胰腺β-细胞增殖的调节制造技术

在一种实施方式中，本文描述的工作提供了一种用于增加需要的对象中胰腺β-细胞的增殖或复制的方法，所述方法包括向所述对象施用有效量的提高肝细胞癌相关蛋白TD26（TD26）的水平或活性的药剂，由此增加胰腺β-细胞的增殖或复制。这样的药剂可以通过例如提高所述对象中活性TD26的水平或通过提高所述对象中TD26的功能活性来发挥作用。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】胰腺β-细胞增殖的调节相关申请本申请要求2011年6月10日提交的美国临时申请系列号61/495，868和2012年3月21日提交的美国临时申请系列号61/613，856的权益，所述申请的教导通过参考以其整体并入本文。政府支持本申请利用国立卫生研究院(Nat1nal Institutes of Health)授予的DK090781政府支持做出。美国政府在本专利技术中具有一定权利。
技术介绍
细胞是位于胰岛中的一种类型的胰腺细胞，其制造和分泌胰岛素，胰岛素是一种控制血液中的葡萄糖水平的激素。β-细胞能够通过释放储存的胰岛素对血糖的增加作出快速响应，并在同时产生附加的胰岛素用于将来的需要。β_细胞的功能受损和/或数量减少与代谢疾病相关，所述代谢疾病包括糖尿病、肥胖症和其他疾病。糖尿病是源自于 多种致病因素并以空腹状态下血浆葡萄糖水平升高(高血糖症)为特征的疾病。存在两种主要形式的糖尿病:(I)胰岛素依赖型或I型糖尿病(也称为青少年糖尿病)和(2)非胰岛素依赖型或II型糖尿病(也称为NIDDM)。I型糖尿病由胰腺细胞的损失引起的胰岛素缺乏造成，这通常是胰岛的自体免疫破坏的结果。因此，在患有I型糖尿病的患者中，由胰岛细胞产生的胰岛素的量过低，导致血糖水平升高(高血糖症)。患有I型糖尿病的患者一般需要终生胰岛素治疗,但是即使频繁地每日注射胰岛素，也难以充分控制血糖水平。已经开发了能够减少免疫系统介导的胰岛破坏的治疗；然而，由于人类β -细胞的再生相对缓慢，因此单独的这种治疗不是改善糖尿病病症的令人满意的手段。然而，这些疗法可以有利地与能够刺激β-细胞再生的治疗剂相组合。在2型糖尿病患者中，肝细胞和肌细胞失去它们对正常血液胰岛素水平作出响应的正常能力(胰岛素抗性)，引起高血糖水平。此外，II型糖尿病患者表现出β-细胞功能受损和β-细胞凋亡增加，引起总β-细胞团随时间的减少。最终，施用外源胰岛素在2型糖尿病患者中变成必需的。治疗糖尿病的常规方法包括在I型糖尿病的情形中施用流体和胰岛素，以及在II型糖尿病中施用各种降血糖药剂。不幸的是，许多已知的降血糖药剂表现出不希望的副作用和毒性。因此，对于I型和2型糖尿病两者来说，需要开发能够刺激β-细胞增殖的药剂以用于治疗性方法和制剂。
技术实现思路
在一种实施方式中，本文描述的工作提供了一种用于增加需要的对象中胰腺β -细胞的增殖或复制的方法，所述方法包括向所述对象施用有效量的提高肝细胞癌相关蛋白TD26 (TD26)的水平或活性的药剂，由此增加胰腺细胞的增殖或复制。这样的药剂可以通过例如提高所述对象中活性TD26的水平或通过提高所述对象中TD26的功能活性来发挥作用。在一种实施方式中，本文描述了一种用于治疗或预防对象中与内源胰岛素水平降低相关的疾病的方法，所述方法包括向所述对象施用有效量的提高肝细胞癌相关蛋白TD26(TD26)的水平或活性的药剂，由此在所述对象中增加胰腺β -细胞增殖并提高内源胰岛素水平。在一种实施方式中，所述药剂是TD26蛋白或其功能性部分或者编码TD26或其功能性部分的核苷酸序列。还描述了一种用于治疗或预防对象中与内源胰岛素抗性相关的疾病的方法，所述方法包括向所述对象施用有效量的提高肝细胞癌相关蛋白TD26 (TD26)的水平或活性的药剂，由此在所述对象中增加胰腺β_细胞增殖并提高内源胰岛素水平。在一种实施方式中，所述药剂是TD26蛋白或其功能性部分或者编码TD26或其功能性部分的核苷酸序列。在特定实施方式中，所施用的药剂提高所述对象中内源TD26的水平。在一种情况下，所述药剂提高TD26的表达。在另一种情况下，所述药剂增加TD26的分泌。在另一种情况下，所述药剂提高TD26的稳定性，或者防止或以其他方式减缓TD26的降解。应该认识到，本专利技术设想了能够提高所述对象中TD26的水平或增加TD26半衰期的任何药剂。 在某些实施方式中，所述药剂是TD26蛋白或其功能性部分(例如卷曲螺旋结构域或缺少天然信号序列的TD26蛋白)。在某些实施方式中，TD26蛋白包含SEQ ID NO: 1、SEQID NO:2,SEQ IDN0:3或SEQ IDN0:4。在某些实施方式中，功能性部分例如可以是比完整的TD26氨基酸序列小、缺少天然信号序列并包含SEQ ID NO:1的第22-76位、第48-76位或第77-135位氨基酸的氨基酸序列的多肽。在其他实施方式中，所述药剂是编码TD26蛋白或TD26的功能性部分的核酸。在某些实施方式中，所述核酸包含SEQ ID NO: 14或SEQ ID NO: 15的全部或一部分。在其他实施方式中，所述药剂是胰岛素受体拮抗剂。例如，所述药剂可以选自S661、S661的功能性部分、S961、S961的功能性部分、RB537和RB537的功能性部分。在某些情况下，所述药剂包含SEQ ID NO: 16的全部或功能性部分。在某些实施方式中，所述胰岛素受体拮抗剂以优选地引起很少或不引起血糖水平升高或仅引起血糖水平暂时升高的剂量施用。在所述剂量引起血糖水平升高的情况下，它可以与针对所述血糖水平的其他治疗剂联合使用。作为非限制性实例，所述胰岛素受体拮抗剂在某些情况下可以以低于约10 μ Mol/Kg/周(例如低于约9 μ Mol/Kg/周、约8 μ Mol/Kg/ 周、约 7 μ Mol/Kg/ 周、约 6 μ Mol/Kg/ 周、约 5 μ Mol/Kg/ 周、约 4 μ Mol/Kg/ 周、约3 μ Mol/Kg/ 周、约 2 μ Mol/Kg/ 周、约 I μ Mol/Kg/ 周、约 0.90 μ Mol/Kg/ 周、约 0.80 μ Mol/Kg/ 周、约 0.70 μ Mol/Kg/ 周、约 0.60 μ Mol/Kg/ 周、约 0.50 μ Mol/Kg/ 周、约 0.40 μ Mol/Kg/周、约 0.30 μ Mol/Kg/周、约 0.20 μ Mol/Kg/周、约 0.10 μ Mol/Kg/周)的剂量施用于所述对象。在特定实施方式中，所述胰岛素受体拮抗剂以约ΙμΜοΙ/Kg/周的剂量施用于所述对象。在某些所描述的实施方式中，所述疾病选自糖尿病(例如I型糖尿病或II型糖尿病)、代谢综合征、葡萄糖耐受不良和肥胖症。还公开了一种鉴定用于治疗与内源胰岛素水平降低相关的疾病的候选治疗剂(例如胰岛素受体拮抗剂)的方法，所述方法包括将适合的细胞与受试药剂相接触；以及测定所述受试药剂对TD26的水平或活性的影响，其中提高TD26水平或活性的受试药剂是用于治疗与内源胰岛素水平降低相关的疾病的候选治疗剂。在某些情况下，通过将所述受试药剂的影响与已知提高TD26水平或活性的治疗剂的影响进行比较，来评估所述受试药剂对TD26的水平或活性的影响。通过本文描述的工作鉴定到的一种这样的治疗剂是例如S961。在某些情况下，通过测定所述受试药剂对TD26的基因表达水平的影响来评估所述受试药剂对TD26的水平或活性的影响。在其他情况下，本专利技术设想了通过施用一种或多种胰岛素受体拮抗剂来增加β-细胞复制或增殖的方法。适合的拮抗剂例如可以干扰胰岛素与胰岛素受体相互作用的能力，或可以中和胰岛素的生物学效应。胰岛素受体拮抗剂例如可以提高TD26的水平或活性，优选地本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于增加需要的对象中的胰腺β‑细胞增殖的方法，所述方法包括向所述对象施用有效量的提高肝细胞癌相关蛋白TD26（TD26）的水平或活性的药剂，由此增加胰腺β‑细胞的增殖。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.06.10 US 61/495,868;2012.03.21 US 61/613,8561.一种用于增加需要的对象中的胰腺β-细胞增殖的方法，所述方法包括向所述对象施用有效量的提高肝细胞癌相关蛋白TD26 (TD26)的水平或活性的药剂，由此增加胰腺β-细胞的增殖。2.一种用于治疗或预防对象中与内源胰岛素水平降低相关的疾病的方法，所述方法包括向所述对象施用有效量的提高肝细胞癌相关蛋白TD26 (TD26)的水平或活性的药剂，由此在所述对象中增加胰腺β-细胞的增殖并提高内源胰岛素的水平。3.一种用于治疗或预防对象中与内源胰岛素抗性相关的疾病的方法，所述方法包括向所述对象施用有效量的提高肝细胞癌相关蛋白TD26 (TD26)的水平或活性的药剂，由此在所述对象中增加胰腺β-细胞的增殖并提高内源胰岛素的水平。4.一种用于增加对象中的胰腺细胞的增殖或者治疗或预防对象中的糖尿病的方法，所述方法包括向所述对象施用有效量的药剂，由此提高所述对象中的内源胰岛素的水平，所述药剂是肝细胞癌相关蛋白TD26 (TD26)或其功能性部分或者编码TD26或其功能性部分的核酸。5.权利要求1、2或3任一项的方法，其中所述药剂提高所述对象中内源TD26的水平或活性。6.权利要求1、2或3任一项的方法，其中所述药剂提高TD26的表达。7.权利要求1、2或3任一项的方法，其中所述药剂增加TD26的分泌。8.权利要求1、2、3或4任一项的方法，其中所述药剂是TD26蛋白或其功能性部分。9.权利要求8的方法，其中所述功能性部分不包含TD26的完整氨基酸序列或天然信号肽序列。10.权利要求8或9任一项的方法，其中所述功能性部分包含缺少TD26的一个或多个功能性结构域或完整结构域的肽。11.权利要求8、9或10任一项的方法，其中所述功能性部分包含缺少TD26的功能性LPL结构域或完整的LPL结构域的肽。12.权利要求8、9、10或11任一项的方法，其中所述功能性部分包含缺少TD26的功能性CCD结构域或完整的CCD结构域的肽。13.权利要求8、9、10、11或12任一项的方法，其中所述功能性部分包含缺少TD26的功能性IVS或完整的IVS的肽。14.权利要求8或9任一项的方法，其中所述功能性部分包含选自下列的肽:SEQIDNO:1的第22至76位氨基酸的肽，SEQ ID NO:1的第48至76位氨基酸的肽，和SEQ ID NO:1的第77至135位氨基酸的肽。15.权利要求1、2、3或4任一项的方法，其中所述药剂是编码TD26蛋白或TD26的功能性部分的核酸。16.权利要求15的方法，其中所述核酸编码TD26蛋白的功能性部分，所述功能性部分不包含TD26的完整氨基酸序列或天然信号肽。17.权利要求15或16任一项的方法，其中所述核酸编码TD26蛋白的功能性部分，所述功能性部分缺少TD26的一个或多个功能性结构域或完整结构域。18.权利要求15、16或17任一项的方法，其中所述核酸编码TD26蛋白的功能性部分，所述功能性部分缺少TD26的功能性LPL结构域或完整的LPL结构域。19.权利要求15、16、17或18任一项的方法，其中所述核酸编码TD26蛋白的功能性部分，所述功能性部分缺少TD26的功能性CCD结构域或完整的CCD结构域。20.权利要求15、16、17、18或19任一项的方法，其中所述核酸编码TD26蛋白的功能性部分，所述功能性部分缺少TD26的功能性IVS或完整的IVS。21.权利要求15或16任一项的方法，其中所述功能性部分包含编码选自下列的肽的核酸:SEQ ID NO:1的第22至76位氨基酸的肽，SEQ ID NO:1的第48至76位氨基酸的肽，和SEQ ID NO:1的第77至135位氨基酸的肽。22.权利要求8或15任一项的方法,其中所述TD26蛋白缺少信号序列。23.权利要求8、15或22任一项的方法，其中所述功能性部分包含TD26蛋白的卷曲螺旋结构域。24.权利要求8、15、22或23任一项的方法，其中所述TD26蛋白包含SEQID NO: 1、SEQID NO: 2、SEQ ID NO: 3 或 SEQ ID NO:4 的全部或一部分。25.权利要求8或15任一项的方法，其中所述TD26蛋白包含一个或多个天然存在的氨基酸变体。26.权利要求8或15任一项的方法，其中所述TD26蛋白包含与SEQID NO: 1、SEQ IDNO:1的第22-198位氨基酸、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3的同一性为至少80%的氨基酸序列。27.权利要求15的方法，其中所述核酸包含SEQID NO: 14或SEQID NO: 15的全部或一部分。28.权利要求15的方法,其中所述核酸包含一个或多个单核苷酸多态性。29.权利要求15的方法，其中所述核酸包含与SEQID NO: 14或SEQ ID NO: 15的同一性为至少80%的核苷酸序列。30.权利要求1、2或3任一项的方法，其中所述药剂是胰岛素受体拮抗剂。31.权利要求1、2、3或30任一项的方法，其中所述药剂选自S661、S661的功能性部分、S961、S961的功能性部分、RB537和RB537的功能性部分。32.权利要求31的方法，其中所述药剂以足以引起β_细胞增殖的剂量施用于所述对象，并且选自S961、S961的功能性部分、S661和S661的功能性部分。33.权利要求1、2、3或30任一项的方法，其中所述药剂以足以引起β-细胞增殖的剂量施用于所述对象，并且选自SEQ ID NO: 16,SEQID NO: 16的功能性部分、SEQ ID NO: 17和SEQID NO: 17的功能性部分。34.权利要求1、2、3或18任一项的方法，其中所述药剂是选自下列的肽:具有与SEQIDNO: 16的同一性为至少80%的氨基酸序列的肽，和具有与SEQ ID NO: 17的同一性为至少80%的氨基酸序列的肽。35.权利要求2或3任一项的方法，其中所述疾病选自糖尿病、代谢综合征、葡萄糖耐受不良和肥胖症。36.权利要求2或3任一项的方法，其中所述疾病是I型糖尿病或II型糖尿病。37.权利要求4的方法，其中所述糖尿病是I型糖尿病或2型糖尿病。38.权利要求1的方法，其中增加细胞的增殖引起所述对象中细胞团增加。39.一种用于增加需要的对象中的胰腺β_细胞增殖的方法，所述方法包括向所述对象施用有效量的胰岛素受体拮抗剂。40.胰岛素受体拮抗剂在增加需要的对象中的胰腺细胞的增殖中的应用。41.胰岛素受体拮抗剂在制造用于增加需要的对象中的胰腺β_细胞增殖的药物中的应用。42.权利要求39、40或41任一项的应用，用于治疗糖尿病。43.一种鉴定能够增加胰腺β_细胞增殖的候选药剂的方法，所述方法包括评估所述候选药剂拮抗胰岛素受体的能力。44.一种鉴定用于增加胰腺β_细胞增殖的候选治疗剂的方法，所述方法包括: 将适合的细胞与受试药剂相接触；以及 测定所述受试药剂对TD26的水平或活性的影响， 其中提高TD26水平或活性的受试药剂是用于增加胰腺β -细胞增殖的候选治疗剂。45.一种鉴定用于治疗与内源胰岛素水平降低相关的疾病的候选治疗剂的方法，所述方法包括: 将适合的细胞与受试药剂相接触；以及 测定所述受试药剂对TD26的水平或活性的影响， 其中提高TD26水平或活性的受试药剂是用于治疗与内源胰岛素水平降低相关的疾病的候选治疗剂。46.一种鉴定用于治疗或预防与内源胰岛素抗性相关的疾病的候选治疗剂的方法，所述方法包括: 将适合的细胞与受试药剂相接触；以及 测定所述受试药剂对TD26的水平或活性的影响， 其中提高...

【专利技术属性】
技术研发人员：道格拉斯·A·梅尔顿，伊鹏，
申请(专利权)人：哈佛学院校长同事会，
类型：发明
国别省市：美国;US