【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了,包括以下步骤:步骤1)制备反应液;步骤2)将上述反应液放入63℃烘箱进行反应30-60min,浑浊为阳性;步骤3)提取临床分离空肠耶尔森氏菌,大肠耶尔森氏菌,以及若干临床分离金黄色葡萄球菌、头皮葡萄球菌、人型葡萄球菌、表皮葡萄球菌、草绿色链球菌、大肠杆菌、克雷伯菌的核酸,多次进行反应,观察它们的阴阳性。本专利技术通过配制反应液,设计引物序列,能快速、准确的检测食源性致病性耶尔森氏菌,并及时采取相应的措施,减少了疾病的发生率。【专利说明】
本专利技术涉及疾病检测
,具体的说,是。
技术介绍
耶尔森氏菌为动物肠道寄生菌,广泛存在于动物体内。本菌在外界环境(河水、井水、蒸馏水)中不仅可长期生存,而且可以繁殖。本菌有嗜冷性,食品一旦被污染,在冷藏中仍能继续繁殖,故该病冬季多发。现代文明的“电冰箱肠炎”致病菌,就是人兽共同的耶尔森氏菌。耶尔森氏菌属包括11种,其中对人有致病性的有三种:小肠结肠炎耶尔森氏菌、假结核菌和鼠疫菌。只有小肠结肠炎耶尔森氏菌和假结核菌已确定是食源性病原体。快速检测食源性致病性耶尔森氏菌对于食品卫生具有很大的意义。环介导等温扩增技术是由日本荣研(EIKEN)株式会社开发的高特异性敏感度的核酸检测系统,无须昂贵的设备,已经成为核酸快速检测法的良好手段,本专利技术结合环介导等温扩增技术,设计针对耶尔森氏菌特异性基因序列的一对外引物(Y-F3和Y-B3)和一对内引物(Y-FIP和Y-BIP)进行环介导等温扩增。
技术实现思路
本专利技术公开了,提高了食源性致病性耶尔森氏菌的检测和诊断效率。为实现上述技 ...
【技术保护点】
一种高特异高敏感检测食源性致病性耶尔森氏菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1)制备反应液反应液组成及含量为8u/ul?Bst核酸聚合酶??????????????????????????8u10X耐热聚合酶反应缓冲液?????????????????1X,MgSO4?2mM4M?甜菜碱????????????????????????????????????1M10mM?d?NTP混合液????????????????????????????400μM内引物???Y?FIP???????????????????????????????????40umol???Y?BIP???????????????????????????????????40umol外引物???Y?F3????????????????????????????????????5umol???Y?B3????????????????????????????????????5umol标本核酸????????????????????????????????????20ng添加焦碳酸二乙酯处理水至总量达到25ul;步骤2)将 ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:金京勋,吕少波,李苏杨,
申请(专利权)人:苏州四同医药科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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