用凝集测定检测和分类抗凝血剂制造技术

本发明专利技术提供了用于在患者中检测治疗相关量或更高量的抗凝血剂的方法。本发明专利技术还包括在蝰蛇毒试剂的存在下使用凝集测定，将抗凝血剂分类为抗-凝血因子Xa抗凝血剂或直接凝血酶抑制剂的方法。本发明专利技术还提供用于在患者中检测和分类治疗相关量或更高量的抗凝血剂的方法。本发明专利技术进一步包括用于在凝血因子Xa试剂的存在下鉴定和分类抗凝血剂为抗-凝血因子Xa抗凝血剂的方法。

【技术实现步骤摘要】
【专利说明】用凝集测定检测和分类抗凝血剂 相关申请的交叉引用 本申请要求2014年7月31日提交的美国临时申请号62/031,371和2015年2月3日 提交的美国临时申请号62/111，376的优先权，其中每一个在此通过引用以其整体作为参 考· 背景 本专利技术涉及凝血和止血领域. 随着人口老龄化，涉及心脏和循环系统疾病的风险已成为日益关注的问题。抗凝血剂 已被用于对抗和/或管理（如，预防）包括患者的心房颤动、肺栓塞、深静脉血栓形成、静脉 血栓栓塞、充血性心脏衰竭、中风、心肌梗塞和血液凝固性过高的综合症.在过去，抗凝血 剂药物华法林，其减少了所有维生素K依赖性凝血因子的功能水平，被经常使用。然而，最 近改良的抗凝血剂已被开发为在凝血级联反应中特异性靶向某些因子。 例如，口服抗凝血剂的引入已经改变有静脉和动脉血栓栓塞疾病的患者的管理.不同 于传统的口服维生素K拮抗剂（VKA)，最近开发的不普遍降低维生素K依赖性因子的口服 抗凝血剂以固定剂量给药，并具有较低潜在的药物与食物相互作用，因此消除了常规实验 室监测的要求（AnsellJ.等人，Chest133 :160S-198S，2008;AgenoW.等人，Chest141: e44S-88S，2012)。与VKA药物如华法林相比，这些新制剂显示出类似的或改良的功效和安 全性，并建立包括未分级肝素和低分子量肝素的非肠道药剂。 然而，这些新的口服抗凝血剂的现有管理挑战着临床医生和实验室人员，当患者出现 出血倾向（如因外伤或手术期间）。缺乏现成的方法来确定抗凝作用的程度在临床治疗潜 在接受抗凝血剂的出血患者中产生重大挑战.在某些情况下，没有有用的方法来检测和监 控这些药剂（参见Miyares和Davis，Am.J.Health.Syst.Pharm. 69 :1473-1484, 2012)。 有一个快速方法来检测取自患者样品中抗凝血剂的存在将是有用的.确定患者的样 品中有哪种类型的抗凝血剂也将是有用的. 实施方案概要 在一些实施方案中，本专利技术提供了一种快速和准确的方法以检测取自患者的样品中的 抗凝血剂的存在和逆转。在一些实施方案中，本专利技术提供了一种快速和准确的方法以鉴定 在样品中是哪种类型的抗凝血剂。 因此，在第一方面，本专利技术提供了在怀疑有抗凝血剂的患者中检测至少治疗相关量的 (即，治疗相关量或更高量）抗凝血剂的方法.该方法包括（a)使对照血液成分的对照样 品，该对照样品已知不包含抗凝血剂，在凝血因子Xa试剂的存在下经历凝集测定以获得对 照样品的凝血测量结果；和（b)使来自怀疑有抗凝血剂的患者的血液成分的患者样品，在 凝血因子Xa试剂存在下以凝集测定得到该患者样品的凝血测量结果，其中患者样品凝血 测量结果大于对照样品凝血测量结果，表明所述抗凝血剂在患者中以治疗相关量存在，且 其中患者样品凝血测量结果小于或等于对照样品凝血测量结果，表明在患者中不存在治疗 相关量的抗凝血剂。在一些实施方案中，抗凝血剂是口服抗凝血剂.该口服抗凝血剂可以 是直接凝血酶抑制剂，或者可以是凝血因子Xa抑制剂. 在一些实施方案中，所述方法还包括：对被确定为存在于患者中的抗凝血剂分类，通过 (a)使所述对照血液成分的对照样品，在蝰蛇毒试剂的存在下经历凝集测定以获得对照蝰 蛇毒凝血测量结果；和（b)使来自患者的血液成分的患者样品，在蝰蛇毒试剂的存在下经 历凝集测定以获得患者蝰蛇毒凝血测量结果，其中当患者蝰蛇毒凝血测量结果大于对照蝰 蛇毒凝血测量结果时，则鉴定患者中的抗凝血剂为直接凝血酶抑制剂（DTI)，并且其中所述 患者蝰蛇毒凝血测量结果小于或等于对照蝰蛇毒凝血测量结果，鉴定患者中的抗凝血剂为 抗-凝血因子Xa抗凝血剂。 在另一个方面，本专利技术提供用于在怀疑有抗凝血剂的患者中检测和/或分类治疗相 关量或更高量的抗凝血剂的方法，其包括使来自患者的血液成分的第一样品，在凝血因子 Xa试剂的存在下经历凝集测定以获得患者凝血因子Xa凝血测量结果，使来自患者的所述 血液成分的第二样品，在蝰蛇毒试剂的存在下经历凝集测定以获得患者蝰蛇毒凝血测量结 果；以及比较患者凝血因子Xa的凝血测量结果和来自已知缺乏抗凝血剂的对照血液成分 的对照凝血因子Xa的凝血测量结果，以及比较患者蝰蛇毒凝血测量结果和来自对照血液 成分的对照蝰蛇毒凝血测量结果；其中所述患者蝰蛇毒凝血测量结果大于对照蝰蛇毒凝血 测量结果，则确定在患者中抗凝血剂以治疗相关量或高于治疗相关量存在，并确定该抗凝 血剂为直接凝血酶抑制剂（DTI)，并且其中患者凝血因子Xa凝血测量结果大于对照凝血因 子Xa凝血测量结果，则确定在患者中抗凝血剂以治疗相关量或高于治疗相关量存在，并鉴 定抗凝血剂为抗-凝血因子Xa抗凝血剂，并且其中患者凝血因子Xa凝血测量结果小于或 等于对照凝血因子Xa凝血测量结果，则确定在患者中缺乏治疗相关量或高于治疗相关量 的抗凝血剂. 在另一个方面，本专利技术提供了一种用于从患者的血液成分中分类治疗相关量或高于治 疗相关量的抗凝血剂的方法，其包括：确定血液成分中抗凝血剂的存在，通过（i)使已知不 包含抗凝血剂的对照血液成分的第一部分，在凝血因子Xa试剂的存在下经历凝集测定以 获得对照凝血因子Xa凝血测量结果；和（ii)使来自患者的血液成分的第一部分，在凝血因 子Xa试剂的存在下经历凝集测定以获得患者凝血因子Xa凝血测量结果，其中所述患者凝 血因子Xa凝血测量结果大于对照凝血因子Xa凝血测量结果，表明在患者血液成分中所述 抗凝血剂以治疗水平存在，和其中所述患者凝血因子Xa凝血测量结果小于或等于对照凝 血因子Xa凝血测量结果，表明在患者血液成分中缺乏治疗相关量的抗凝血剂，以及分类抗 凝血剂，如果存在于患者的血液成分，通过（i)使对照血液成分的第二部分，在蝰蛇毒试剂 的存在下经历凝集测定以获得对照蝰蛇毒凝血测量结果；和（ii)使患者血液成分的第二 部分，在所述蝰蛇毒试剂的存在下经历凝集测定以获得患者蝰蛇毒凝血测量结果，其中当 患者蝰蛇毒凝血测量结果大于对照蝰蛇毒凝血测量结果时，则鉴定该抗凝血剂为直接凝血 酶抑制剂（DTI)，并且其中所述患者蝰蛇毒凝血测量结果小于或等于对照蝰蛇毒凝血测量 结果，鉴定所述抗凝血剂为抗-凝血因子Xa抗凝血剂. 在一些实施方案中，凝集测定选自凝血酶原时间（PT)测定、活化部分凝血活酶时间 (APTT)测定和活化凝血时间（ACT)测定. 在一些实施方案中，对照样品的凝血测量结果的范围为来自已知缺乏抗凝血剂的至少 两个对照血液成分的至少两个对照样品的至少两个凝血测量结果. 在一些实施方案中，凝集测定是粘弹性分析凝集测定.在一些实施方案中，使用含有 位于容器内的样品的容器进行粘弹性分析.在一些实施方案中，使用容器和针进行粘弹性 分析，其中所述针相对于所述容器移动.在一些实施方案中，使用容器和针进行粘弹性分 析，其中所述容器相对于所述针移动。在一些实施方案中，所述容器没有底面。 在各个实施方案中，所述患者是人.在一些实施方案中，患者正经历包括手术、创伤、 出血、中风或血栓栓塞事件的条件。 在另一个方面，本专利技术提供了用于在怀疑有抗凝血剂的患者中分类治疗相关量（或更 高）的抗凝血剂的方法.该方法包括（a)确定来自所述患者的血液本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种在怀疑有抗凝血剂的患者中检测治疗相关量或更高量的抗凝血剂的方法，该方法包括a)使已知不包含抗凝血剂的对照血液成分的样品，在凝血因子Xa试剂的存在下经历凝集测定以获得对照凝血因子Xa的凝血测量结果；和b)使来自怀疑有抗凝血剂的患者的血液成分的样品，在凝血因子Xa试剂存在下经历凝集测定以获得患者的凝血因子Xa的凝血测量结果，其中患者凝血因子Xa凝血测量结果大于对照凝血因子Xa凝血测量结果，表明在患者中所述抗凝血剂以治疗相关量存在，并且其中所述患者凝血因子Xa凝血测量结果小于或等于对照凝血因子Xa凝血测量结果，表明在患者中不存在治疗相关量或更高量的抗凝血剂。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：法齐·S·扎曼，马克·道布尔迪，
申请(专利权)人：美国血液技术公司，
类型：发明
国别省市：美国;US