经培养的胰腺细胞及其培养方法和用途技术

本发明专利技术涉及从糖尿病动物的胰腺组织中分离、培养胰岛干细胞和将胰岛干细胞诱导分化为可分泌胰岛素的胰腺内分泌细胞的方法。从糖尿病动物胰腺组织中分离胰岛细胞团，然后ａ）将从糖尿病动物胰腺组织中分离出的胰岛细胞团加入装有培养基Ａ的培养皿中，培养２－５天；ｂ）将悬浮的胰岛细胞团接种于含有培养基Ｂ的培养皿中培养；ｃ）经过６－２０天，生长出星形胰岛干细胞；ｄ）在所述星形胰岛干细胞将汇合时传代，至到长满传代后的培养皿，得到胰岛干细胞。将胰岛干细胞接种于含有培养基Ｃ的培养皿中，培养２－５天；将培养基Ｃ更换为培养基Ｄ，但仍然在培养皿中，培养大约４－１５天，得到可分泌胰岛素的胰腺内分泌细胞。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种检测糖尿病动物胰腺组织中胰腺干细胞的方法，包括：ａ）免疫组化检测，包括：胰腺组织固定，制作石蜡包埋切片，封闭后接触一抗抗体，接触二抗抗体，然后封片观察，其中所述一抗抗体包括兔抗巢蛋白抗体；ｂ）ＲＴ－ＰＣＲ分析，包括提取总ＲＮＡ，通过逆转录形成ｃＤＮＡ，然后利用引物进行ＰＣＲ扩增；ｃ）根据步骤ａ）和ｂ）的结果确定糖尿病动物胰腺组织中是否存在胰腺干细胞。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：张愚，邹春林，陈彪，
申请(专利权)人：广西南宁灵康赛诺科生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：45[中国|广西]