝血酶直接抑制剂多肽盐，其特征在于，通式为C98H138‑mN24O33·0.5myX；所述C98H138N24O33是指以下氨基酸组成的多肽：D‑Phe‑Pro‑Arg‑Pro‑Gly‑Gly‑Gly‑Gly‑Asn‑Gly‑Asp‑Phe‑Glu‑Glu‑Ile‑Pro‑Glu‑Glu‑Tyr‑Leu‑OH，X为钠离子、钾离子、铵离子、镁离子或钙离子，当X为钠离子、钾离子或铵离子时，y＝2；X为镁离子或钙离子时，y＝1，m的取值范围为1≤m≤5，m为自然数。
【技术特征摘要】
2016.06.02 CN 20161038983071.凝血酶直接抑制剂多肽盐，其特征在于，通式为C98H138-mN24O33·0.5myX；所述C98H138N24O33是指以下氨基酸组成的多肽：D-Phe-Pro-Arg-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Asn-Gly-Asp-Phe-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-OH，X为钠离子、钾离子、铵离子、镁离子或钙离子，当X为钠离子、钾离子或铵离子时，y＝2；X为镁离子或钙离子时，y＝1，m的取值范围为1≤m≤5，m为自然数。2.根据权利要求1所述的凝血酶直接抑制剂多肽盐，其特征在于，X优选为钠，m的优选取值范围为1、2或者3。3.根据权利要求1—2任一权利要求所述的凝血酶直接抑制剂多肽盐，其特征在于，所述凝血酶直接抑制剂多肽盐含有一定水分的水合盐，通式C98H138-mN24O33·0.5myX·nH2O,其中，n取值范围为1≤n≤8，优选为2≤n≤5。4.根据权利要求3所述的凝血酶直接抑制剂多肽盐，其特征在于，所述凝血酶直接抑制剂多肽盐含有一定水分的水合盐，分子式为C98H137N24O33·Na·nH2O，其红外光谱在703、1030、1134、1204、1246、1403、1451、1536、1658、2960(cm-1)处有特征吸收峰，误差±2，在330...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈平，马立如，王海，何晶晶，李汉坤，
申请(专利权)人：凌莉，
类型：发明
国别省市：广东;44
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。